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三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI) ChP

來源: 發(fā)布時間:2023-05-16

什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,,酸性時為黃色,,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響,,可以通過純化技術(shù)去除,,但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細胞生長,當然這種作用能被血清所中和或減輕,。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,,很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基。研究表明,,酚紅可以模擬固醇類的作用,。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細胞,,尤其是哺乳類細胞時,,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,,一些研究人員在做流式細胞檢測時,,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。微生物的供能方式會影響它對營養(yǎng)物質(zhì)的利用,,因此不同微生物需要不同成分的培養(yǎng)基,。三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI) ChP

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡,。所以,,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲存兩周以上時,,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺,。GlutaMAX-I是什么,?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I,?這個二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,,釋放L-谷氨酰胺供利用,。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解,。藥敏試驗瓊脂自制培養(yǎng)基需要小心配比,,防止成分誤差或者污染,。

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培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分區(qū)分:1.天然培養(yǎng)基,,天然培養(yǎng)基是指一類利用動物,、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如,。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。2.組合培養(yǎng)基,,合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計而配制的培養(yǎng)基,。例如,。高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。3.半組合培養(yǎng)基 ,,指一類主要以化學(xué)試劑配制,,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,。

培養(yǎng)基有天然、人工兩種,。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,,若pH值超過7.6或遠低于6.8,,則大多數(shù)細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理,。培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體,,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類,、時間而定,,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜,、條件不易控制,,可選用無血清培養(yǎng)基。人工合成基因可以在特定的培養(yǎng)基中得到表達,需要選擇含有適當營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基,。

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要獲得微生物純培養(yǎng),,必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌,。對培養(yǎng)基而言,,更是要進行嚴格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,,長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,,112.6℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基,,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,,再與其他已滅菌的成分混合?;瘜W(xué)制劑和生物制劑都可以用于制備培養(yǎng)基,,例如氨基酸、蔗糖和酵母提取物,。產(chǎn)氣莢膜梭菌測定用培養(yǎng)基

特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細胞培養(yǎng),。三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI) ChP

培養(yǎng)基的種類有哪些?鑒別培養(yǎng)基:利用細菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,,觀察細菌生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物,通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別細菌,。例如糖發(fā)酵管,、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等,。選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,,去抑制標本中的雜菌生長,,有助于所選擇的細菌種類的生長,。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI) ChP

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