分離純化多肽的常用方法-反相高效液相色譜 結(jié)果與保留值之間的關(guān)系:利用RP-HPLC 分離多肽首先得確定不同結(jié)構(gòu)的多肽在柱上的保留情況,。為了獲得一系列的保留系數(shù),,Wilce 等利用多線性回歸方法對(duì)2106 種肽的保留性質(zhì)與結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,,得出了不同氨基酸組成對(duì)保留系數(shù)影響的關(guān)系,,其中極性氨基酸殘基在2~20 氨基酸組成的肽中,可減少在柱上的保留時(shí)間,;在10~60 氨基酸組成的肽中,,非極性氨基酸較多也可減少在柱上的保留時(shí)間,而含5~25 個(gè)氨基酸的小肽中,,非極性氨基酸增加可延長(zhǎng)在柱上的保留時(shí)間,。 同時(shí)有不少文獻(xiàn)報(bào)道了肽鏈長(zhǎng)度、氨基酸組成,、溫度等條件對(duì)保留情況的影響,,并利用計(jì)算機(jī)處理分析得到每種多肽的分離提取的比較好條件。 肽圖分析(Peptide Mapping):肽圖分析是根據(jù)蛋白質(zhì),、多肽的分子量大小以及氨基酸組成特點(diǎn),,使用專一性較強(qiáng)的蛋白水解酶[ 一般未肽鏈內(nèi)切酶(endopeptidase)]作用于特殊的肽鏈位點(diǎn)將多肽裂解成小片斷,通過(guò)一定的分離檢測(cè)手段形成特征性指紋圖譜,,肽圖分析對(duì)多肽結(jié)構(gòu)研究合特性鑒別具有重要意義,。 上海直銷多肽分離填料
分離純化多肽的常用方法 分離方法 采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料,、所要提取物質(zhì)的性質(zhì)決定。對(duì)蛋白質(zhì),、多肽提取分離常用的方法包括:鹽析法,、超濾法、凝膠過(guò)濾法,、等電點(diǎn)沉淀法,、離子交換層析、親和層析,、吸附層析,、逆流分溶、酶解法等,。這些方法常常組合到一起對(duì)特定的物質(zhì)進(jìn)行分離純化,,同時(shí)上述這些方法也是蛋白、多肽類物質(zhì)分析中常用的手段,,如層析,、叫泳等,。 核磁共振,基質(zhì)輔助激光解析/ 離子化-飛行時(shí)間質(zhì)譜, 電霧離子化質(zhì)譜,連續(xù)流快原子轟擊質(zhì)譜,質(zhì)譜分析除上述方法之外,,氨基酸組成分析、氨基酸序列分析,、場(chǎng)解析質(zhì)譜,、IR、UV 光譜,、CD,、圓而色譜、生物鑒定法,、放射性同位素標(biāo)記法及免疫學(xué)方法等都已應(yīng)用于多肽類物質(zhì)的結(jié)果鑒定,、分析檢測(cè)之中。蘇州直銷多肽分離填料
多肽是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物,,是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物,。由兩個(gè)氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理類推還有三肽,、四肽,、五肽等。通常由10~100個(gè)氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,。 肽(peptide)是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物,,它也是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。 一般肽中含有的氨基酸的數(shù)目為二到九,根據(jù)肽中氨基酸的數(shù)量的不同,肽有多種不同的稱呼:由兩個(gè)氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,,同理類推還有三肽,、四肽、五肽等,一直到九肽,。通常由10~100個(gè)氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,,它們的分子量低于10,000Da(Dalton,道爾頓),,能透過(guò)半透膜,,不被三氯乙酸所沉淀。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽),;10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽,;由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),換言之,,蛋白質(zhì)有時(shí)也被稱為多肽,。多肽也簡(jiǎn)稱為肽,是20世紀(jì)被發(fā)現(xiàn)的,。
分離純化多肽的常用方法-分子排阻色譜 SEC 是利用多肽分子大小,、形狀差異來(lái)分離純化多肽物質(zhì),特別對(duì)一些較大的聚集態(tài)的分子更為方便,,如人重組生長(zhǎng)(hgH)的分離,,不同結(jié)構(gòu)、構(gòu)型的GH 在SEC 柱上分離行為完全不同,,從而可分離不同構(gòu)型或在氨基酸序列上有微小差異的變異體,,利用SEC 研究修飾化的PEG 的分離方法,此PEC 具有半衰期長(zhǎng),、作用強(qiáng)的特點(diǎn),。一些分子量較大的肽或蛋白均可利用此法分離分析。 分離純化多肽的常用方法--離子交換色譜 IEXC 可在中性條件下,,利用多肽的帶電性不同分離純化具有生物活性的多肽,。其可分為陽(yáng)離子柱與陰離子柱兩大類,還有一些新型樹脂,,如大孔型樹脂,、均孔型樹脂、離子交換纖維素,、葡聚糖凝膠,、瓊脂糖凝膠樹脂等。在多肽類物質(zhì)的分離分析研究中,,對(duì)多肽的性質(zhì),、洗脫劑、洗脫條件的研究較多,,不同的多肽分離條件有所不同,,特別是洗脫劑的離子強(qiáng)度,、鹽濃度等對(duì)純化影響較大。Wu 等報(bào)道利用離子交換柱層析法,,探討分離牛碳酸酐異構(gòu)體和牛血清白蛋白,、雞血清白蛋白酶的提取條件,獲得了有價(jià)值的數(shù)據(jù)供今后此類物質(zhì)分離研究,。
分離純化多肽的常用方法-高效液相色譜(HPLC) HPLC 的出現(xiàn)為肽類物質(zhì)的分離提供了有利的方法手段,,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)、多肽的HPLC 應(yīng)用與其它化合物相比,,在適宜的色譜條件下不僅可以在短時(shí)間內(nèi)完成分離目的,,更重要的是HPLC 能在制備規(guī)模上生產(chǎn)具有生物活性的多肽。因此在尋找多肽類物質(zhì)分離制備的比較好條件上,,不少學(xué)者做了大量的工作,。如何保持多肽活性、如何選擇固定相材料,、洗脫液種類,、如何分析測(cè)定都是目前研究的內(nèi)容。海博納新材料科技(蘇州)有限公司歡迎來(lái)電長(zhǎng)沙多肽分離填料哪家專業(yè)
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微球,,聚苯乙烯微球,,納米微球,熒光微球?qū)儆诩夹g(shù)密集型行業(yè),,行業(yè)附加值較高,,能夠體現(xiàn)一個(gè)地區(qū)綜合技術(shù)水平,。我國(guó)十分重視精細(xì)化工行業(yè)的發(fā)展,,目前精細(xì)化工行業(yè)已經(jīng)成為化工產(chǎn)業(yè)的重要發(fā)展方向之一,近年來(lái)我國(guó)精細(xì)化工行業(yè)已取得較大的發(fā)展,。新興的生產(chǎn)型市場(chǎng)對(duì)精細(xì)化工產(chǎn)品的需求為中國(guó)化工產(chǎn)品開辟新的國(guó)際市場(chǎng),,以異丙胺為例,作為中國(guó)大陸生產(chǎn)的低碳脂肪胺中進(jìn)出口貿(mào)易量較大的產(chǎn)品,,主要的出口目的地是東南亞地區(qū),、南美和大洋洲,如東南亞地區(qū)的馬來(lái)西亞,、印度,、印度尼西亞、泰國(guó)等,,南美的巴西和阿根廷等,,大洋洲的澳大利亞、新西蘭,,以及中國(guó)臺(tái)灣省,,這些地區(qū)對(duì)其進(jìn)口均沒有限制,。近年來(lái),世界主要大型農(nóng)藥,、醫(yī)藥生產(chǎn)企業(yè)為了節(jié)省加工研發(fā)支出,,提高效率,降低危險(xiǎn),,紛紛將產(chǎn)品戰(zhàn)略的重點(diǎn)集中于**終產(chǎn)品的研究和市場(chǎng)開拓,,而將涉及大量專有技術(shù)的中間體轉(zhuǎn)向?qū)ν獠少?gòu),充分利用外部的優(yōu)勢(shì)資源,,重新確認(rèn),、配置企業(yè)的內(nèi)部資源。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的進(jìn)一步發(fā)展,,人們對(duì)電子,、汽車、機(jī)械工業(yè),、建筑新材料,、新能源及新型環(huán)保材料的需求將進(jìn)一步上升,電子與信息化學(xué)品,、表面工程化學(xué)品,、醫(yī)藥化學(xué)品等將得到進(jìn)一步的發(fā)展,全球范圍內(nèi)精細(xì)化學(xué)品市場(chǎng)規(guī)模將保持高于傳統(tǒng)化工行業(yè)的速度飛速增長(zhǎng),。上海直銷多肽分離填料
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