研究人員發(fā)現(xiàn),,離體培養(yǎng)48小時的全層皮膚可保持屏障特性,且能對不同強(qiáng)度的屏障破壞做出反應(yīng),,使用膠帶剝離或4小時十二烷基硫酸鈉(SLS)處理通過破壞皮膚結(jié)構(gòu),、促進(jìn)炎癥因子IL-6、IL-8的表達(dá)破壞皮膚屏障5],。使用1:1(v:v)乙mi:bing酮混合物對離體皮膚進(jìn)行損傷造模,,PPAR-α激動劑RFV3可通過增加神經(jīng)酰胺、絲聚蛋白和轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶1的表達(dá)來促進(jìn)離體皮膚的屏障修護(hù)過程[”,。離體皮膚模型還被用來評估清潔產(chǎn)品的功效,,ZHOU等人通過對沐浴露A和沐浴露B處理的離體皮膚進(jìn)行免疫熒光染色發(fā)現(xiàn),與水對照和沐浴露A處理相比,,經(jīng)沐浴露B處理的離體皮膚在處理7天后,,顆粒層和角質(zhì)層中絲聚蛋白的表達(dá)明顯減少,證明沐浴露B對皮膚屏障具有破壞作用,,此外,,使用MTT檢測離體皮膚的組織活力也是用來評價皮膚屏障修護(hù)功效的重要指標(biāo)。美白化妝品人體功效測試方法的優(yōu)勢在于其可量化的評估指標(biāo),。防曬護(hù)膚品功效評價
斑馬魚尾部脫水皺縮模型是評估化妝品保濕性能的關(guān)鍵工具,。其皮膚真皮層含水通道蛋白AQP3,與人類透明質(zhì)酸合成酶HAS3協(xié)同調(diào)控水分平衡,。實驗中,,將斑馬魚胚胎置于高滲氯化鈉溶液中,尾部因脫水發(fā)生皺縮,,通過顯微鏡測量尾部面積變化并檢測aqp3,、has3基因表達(dá)量。例如,,某糙米發(fā)酵濾液可使斑馬魚尾部面積縮小抑制率達(dá)65%,,同時aqp3基因表達(dá)量提升2.3倍,證實其強(qiáng)的效保濕能力,。該模型已被江蘇省特殊化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心等機(jī)構(gòu)納入標(biāo)準(zhǔn)檢測流程,,成為保濕功效宣稱的重要依據(jù)。化妝品功效檢測價格通過觀察斑馬魚的皮膚顏色變化,,可以評估產(chǎn)品的美白效果和安全性,。
環(huán)特人體功效實驗室的人體美白功效測試方案采用“儀器測量+主觀評估”相結(jié)合的多方位測試體系。SolarLight601日光模擬儀通過每日一次,、連續(xù)4天的照射,,模擬紫外線對皮膚的損傷,為產(chǎn)品提供真實的功效驗證場景,;MexameterMX18黑色素測試探頭與ColorimeterCL400膚色測試儀,,則在D0、D7,、D14,、D21、D28五個關(guān)鍵時間點(diǎn),,精細(xì)量化皮膚黑色素含量與ITA值的變化,。同時,引入視覺評估與臨床評估,,由專業(yè)人員使用色卡對膚色進(jìn)行分級,,并觀察灼熱、刺痛等皮膚不良反應(yīng),。這種多維度的數(shù)據(jù)采集方式,,既捕捉了皮膚微觀層面的生理變化,又兼顧了使用者的主觀感受,,使美白功效評價更加多方面,、立體,為化妝品研發(fā)與改進(jìn)提供深度洞察,。
盡管用于化妝品評價的創(chuàng)新模型和技術(shù)在不斷發(fā)展,,但無論是斑馬魚模型、體外細(xì)胞模型還是皮膚器官芯片等均不能完全模擬體內(nèi)皮膚的真實結(jié)構(gòu)與功能,,這使得離體皮膚評價模型逐漸進(jìn)入人們的視野,。離體皮膚也被稱為皮膚外植體,它是由人體來源的皮膚組織經(jīng)體外培養(yǎng)而獲得的模型[26],。離體皮膚通過適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)方式,,可在體外維持一定的組織活力,目前,,已被廣泛應(yīng)用于化妝品功效測評,、傷口愈合、皮膚相關(guān)疾病的研究中,。離體皮膚是接近健康和患病皮膚生理機(jī)能的模型,,包含完整的皮膚細(xì)胞類群如角質(zhì)形成細(xì)胞,、成纖維細(xì)胞,、黑素細(xì)胞,、朗格漢斯細(xì)胞;含有膠原蛋白、彈性蛋白,、糖胺聚糖等細(xì)胞外基質(zhì);包含皮膚附屬物如汗腺等叨,。本文將在下面章節(jié)重點(diǎn)概述離體皮膚模型及其在化妝品功效評價中的應(yīng)用。根據(jù)化妝品實驗的目的,,將斑馬魚胚胎分為實驗組和對照組,。
皮膚外用產(chǎn)品的制造、運(yùn)輸和銷售需要事先進(jìn)行安全性評估,,并評估可能因預(yù)期用途,、誤用、或意外皮膚暴露而導(dǎo)致的皮膚反應(yīng),。離體皮膚的另一重要應(yīng)用是評估皮膚外用產(chǎn)品的安全性和功效性,,這包括日用品、化妝品,、藥品,、醫(yī)療器械等。BURGHER等人使用腹部整形手術(shù)獲取的人體皮膚外植體研究了氫氟酸的腐蝕性,,他們發(fā)現(xiàn)70%的氯氟酸在作用的5分鐘內(nèi)即可完全穿透皮膚,,這與之前研究的意外氫氟酸暴露的臨床結(jié)果是一致的均。研究人員在OECDTG439標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)之上,,開發(fā)了使用離體皮膚模型評估化合物是否具有潛在刺激性的方法,。通過對120種化妝品刺激離體皮膚的實驗結(jié)果與人體斑貼實驗結(jié)果進(jìn)行對比,發(fā)現(xiàn)離體皮膚模型檢測的特異性為89.9%,,準(zhǔn)確率為89.1%[46],。此外,科研人員還使用彗星實驗對手術(shù)獲得的離體皮膚進(jìn)行了化合物遺傳毒性的評估,,通過將離體皮膚局部暴露于20中化學(xué)物質(zhì)中,,他們發(fā)現(xiàn)其遺傳毒性檢測的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性分別為89%,、90%和89%切,。這些結(jié)果均表明離體皮膚是外用產(chǎn)品刺激性、腐蝕性,、遺傳毒性等評價的可靠模型,具有廣泛的應(yīng)用前景,。斑馬魚的胚胎發(fā)育過程透明,,可以清晰觀察到各種細(xì)胞和組織的變化,,這對于研究美白化妝品的效果非常有幫助?;瘖y品功效檢測價格
隨著人工智能技術(shù)的發(fā)展,,可以利用大數(shù)據(jù)分析和機(jī)器學(xué)習(xí)算法,對美白化妝品的功效進(jìn)行預(yù)測和優(yōu)化,。防曬護(hù)膚品功效評價
糖化反應(yīng),,又稱美拉德反應(yīng),其晚期糖基化產(chǎn)物也被稱為AGEs,,AGEs隨著年齡不斷累積,,一方面會通過改變真皮ECM的功能使細(xì)胞形態(tài)改變,另一方面會通過ji活下游信號通路,,影響細(xì)胞,、組織功能,促進(jìn)皮膚衰老,。具有抗糖基化活性的天然化合物可能具有較大的抗老潛力,。糖基化誘導(dǎo)劑甲基乙二醛(MGO)可誘導(dǎo)糖基化產(chǎn)物的產(chǎn)生,在MGO造模的情況下,,SHIN等人利用離體皮膚研究了沒食子酸甲酯的抗糖化作用,,沒食子酸甲酯通過降低羧甲基賴氨酸(CML)的表達(dá)、刺激纖維蛋白I的表達(dá)來發(fā)揮其抗糖化作用[57,。另一項在離體皮膚中的研究表明,,氨基胍、葛根素,、綠原酸可促進(jìn)纖維蛋白1的產(chǎn)生和抑制CML的產(chǎn)生,,這表明這些活性成分具備抗氧化和抗糖化的功效[58]。此外,,與MGO處理相比,,水飛薊花提取物水飛薊賓涂抹8天,可明顯降低皮膚外植體中CML的表達(dá),。防曬護(hù)膚品功效評價