2.3單體法
單體聚合法是目前研究**多、被***采用的制備方法,。單體聚合法是在有機(jī)單體和磁性粒子共同存在的情況下,,根據(jù)不同的聚合方式加入表面活性劑、穩(wěn)定劑,、引發(fā)劑等聚合制備磁性高分子微球的方法,。常用的方法主要包括乳液聚合、(微)懸浮聚合,、分散聚合以及活性聚合等,。其中乳液聚合又分為無皂乳液聚合、Pickering乳液聚合法,、種子乳液聚合,、細(xì)乳液聚合法、反相乳液聚合,、原位乳液聚合等,。
2.3.1乳液聚合
無皂乳液聚合是指在反應(yīng)過程中完全不加乳化劑或者**加入微量乳化劑(其濃度小于臨界膠束濃度(CMC))的乳液聚合過程Wu采用將通過油酸改性后的Fe3O4納米粒子與溫敏性N-異丙基丙稀醜胺在交聯(lián)劑DVB作用下,通過無培乳液聚合方法制備了具有磁場和溫度雙重相應(yīng)的復(fù)合微球,,該復(fù)合微球具有核殼結(jié)構(gòu),,尺寸約為100nm,其比較低臨界溶解溫度(LCST)在40-45℃,。Yamauchi等利用無皂乳液聚合法制備出平均粒徑達(dá)到515nm,、比飽和磁化強(qiáng)度達(dá)到7.3A·m2/kg的磁性高分子復(fù)合微球。
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熒光微球分析技術(shù)屬于化學(xué)材料發(fā)展結(jié)果,,可用于細(xì)胞表面抗原的檢測,、退行性神經(jīng)病變示蹤物,、吞噬功能的檢測、血流分析,、敏感性診斷試劑等,,本文介紹了熒光微球分析技術(shù)以及熒光微球吞噬實(shí)驗(yàn)的操作步驟。 熒光微球分析 技術(shù)簡介 熒光微球分析技術(shù)是近年來化學(xué)材料科學(xué)活躍發(fā)展 的產(chǎn)物,,各種大小(0.2~10μm)可產(chǎn)生熒光和色彩的人工微球應(yīng)運(yùn)而生,,目前各種材料人工合成、多種顏色和規(guī)格的熒光微球有2大類,,一種是表面不帶修飾基團(tuán)的微球,,另一種是攜帶各種化學(xué)修飾基團(tuán),包括羧基化修飾,、氨基修飾,、巰基或醛巰基修飾等的微球。 青島分離純化微球哪家強(qiáng)
反相乳液聚合是制備親水性磁性聚合物微球的一種方法,,其主要特點(diǎn)是將水溶性單體溶于水中,,然后在乳化劑的作用分散于非極性液體中,形成W/O分散相的聚合反應(yīng),。Hong[15]等首先制備了以葡聚糖為穩(wěn)定劑的水基磁流體,,苯乙稀為連續(xù)相,在Span-85和CTAB乳化劑作用下,,采用反相乳液聚合方法制備了粒徑為200nm,,高磁含量的復(fù)合微球。
Wang等提出了一種新的在雙乳液體系中的原位聚合技術(shù),,并用該法制備了PS-HEMA磁性高分子微球,。Wang等首先以溶有PS-HEMA共聚物的乙酸乙酯為油相,F(xiàn)eCl2/FeCl3溶液為內(nèi)部水相(W1),,PVA-217和Na2SO4為外部水相,制備了W1/O/W2雙乳液體系,。然后向上述體系添加氨水溶液,,堿溶液擴(kuò)散至內(nèi)部水相與鐵離子反應(yīng)形成磁核。與傳統(tǒng)原位法相比,,該法所得微球包埋率高(26.1%)和磁化強(qiáng)度大(12.2emu/g),。由于原位乳液聚合制備的聚合物納米粒子具有顆粒尺寸小、分布均勻,、分散穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),,逐漸引導(dǎo)著乳液聚合新的發(fā)展方向。
這些熒光微球正廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的多個(gè)領(lǐng)域中,,如: (1)細(xì)胞表面抗原的檢測,,包括CD4/CD8表面抗原的***計(jì)數(shù);細(xì)胞表面低豐度表達(dá)受體的分析;骨髓移植受體內(nèi)供體紅細(xì)胞的檢測;白色***抗原檢測等,。 (2)退行性神經(jīng)病變示蹤物,熒光微球具有***,、與神經(jīng)細(xì)胞結(jié)合時(shí)間長以及受注射部位影響極小的特點(diǎn),。 (3)吞噬功能的檢測,0.6~2.0μm大小的熒光微球適合于這一類的研究,,如分析大鼠中性粒細(xì)胞,、人橫紋導(dǎo)管細(xì)胞、小鼠腹膜巨噬細(xì)胞,、人多核白細(xì)胞的吞噬功能或不同調(diào)理素調(diào)理作用對吞噬功能的影響等,。 (4)血流分析,10-15 μm大小7種顏色的熒光可供研究組織中局部血流情況,,如**脈管血流速率,、視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜循環(huán)、肺泡微管的功能直徑定位等,。 (5)敏感性診斷試劑,,如替代一些已開展應(yīng)用的微球診斷試驗(yàn):膠乳凝集試驗(yàn)、微球捕獲ELASA,、雙位點(diǎn)夾心法等,,它較傳統(tǒng)比色方法更為靈敏;另有新近誕生的流式微球分析技術(shù)(Cytometric Bead Array CBA)通過將不同熒光強(qiáng)度的聚苯乙烯微球包被上多種高特異性的單克隆抗體,在微球“三明治”平臺(tái)上進(jìn)行可溶性蛋白的檢測,,由此而使得1份微量標(biāo)本可同時(shí)1次定量分析多種可溶性蛋白,,**節(jié)約了樣本量和操作時(shí)間,靈敏度也較傳統(tǒng)的ELISA
常用的純化方法冷凍結(jié)晶法 冷凍結(jié)晶法是在低溫的條件下,,依據(jù)混合脂肪酸各組分的凝固點(diǎn)差異進(jìn)行純化,,進(jìn)而達(dá)到純化多不飽和脂肪酸的目的。將混合脂肪酸溶解在**或乙醇中,,置于低溫下,,在溶液中短鏈脂肪酸較長鏈脂肪酸的溶解度低,飽和脂肪酸較不飽和脂肪酸的溶解度低,,這種溶解度差異隨溫度降低表現(xiàn)更為,。 冷凍結(jié)晶法工藝原理簡單,操作方便,,有效成分不易發(fā)生變性反應(yīng),。但其操作過程中溫度要求苛刻,需要回收大量的有機(jī)溶劑,,純化效率不高,,這限制了大規(guī)模的生產(chǎn),但可以用于生產(chǎn)低成本的保健品類,,從而滿足中低層消費(fèi)者的需求,。青島分離純化微球哪家強(qiáng)
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磁性高分子微球的制備
目前制備磁性高分子納米微球的方法主要分為五類,,其主要包括:包埋法、原位法,、單體聚合法,、界面沉積法及自組裝法。
2.1包埋法
包埋法是將聚合物溶解在含有磁性超微粒子的溶液中,,然后加入大量的沉淀劑,,通過交聯(lián)、絮凝,、霧化,、沉積、蒸發(fā)等手段使高分子物質(zhì)沉析在磁性粒子表面形成具有核殼結(jié)構(gòu)的復(fù)合微球,。高分子物質(zhì)與磁性粒子主要通過范德華力,、氫鍵、螯合作用或共價(jià)鍵等作用力結(jié)合,。Li等通過化學(xué)共沉淀法合成納米粒子Fe3O4磁核,,以殼聚糖為包裹材料包被自制的磁核,采用乳化交聯(lián)法制備了具有核-殼結(jié)構(gòu)的磁性高分子微球-殼聚糖磁性微球,,并偶聯(lián)肝素配基得到了一種新型親和磁性微球,。所得親和磁性微球具有較窄的粒徑分布、形狀規(guī)整,,粒徑在50nm左右,。將磁分離技術(shù)應(yīng)用于凝血酶的分離純化,得到了較好的效果(酶比活達(dá)1879.71U/mg,,得率85%,,純化倍數(shù)11.057,為傳統(tǒng)柱層析法的兩倍),。Chi?riuc等將含F(xiàn)e2+和Fe3+溶液逐滴加入殼聚糖的NaOH溶液中制的可用于負(fù)載頭孢霉素的磁性殼聚糖微球,。
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