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利用斑馬魚模型評價保護心肌作用。心肌損傷多數(shù)是由于炎癥、缺血、冠狀動脈狹窄等因素引發(fā)的心肌損傷,常表現(xiàn)為胸悶,、胸痛、氣短,、四肢乏力,、心慌、惡心嘔吐等癥狀,。斑馬魚心臟包含心房,、心室和靜脈竇,心電圖譜也與哺乳動物類似,。而且斑馬魚生長發(fā)育周期短,,胚胎透明易觀察,心臟在受精后48小時就發(fā)育完全,,有利于開展心肌損傷保護劑的研究,。鹽酸異丙腎上腺素可以誘導斑馬魚心率加快,心肌持續(xù)收縮,,心肌耗氧量持續(xù)增加,,心臟由代償性收縮轉(zhuǎn)化為失代償,終將導致心肌損傷,,使心肌細胞凋亡,。經(jīng)過特異性熒光染色(凋亡細胞呈綠色),心肌損傷的斑馬魚在心臟部位會布滿凋亡細胞,,可以明顯被觀察到,。斑馬魚評價炎癥反應作用。藥物的量效關(guān)系實驗費用
斑馬魚的基因與人類基因的相似度達到87%,,斑馬魚肝臟中有許多與哺乳動物同源的脂質(zhì)代謝酶,,與哺乳動物對外源化學物質(zhì)的防御機制相當,包括酶的誘導和氧化應激,。而且斑馬魚幼魚通體透明,,容易觀察到毒性表型。酒精性肝損傷是全世界發(fā)病率和死亡率的主要原因,,酒精性肝損傷是過量飲酒的結(jié)果,。當患者繼續(xù)飲酒時,,會誘發(fā)嚴重的肝損傷形式,,如脂肪性肝炎,纖維化,,肝硬化和肝細胞,。用乙醇可以誘發(fā)斑馬魚肝臟損傷,,模擬人的肝臟疾病。我們評價斑馬魚肝臟毒性有4個指標:1.肝臟面積,;2.肝臟變性程度,;3.卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率(卵黃囊是脂肪,卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān)),;4.肝臟病理切片,。國內(nèi)做藥品安全性評價的公司有利用斑馬魚模型評價抗PM2.5功效。
利用斑馬魚模型評價神經(jīng)保護作用【評價原理】神經(jīng)損傷常表現(xiàn)為偏癱,、失語,、智力障礙或昏迷,甚至死亡,。斑馬魚是一種與人類同源性較高的脊椎動物,,大腦具有典型脊椎動物腦部形態(tài)學特征,髓鞘結(jié)構(gòu)特征和少突膠質(zhì)細胞分化過程與哺乳動物高度一致,。而且斑馬魚生長發(fā)育周期短,,神經(jīng)系統(tǒng)簡單,有利于開展神經(jīng)保護劑的研究,。霉酚酸嗎啉乙酯可以抑制斑馬魚神經(jīng)元軸突的生長,,干擾神經(jīng)及細胞的遷移和導致發(fā)育畸形,使神經(jīng)元細胞凋亡,。經(jīng)過特異性熒光染色(凋亡細胞呈綠色),,神經(jīng)損傷的斑馬魚在腦和脊髓部位會布滿凋亡細胞,比正常斑馬魚多很多,,可以明顯被觀察到,。
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組,、模型對照組和服用免疫調(diào)節(jié)劑組,。其中正常對照組未注射長春瑞濱,模型對照組與服用免疫調(diào)節(jié)劑組都注射了等量的長春瑞濱(長春瑞濱通過靜脈注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)),。服用免疫調(diào)節(jié)劑組在注射長春瑞濱后攝入異丙肌苷等免疫調(diào)節(jié)劑,。服用一段時間免疫調(diào)節(jié)劑后,我們觀察斑馬魚T細胞熒光強度變化,??梢钥吹剑庖哒{(diào)節(jié)劑組T細胞熒光強度與未注射長春瑞濱的正常對照組比較相似,,沒有出現(xiàn)明顯的T細胞減少情況,。利用斑馬魚模型評價酒精性肝損傷保護作用。
我們將受測試斑馬魚分成兩組,,分別是正常對照組和服用生長發(fā)育促進劑組(維生素D3,、碳酸鈣之類的生長發(fā)育促進劑通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)),。服用一段時間生長發(fā)育促進劑后,我們對斑馬魚做骨骼特異性熒光染色,,觀察斑馬魚脊椎骨的發(fā)育情況,。可以看到,,服用生長發(fā)育促進劑的脊椎骨數(shù)量明顯比正常對照組增多,。 1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用生長發(fā)育促進劑的斑馬魚脊椎骨數(shù)量比正常對照組增多,。2.本實驗證實了維生素D3,、碳酸鈣具有明顯促進生長發(fā)育功效。斑馬魚模型評價基因毒***效學評價方法
利用斑馬魚模型評價降尿酸功效,。藥物的量效關(guān)系實驗費用
利用斑馬魚模型評價生殖毒性,。斑馬魚成魚體長5cm左右,其胚胎透明,,在受精72h后完成孵化,,并在孵出后3個月內(nèi)性成熟。成年斑馬魚的繁殖周期短(一般7d左右),,若條件適宜,,成年雌性斑馬魚可定期產(chǎn)卵(每次200~300個)。在斑馬魚的早期胚胎及幼體的發(fā)育過程中,,尚無性別分化,,原始性腺都是相同的且具有雙向發(fā)育的潛能,易受環(huán)境(溫度,、光照,、pH值等)因素的影響而改變其遺傳性別。對于雌性斑馬魚而言,,產(chǎn)卵量是評價其繁殖力的常用生物指標,,它與魚類繁殖過程中的多個環(huán)節(jié)(卵子發(fā)育、雌雄交配行為等)相關(guān),,并對環(huán)境化學物質(zhì)具有高敏感性,,能直接反應魚類繁殖力變化。環(huán)境化學物質(zhì)除了直接對親代斑馬魚的生殖系統(tǒng)造成損害,,還可能對其子代的正常生長發(fā)育藥物的量效關(guān)系實驗費用
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