簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基，需要完成以下幾個(gè)主要步驟：需要選擇培養(yǎng)基配方，同一種培養(yǎng)基,，其表達(dá)方式往往存在著差異,。所以，除了應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)方法的規(guī)定編制之外,，我們一般應(yīng)盡可能收集有關(guān)數(shù)據(jù),，加以比較和核對(duì)，然后根據(jù)自己的目的選擇和記錄數(shù)據(jù)來源,。需記錄培養(yǎng)基的制備,，培養(yǎng)基的制備記錄包括培養(yǎng)基的名稱、配方及其來源,、pH值,、滅菌溫度、時(shí)間,、配制日期,、制備人等,，并且要復(fù)印記錄和保存原始記錄備查,。對(duì)副本的記錄應(yīng)該和培養(yǎng)基一起保存，以防出現(xiàn)混亂,。需稱重培養(yǎng)基的成分,，培養(yǎng)基成分要準(zhǔn)確稱量，并注意防止混淆,。每一種成分稱量完畢后,，都要在分裝的一面打上記號(hào)，然后將分裝的藥物一起放在左邊,。每一個(gè)成分稱量完之后,，都會(huì)向右移動(dòng)。全部稱量完畢,，應(yīng)再次檢查,。培養(yǎng)基制備器負(fù)載的壓力，有效地避免了培養(yǎng)基過溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生,。上海大容量 培養(yǎng)基制備器

⑴倒置的小管充滿培養(yǎng)基,，不留氣泡。⑵在關(guān)閉殺菌鍋的排氣閥之前,，將鍋內(nèi)的氣體排空,。⑶試管塞不要塞得太緊。使用硅膠塞時(shí),，請(qǐng)勿使用橡膠塞,。⑷不可過早打開殺菌鍋，等殺菌鍋內(nèi)的氣壓和溫度降到與室溫相同或相差不大時(shí)再打開殺菌鍋。如果按照以上方法操作還有氣泡,，可以用水作為培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn),。如果培養(yǎng)基組有氣泡，對(duì)照組沒有氣泡,，可以確定培養(yǎng)基本身原因,。為有效體現(xiàn)培養(yǎng)基其生物學(xué)特性，其制備生長及繁殖需要特定的PH范圍,。海南全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器理想設(shè)備應(yīng)在20~30分鐘內(nèi)將培養(yǎng)基從121°C冷卻至50°C以下（視體積而定）,。

制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：a.液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的，其中的成分基本上溶于水,，沒有明顯的固形物,，液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻，易于控制微生物的生長代謝狀態(tài),。b.固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基,。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠,、硅膠等,，以瓊脂為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分普遍,。在實(shí)驗(yàn)室中,，它被用作微生物的分離、鑒定,、檢驗(yàn)雜菌,、計(jì)數(shù)、保藏,、生物測(cè)定等,。c.半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中，就制成了半固體培養(yǎng)基,。以瓊脂為例,，它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來觀察微生物的動(dòng)力,，有時(shí)用來保藏菌種,。

牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基(又稱營養(yǎng)肉湯,用于培養(yǎng)細(xì)菌)：成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g,、NaCl5g,蒸餾水(或去離子水)1000mL,pH7.4士0.2,。制法:將各成分溶解于水中，于20~25℃條件下以1mol/LNaOH溶液用pH計(jì)校正pH7.4,分裝三角瓶(裝量以三角瓶容積的1/2~2/3為宜),，或試管(分裝量以試管高度的1/4左右為宜),0.1MPa滅菌15~20min后備用,。化學(xué)分類：天然培養(yǎng)基指一類利用動(dòng)、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基,。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,、麥芽汁培養(yǎng)基等。組合培養(yǎng)基又稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基,，是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基,。如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基、淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基等,。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,，同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,。培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔，無孔隙和裂縫,，以防培養(yǎng)基流進(jìn)去,。

制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：（1）方法步驟：計(jì)算、稱量,、溶化,、滅菌、倒平板,。（2）倒平板操作的步驟：①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,，左手拔出棉塞,。②右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰,。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,。④等待平板冷卻凝固,，大約需5～10min。然后,，將平板倒過來放置,，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上,。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板,。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度,？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了,。在選購培養(yǎng)基制備器時(shí),，快速加熱和冷卻能力是重要考量因素，直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量,、實(shí)驗(yàn)效率及操作便利性,。海南全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備器必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標(biāo)簽.上海大容量 培養(yǎng)基制備器

濕熱滅菌：濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行，高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,，具體培養(yǎng)基按食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定進(jìn)行滅菌,。培養(yǎng)基體積不應(yīng)超過1000mL，否則滅菌時(shí)可能會(huì)造成過度加熱,。所有的操作應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)或使用說明的規(guī)定進(jìn)行,。滅菌效果的控制是關(guān)鍵問題。加熱后采用適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,，以防加熱過度,。這對(duì)于大容量和敏感培養(yǎng)基十分重要，例如含有煌綠的培養(yǎng)基,。過濾除菌：過濾除菌可在真空或加壓的條件下進(jìn)行,。使用孔徑為0.2μm的無菌設(shè)備和濾膜。消毒過濾設(shè)備的各個(gè)部分或使用預(yù)先消毒的設(shè)備,。一些濾膜上附著有蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)（如物品）,，為了達(dá)到有效過濾，應(yīng)事先將濾膜用無菌水潤濕,。上海大容量 培養(yǎng)基制備器