要獲得微生物純培養(yǎng),，必須避免雜菌污染，因此對所用器材及工作場所進(jìn)行消毒與滅菌,。對培養(yǎng)基而言,，更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌,。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,，121.3℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的,。在高壓蒸汽滅菌過程中，長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖,、焦糖，因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,，112.6℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌,，某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基，可先將糖進(jìn)行過濾除菌或間歇滅菌,，再與其他已滅菌的成分混合,。細(xì)胞類培養(yǎng)基則可分為無血清培養(yǎng)基和含血清培養(yǎng)基兩類。秕糠馬拉色拉菌液體培養(yǎng)基

培養(yǎng)基按成分分類有哪些,？按形態(tài)分類：培養(yǎng)基按其不同的物理狀態(tài),，可分為液體、流體,、半固體和固體4類,，培養(yǎng)基的物理狀態(tài)取決于培養(yǎng)基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量。1,、液體培養(yǎng)基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑,，常溫下以完全液態(tài)存在的培養(yǎng)基，如肉湯培養(yǎng)基或一般液體增菌培養(yǎng)基,。2,、流體培養(yǎng)基(semi-liquidmedium)在液體培養(yǎng)基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉，使其具一定黏度,，即成流體培養(yǎng)基,。加入瓊脂粉增加了培養(yǎng)基的黏度，降低空氣中的氧氣進(jìn)人培養(yǎng)基的速度,，能使培養(yǎng)基保持較長時間的厭氧條件,，有利于一般厭氧菌的生長繁殖，如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基等,。一般用于霉菌和厭氧菌檢查的液體培養(yǎng)基中可加人少量瓊脂使其成為流體培養(yǎng),。VogelJohnson瓊脂基礎(chǔ)微生物的供能方式會影響它對營養(yǎng)物質(zhì)的利用，因此不同微生物需要不同成分的培養(yǎng)基,。

不同類型微生物生長對氧化還原電位（F）的要求不一樣,，一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時可正常生長，一般以+0.3—+0.4V為宜,，厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長,，兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時進(jìn)行好氧呼吸，在+0.1V以下時進(jìn)行發(fā)酵,。F值與氧分壓和pH有關(guān),，也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對穩(wěn)定的條件下,，可通過增加通氣量（如振蕩培養(yǎng),、攪拌）提高培養(yǎng)基的氧分壓，或加入氧化劑,，從而增加F值,；在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫,、半胱氨酸,、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值,。

培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),，以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,，一般來講,，細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長,。值得注意的是,，在微生物生長繁殖和代謝過程中，由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,，會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,，若不對培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制，往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或（和）代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降,。因此,，為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定，通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,，常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽（如KH2PO4和K2HPO4）組成的混合物,。K2HPO4溶液呈堿性,，KH2PO4溶液呈酸性，兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8,。當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時,，H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,，培養(yǎng)基pH不會過度降低,；如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加，OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,，培養(yǎng)基pH也不會過度升高,。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基。

半固體培養(yǎng)基(half-solid medium) 在液體培養(yǎng)基中加人0.2%~0.5%的瓊脂粉,，加熱溶解后冷卻即成,，以倒置不流動的較軟狀態(tài)為宜，一般供細(xì)菌動力試驗,、菌種傳代,、保存和儲運標(biāo)本之用。固體培養(yǎng)基(solid medium) 培養(yǎng)基中含有足量的凝固劑(瓊脂粉>0.5%),，在常溫下能保持固體狀態(tài),。此類培養(yǎng)基大都用于微生物的分離、純化,、藥敏試驗及菌苗制造,。如營養(yǎng)瓊脂、營養(yǎng)斜面,、SS瓊脂,、TCBS瓊脂等。此外,，還有一些特殊用途的培養(yǎng)基,，如用血清或雞蛋做凝固劑配成的呂氏血清斜面培養(yǎng)基、雞蛋斜面培養(yǎng)基等,。Luria-Bertani 培養(yǎng)基是一種常用的細(xì)菌培養(yǎng)基,，可用于大腸桿菌 E. coli 的培養(yǎng)。MSE瓊脂

特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細(xì)胞培養(yǎng),。秕糠馬拉色拉菌液體培養(yǎng)基

L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎,？它在溶液中不穩(wěn)定嗎？L-谷氨酰胺（L-Glutamine）是細(xì)胞生長的必須氨基酸,，可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源,，參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定,，它的降解速率隨保存時間,，保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化,。L-丙胺酰-谷氨酰胺（L-alanyl-L-glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品，其在水溶液中穩(wěn)定性高,，即可保持長時間穩(wěn)定的營養(yǎng)供給,，也降低了分解產(chǎn)物造成的細(xì)胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液（L-alanyl-L-glutamineslution）可作為哺乳動物貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,。與谷氨酰胺相比,，L-丙胺酰-谷氨酰胺不會自行降解成氨而導(dǎo)致細(xì)胞毒性，作為添加物培養(yǎng)條件更加可控,，可有效提高細(xì)胞活力,。秕糠馬拉色拉菌液體培養(yǎng)基

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