要獲得微生物純培養(yǎng),，必須避免雜菌污染，因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌,。對培養(yǎng)基而言,，更是要進行嚴(yán)格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,，一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,，121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中，長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖,、焦糖，因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,，112.6℃15-30分鐘進行滅菌,，某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基，可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,，再與其他已滅菌的成分混合,。致病菌常用的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊培養(yǎng)基,。無機鹽淀粉瓊脂

還有一些鑒別性培養(yǎng)基,，是利用細(xì)菌特有的各種酶系統(tǒng)，能分解利用各種特定的糖,、醇,、氨基酸或其他基質(zhì)而產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,、產(chǎn)堿或產(chǎn)生其他可見物質(zhì),，依此進行細(xì)菌的鑒別，例如常用的生化培養(yǎng)基,。用于細(xì)菌生化特性試驗的培養(yǎng)基特點是在無糖的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加人某種特定的基質(zhì),，并加人指示劑，細(xì)菌在此類培養(yǎng)基中的一系列生化反應(yīng)結(jié)果,，均通過指示劑顯示出來,。此類培養(yǎng)基為生化反應(yīng)鑒別培養(yǎng)基。根據(jù)用量又可分為常量生化培養(yǎng)基和微量生化培養(yǎng)基,。值得注意的是生化試驗培養(yǎng)基的某些成分受高溫,、pH等諸多因素的影響，在配制和使用時,，應(yīng)根據(jù)實際情況嚴(yán)格掌握,，防止有效成分被破壞，以保障其使用效果,。布氏活菌苗瓊脂培養(yǎng)基需要控制pH值,、溫度、氣氛等因素,，以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性,。

培養(yǎng)基按成分分類有哪些？上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,，根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,，可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類,。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學(xué)成分的天然物質(zhì)。如蛋白胨,、牛肉膏(粉)、肉浸液,、玉米漿,、血液、馬鈴薯等,。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致,，因此在選用原料時務(wù)必注明其商品名稱、生產(chǎn)廠家及批號,，對不同來源的原料應(yīng)先做小樣試驗,。此種培養(yǎng)基成本較低，細(xì)菌繁殖較好,，一般細(xì)菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主,。

鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應(yīng)底物和指示劑，以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之,。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基,。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基，此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑,，如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基,，含有葡萄糖及乳糖，以酚紅作為指示劑,，觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細(xì)菌對葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力,，加人檸檬酸鐵銨，培養(yǎng)后觀察是否產(chǎn)生黑色沉著以判定細(xì)菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫,；又如伊紅-美藍瓊脂,，含有乳糖(反應(yīng)底物)、伊紅-美藍(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌,、腸道病原菌和其他雜菌,。一般鑒別培養(yǎng)基的特點是在配方中都含有指示劑，并可用于區(qū)別不同種類的微生物,，有些鑒別培養(yǎng)基也可同時作為細(xì)菌的特殊需要用來分離培養(yǎng)某些細(xì)菌,，如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂。LB培養(yǎng)基是普遍使用的通用培養(yǎng)基,，適用于大多數(shù)腸道菌和非腸道菌的培養(yǎng),。

以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ)，向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,，微量元素100×母液20mL,，鐵鹽100×母液20mL,，維生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL,，甘氨酸200×母液10mL,，配制得MS培養(yǎng)基后,，再加入0.5mg·L-1的BA8mL,，0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,，加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,，用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,，將鋁鍋置于電爐上,，攪拌加熱使瓊脂完全溶化，然后用蒸餾水定容至終體積2L,，繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中,。在有些情況下，培養(yǎng)基還需要進行一些化學(xué)處理,。0.1ml桿菌肽溶液（200U/ml）

培養(yǎng)基的配方也會受到環(huán)境,、藥物和其他外部壓力的影響，因此,，在實際應(yīng)用中需要不斷進行調(diào)整和改進,。無機鹽淀粉瓊脂

1951年厄爾開發(fā)了供動物細(xì)胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多,。合成培養(yǎng)基成分已知,，便于對實驗條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代,，因此，細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,，以克服合成培養(yǎng)基的不足,。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復(fù)雜,，各種生物大小分子混合在一起,，有些成分至今尚未搞清楚。血清對細(xì)胞生長很有效,，但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離,、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限,，成本高,，限制了它的大量使用,。無血清培養(yǎng)基不加動物血清，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長有效因子等,。無機鹽淀粉瓊脂

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