培養(yǎng)基,,是指供給微生物,、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質,。一般都含有碳水化合物,、含氮物質,、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質,。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質,,也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多,,根據配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基,、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基,;根據物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基,、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基,;根據培養(yǎng)功能可分為基礎培養(yǎng)基,、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基,、鑒別培養(yǎng)基等,;根據使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基,、酵母菌培養(yǎng)基等,。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調節(jié)pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌,。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質,,易被污染或變質。配好后不宜久置,,現(xiàn)配現(xiàn)用,。培養(yǎng)基可以分為有機培養(yǎng)基和無機培養(yǎng)基兩類。M4培養(yǎng)基
血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,,其組成成份雖大部分已知,,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別,、年齡,、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白,、多肽,、脂肪、碳水化合物,、生長因子,、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的,。血清主要作用:提供基本營養(yǎng)物質:氨基酸,、維生素、無機物,、脂類物質,、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質,。胰蛋白胨-亞硫酸鹽-瓊脂培養(yǎng)基胰蛋白胨亞硫酸鹽瓊脂培養(yǎng)基雜質會影響培養(yǎng)基的成分,,因此制備培養(yǎng)基時需要進行滅菌。
選擇性培養(yǎng)基是指根據某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學,、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基,。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌,從而提高該菌的篩選效率,。酵母菌富集培養(yǎng)基:葡萄糖5%,,尿素0.1%,硫化銨0.1%,,磷酸二氫鉀0.25%,,磷酸氫二鈉0.05%,七水合硫酸鎂0.1%,,七水合硫酸鐵0.01%,,酵母膏0.05%,孟加拉紅0.003%,pH4.5,。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,,磷酸二氫鉀0.02%,七水合硫酸鎂0.02%,,氯化鈉0.02%,,二水合硫酸鈣0.01%,碳酸鈣0.5%
細菌培養(yǎng)基之根瘤菌培養(yǎng)基:葡萄糖10g,,磷酸氫二鉀0.5g,,碳酸鈣3g,硫酸鎂0.2g,,酵母粉0.4瓊脂20g,,水1000ml,1%結晶紫溶液1ml,。先把瓊脂加水煮沸溶解,,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,,分裝,滅菌,,備用,。放線菌培養(yǎng)基:(1)淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(高氏一號培養(yǎng)基)可溶性淀粉2.0g,硝酸鉀0.1g,,磷酸氫二鉀0.05g,,氯化鈉0.05g,硫酸鎂0.05g,,硫酸亞鐵0.001g,,瓊脂2g,水100ml,。先把淀粉放在燒杯里,,用5ml水調成糊狀后,倒入95ml水,,攪勻后加入其他藥品,,使它溶解。在燒杯外做好記號,,加熱到煮沸時加入瓊脂,,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,,補足失水,。調整pH值到7.2-7.4,分裝后滅菌,備用,。細胞類培養(yǎng)基則可分為無血清培養(yǎng)基和含血清培養(yǎng)基兩類,。
培養(yǎng)基的分類有幾種呢?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,,按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)區(qū)分:1.液體培養(yǎng)基,,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,。2.固體培養(yǎng)基,,一類配制成的固體狀態(tài)的基質。根據性質又分為固化培養(yǎng)基,、非可逆性固化培養(yǎng)基,、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜,。3.半固體培養(yǎng)基,,指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基,,又稱預制干燥培養(yǎng)基,,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基,、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類,。山梨醇麥康凱半固體培養(yǎng)基
為了避免細胞爆破釋放DNA和蛋白質,培養(yǎng)基中常常添加DNA酶和蛋白酶等酶類,。M4培養(yǎng)基
氨基酸是細胞合成蛋白質的基本成分,,氨基酸中有12種是細胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供,。水解乳蛋白,、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產物,,呈蛋黃色粉末狀,,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,,微酸性,。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細胞表面特性促使其附著生長的作用,。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等,。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,,如皰肉培養(yǎng)基,、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,,由于胞內滲透壓較高,,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。M4培養(yǎng)基
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