什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅,?酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,,酸性時為黃色,堿性時為紫色,。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響,,可以通過純化技術(shù)去除,但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細(xì)胞生長,,當(dāng)然這種作用能被血清所中和或減輕,。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基,。研究表明,,酚紅可以模擬固醇類的作用。為避免固醇類反應(yīng),,培養(yǎng)細(xì)胞,,尤其是哺乳類細(xì)胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基,。由于酚紅干擾檢測,,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基,。常見的培養(yǎng)基包括LB培養(yǎng)基,、TSB培養(yǎng)基等。IsoSensitest 肉湯
bFGF是一個肝素結(jié)合的多膚類絲裂源,,普遍分布于各種組織中,。bFGF 是一種重要的細(xì)胞增殖分化調(diào)節(jié)劑,可刺激多種細(xì)胞的增殖,。有研究發(fā)現(xiàn)它對滋養(yǎng)細(xì)胞也有促增殖作用,。bFGF 主要是與細(xì)胞膜上FGF受體結(jié)合發(fā)揮作用,刺激與增殖有關(guān)的基因表達(dá),。Thomson 等認(rèn)為,,像其他體外培養(yǎng)的人體細(xì)胞一樣,hES 細(xì)胞要求 bFGF 的存在以促進(jìn)增殖,。同理EGF(上皮生長因子) , 是人體內(nèi)的一種活性物質(zhì),,由53個氨基組成的活細(xì)胞,藉由刺激表皮細(xì)胞生長因子受體之酪氨酸磷酸化,,達(dá)到修補增生肌膚表層細(xì)胞,,據(jù)說對受傷,、受損之表皮肌膚擁有很好的療效,,其較大特點是能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖分化。所以加入它們都是促進(jìn)細(xì)胞增殖的,。改良R2A瓊脂常見的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基,,YPD培養(yǎng)基,M9培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基等,。
1951年厄爾開發(fā)了供動物細(xì)胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM),。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對實驗條件的控制,。但與天然培養(yǎng)基相比,,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,,細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清,。動物血清成分復(fù)雜,,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚,。血清對細(xì)胞生長很有效,,但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難,。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限,,成本高,限制了它的大量使用,。無血清培養(yǎng)基不加動物血清,,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長有效因子等。
合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學(xué)成分的營養(yǎng)物質(zhì)組成的培養(yǎng)基,。根據(jù)微生物對營養(yǎng)要求的不同,,可完全由無機鹽或化合物組成,如:氨基酸,、糖,、嘌呤、嘧啶,、維生素等,,其組成成分已知,只要嚴(yán)格操作,,各批次間質(zhì)量可做到穩(wěn)定一致,。此培養(yǎng)基可用來檢測某種營養(yǎng)物或藥物對微生物代謝的影響。組織細(xì)胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基,。合成培養(yǎng)基的成本較高,,其價格相當(dāng)于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機鹽的合成培養(yǎng)基,,只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng),,如培養(yǎng)亞硝化細(xì)菌、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基,。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學(xué)結(jié)構(gòu)的營養(yǎng)物質(zhì),,其中的個別或少數(shù)成分為未明化學(xué)成分的必須營養(yǎng)物,,成為半合成培養(yǎng)基,如百日咳菌苗生產(chǎn)用的水解酪素培養(yǎng)基,。培養(yǎng)基制備的質(zhì)量和配方對于細(xì)胞和微生物的生長,、分化和培養(yǎng)效果具有至關(guān)重要的作用。
培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,一般來講,,細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是,,在微生物生長繁殖和代謝過程中,,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,,若不對培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制,,往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物,。K2HPO4溶液呈堿性,,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8,。當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時,,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低,;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高,。雜質(zhì)會影響培養(yǎng)基的成分,,因此制備培養(yǎng)基時需要進(jìn)行滅菌。酒香酵母瓊脂基礎(chǔ)
牛肉精蛋白胨培養(yǎng)基是常用的富營養(yǎng)培養(yǎng)基,,適用于快速生長的微生物,。IsoSensitest 肉湯
是一家長年生產(chǎn)經(jīng)營各種培養(yǎng)基,菌種,,標(biāo)準(zhǔn)品,,酶的綜合性公司,。公司于2012-11-29成立,,位于寶安公路4997號2號樓5樓。人杰地靈,資源豐富,,交通便捷,。目前主營產(chǎn)品是培養(yǎng)基,菌種,,標(biāo)準(zhǔn)品,,酶,公司現(xiàn)已擁有完善的基礎(chǔ)設(shè)施,,先進(jìn)的生產(chǎn)工藝,,配套的生產(chǎn)設(shè)備,齊全的檢測儀器,。公司培養(yǎng)基,,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,,酶產(chǎn)品適用于化工,、生物、染料,、冶金,、稀土、冶煉,、機械,、電力、電子,、環(huán)保,、紡織、釀造,、食品,、航空、給水,、排水等行業(yè),。公司培養(yǎng)基,菌種,,標(biāo)準(zhǔn)品,,酶產(chǎn)品銷往江蘇、上海,、浙江,、福建、安徽,、江西,、山東,、山西、河北,、河南,、北京、天津,、遼寧,、吉林、黑龍江,、內(nèi)蒙,、寧夏、陜西,、新疆,、青海、湖南,、湖北,、重慶、四川,、貴州,、云南、廣東,、廣西,、海南等省市和自治區(qū)。IsoSensitest 肉湯
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