由于硬骨魚和人類在骨骼發(fā)育過程中的基因,、信號通路有高度同源性,而且與其他的動(dòng)物模型相比,,斑馬魚具有個(gè)體小適合高通量化學(xué)篩選,、幼魚身體透明易于觀察骨骼發(fā)育的特點(diǎn),所以近年來以斑馬魚為模型的骨骼研究逐漸成為這一領(lǐng)域的熱點(diǎn)。斑馬魚從前向后的脊椎發(fā)育過程是非連續(xù)的,,而是分成兩個(gè)不同的區(qū)域:前域(包括第3塊椎骨)和后域(包括第4-31塊椎骨),。將斑馬魚脊椎骨鈣化過程分成兩個(gè)不同區(qū)域是基于第2和第3椎骨的出現(xiàn)晚于第4椎骨。我們利用斑馬魚骨骼發(fā)育的規(guī)律,,攝入生長發(fā)育促進(jìn)劑的斑馬魚脊椎骨發(fā)育會(huì)加快,。脊椎骨染色應(yīng)用與鈣特異性結(jié)合的熒光染料(呈綠色),經(jīng)熒光顯微鏡觀察脊椎骨的數(shù)量,。斑馬魚模型評價(jià)基因毒性,。重慶市藥物安全評價(jià)公司
隨著電子產(chǎn)品的大量使用,用眼的時(shí)間和強(qiáng)度已遠(yuǎn)超過去,,用眼過度引起一系列視力問題,。研究表明,高度近視,、視網(wǎng)膜疾病,、白內(nèi)障、眼干燥關(guān)節(jié)綜合征均與眼細(xì)胞凋亡相關(guān),。斑馬魚的眼部血管結(jié)構(gòu)跟人非常相似,,斑馬魚視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)也跟人高度相似。用霉酚酸嗎啉乙酯可以誘發(fā)斑馬魚眼細(xì)胞凋亡,,模擬人的眼部疾病,。用特異性熒光染色(呈綠色),患有眼疾的斑馬魚眼細(xì)胞凋亡較正常斑馬魚明顯增多,,在熒光顯微鏡下可以觀察到,。我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組,、模型對照組和藥物組,。其中正常對照組未攝入霉酚酸嗎啉乙酯,模型對照組與服用眼保護(hù)劑組都攝入了等量的霉酚酸嗎啉乙酯(霉酚酸嗎啉乙酯通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)),。眼保護(hù)劑組在攝入霉酚酸嗎啉乙酯的同時(shí)攝入藍(lán)莓葉黃素酯之類的眼保護(hù)劑,。服用一段時(shí)間眼保護(hù)劑后,我們對斑馬魚整體做凋亡細(xì)胞特異性染色,,觀察細(xì)胞凋亡,,同時(shí)制作成病理切片觀察眼部的病理結(jié)構(gòu)變化。藥品功效檢驗(yàn)斑馬魚實(shí)驗(yàn)?zāi)P?藥物,、化妝品功效評價(jià),。
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組,、模型對照組和服用免疫調(diào)節(jié)劑組,。其中正常對照組未注射長春瑞濱,,模型對照組與服用免疫調(diào)節(jié)劑組都注射了等量的長春瑞濱(長春瑞濱通過靜脈注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用免疫調(diào)節(jié)劑組在注射長春瑞濱后攝入異丙肌苷等免疫調(diào)節(jié)劑,。服用一段時(shí)間免疫調(diào)節(jié)劑后,,我們觀察斑馬魚T細(xì)胞熒光強(qiáng)度變化??梢钥吹?,免疫調(diào)節(jié)劑組T細(xì)胞熒光強(qiáng)度與未注射長春瑞濱的正常對照組比較相似,沒有出現(xiàn)明顯的T細(xì)胞減少情況,。
腸道消化是食物在消化道中分解的過程,,包括機(jī)械性消化(通過消化道肌肉搜索將食物與消化液混合并向消化道遠(yuǎn)端推送)和化學(xué)性消化(通過消化腺分泌的消化酶將大分子分解為小分子物質(zhì)的過程)。腸道內(nèi)的消化液包括胰脂肪酶,、胰蛋白酶,、胰淀粉酶等。在受精后的26-126h,,斑馬魚腸道的管腔形成,,內(nèi)胚層分化出連續(xù)的有功能的腸道上皮。斑馬魚腸道肌肉發(fā)達(dá),,可分為兩層平滑肌,,有利于食物的蠕動(dòng)消化。通過特異性的檢測試劑盒檢測OD值,,可以量化斑馬魚體內(nèi)胰脂肪酶和胰蛋白酶含量,。藥物臨床前研究實(shí)驗(yàn),。
斑馬魚消化道的解剖結(jié)構(gòu)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)與人類消化道相似,,具有同心圓層的內(nèi)上皮、結(jié)締組織,、環(huán)狀肌肉和外縱肌層,。三硝基苯磺酸(TNBS)的乙醇溶液造模法屬于正常免疫系統(tǒng)下的半抗原誘導(dǎo)性模型,當(dāng)TNBS的乙醇溶液灌腸時(shí),,乙醇作為有機(jī)溶劑溶解腸粘膜表面的黏液,,暫時(shí)性破壞腸粘膜屏障,使TNBS和腸組織蛋白結(jié)合形成完全抗原,,導(dǎo)致腸黏膜免疫系統(tǒng)針對該抗原的遲發(fā)性變化反應(yīng),,并造成腸黏膜的損傷。杯狀細(xì)胞是黏蛋白的主要來源,,其數(shù)量和形態(tài)反應(yīng)腸粘膜的健康狀況,,是腸粘膜異常的敏感指標(biāo)。由于斑馬魚通體透明的特點(diǎn),,有兩種方法檢測結(jié)腸炎的防治作用,。1.觀察腸腔面積的變化,,2.通過特異性染料(呈藍(lán)色)對腸道的杯狀細(xì)胞染色,通過觀察杯狀細(xì)胞數(shù)量來判斷腸粘膜的損傷情況,。評價(jià)疏肝解酒酒精性脂肪肝防治功效,。體外實(shí)驗(yàn)對其藥效進(jìn)行評價(jià)
斑馬魚模型評價(jià)胃腸道毒性。重慶市藥物安全評價(jià)公司
蛋黃粉中60%為脂類,,用蛋黃粉喂食斑馬魚,,可以使斑馬魚血液中的脂肪含量快速升高,從而建立斑馬魚血脂高癥模型,。經(jīng)過油紅O特異性脂肪染色(與組織內(nèi)甘油三酯等脂肪滴結(jié)合呈橘紅色),,血脂高斑馬魚血管內(nèi)肉眼可見明顯的脂質(zhì)聚積,通過靜脈注射,,可見熒光標(biāo)記膽固醇的積累,。我們評價(jià)斑馬魚降低血脂功效有4個(gè)指標(biāo):1.斑馬魚血脂表型圖;2.斑馬魚總甘油三脂含量,;3.斑馬魚膽固醇表型圖,;4.斑馬魚總膽固醇含量。1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn),,服用降脂產(chǎn)品組的血脂聚積情況與模型對照組比較明顯減少,。2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了阿托伐他汀鈣、辛伐他汀,、洛伐他汀類降脂產(chǎn)品具有明顯的降脂降膽固醇作用,。重慶市藥物安全評價(jià)公司