培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng)：1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別,。因此,，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外．一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料．加以比較核對(duì)．再依據(jù)自己的使用目的加以選用,，記錄其來(lái)源,。2．培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)推各稱,，配方及其來(lái)源．和各種成份的牌號(hào),。好終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等,，記錄應(yīng)復(fù)制一份,，原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放,、以防發(fā)生混亂,。培養(yǎng)基制備器滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前，將鍋內(nèi)氣體排干凈,。中國(guó)香港瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

天然培養(yǎng)基中血清主要作用：對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞,，如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,，血清中含有抗蛋白酶成分,，起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,，則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被較廣用于貼壁細(xì)胞的消化傳代,。血清蛋白形成了血清的粘度,，可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),，粘度起到重要作用,。血清還含有一些微量元素和離子，他們?cè)诖x中起重要作用,，如SeO3,、硒等。廣東不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基成份的混合與溶化：培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的,。

配制培養(yǎng)基的原則：調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對(duì)培養(yǎng)基的Eh要求不同,。適宜好氧微生物生長(zhǎng)的Eh值一般為+0.3~+0.4V，厭氧微生物只能在+0.1V以下生長(zhǎng),，因此,，培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應(yīng),，可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。調(diào)節(jié)滲透壓多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化,。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)大,，會(huì)使?jié)B透壓過(guò)高，使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng),。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂,，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度,。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓,。原料來(lái)源的選擇力求節(jié)約：配制培養(yǎng)基還應(yīng)遵循力求節(jié)約的原則，盡量選用價(jià)格便宜,、來(lái)源方便的原料,。特別是在工業(yè)發(fā)酵中，培養(yǎng)基用量大,，更應(yīng)注意利用低成本的原料,，降低產(chǎn)品成本。

微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn)：對(duì)LST培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),，發(fā)酵管內(nèi)可能存在氣泡,。為了防止發(fā)酵管內(nèi)形成氣泡，可以采取以下措施：倒置的小管充滿培養(yǎng)基,，不留氣泡,，然后加入含有LST的試管中。在關(guān)閉殺菌鍋的排氣閥之前,，將鍋內(nèi)的氣體排空,。試管塞不要塞得太緊。使用硅膠塞時(shí),，請(qǐng)勿使用橡膠塞,。不可過(guò)早打開(kāi)殺菌鍋，等殺菌鍋內(nèi)的氣壓和溫度降到與室溫相同或相差不大時(shí)再打開(kāi)殺菌鍋,。如果按照以上方法操作還有氣泡,，可以用水作為培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn)。如果培養(yǎng)基組有氣泡,，對(duì)照組沒(méi)有氣泡,，可以確定培養(yǎng)基本身原因。在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí),，常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,。

培養(yǎng)基的脫氣：必要時(shí)，在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時(shí)松開(kāi)容器蓋子,；加熱后蓋緊蓋子,，并迅速冷卻至使用溫度,。3.添加成分的加入：對(duì)熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時(shí)加入,滅菌的添加成分加入前應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會(huì)造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養(yǎng)基的棄置：所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定,。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,，隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用,。培養(yǎng)基制備器內(nèi)部的管道和容器可以更換,，方便移除和清洗。海南全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器

制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài),。中國(guó)香港瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的質(zhì)量測(cè)試：每批培養(yǎng)基制備好以后,，應(yīng)仔細(xì)檢查一遍，如發(fā)現(xiàn)破裂,、水分浸入,、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等,、均應(yīng)挑出棄去,。并測(cè)定其較終pH.將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過(guò)夜，如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng),，即棄去,。用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1~2管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng)24~48小時(shí),，如無(wú)菌生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不好,。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次，如結(jié)果仍同前,，則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去,，不能使用。培養(yǎng)基的保存：培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處,，較好能放于普通冰箱內(nèi),。放置時(shí)間不宜超過(guò)一周，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過(guò)3天,。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽。中國(guó)香港瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器