對于兩個遠(yuǎn)距離(相距1-2mm以上)的成像部位,，通常采用兩個**的路徑進(jìn)行成像,；對于相鄰區(qū)域,，通常使用單個物鏡的多個光束進(jìn)行成像,。多光束掃描技術(shù)必須特別注意激發(fā)光束之間的串?dāng)_,，這可以通過事后光源分離或時空復(fù)用來解決,。事后光源分離法是指分離光束以消除串?dāng)_的算法,；時空復(fù)用法是指同時使用多個激發(fā)光束,，每個光束的脈沖在時間上被延遲,，使不同光束激發(fā)的單個熒光信號可以暫時分離,。引入的光束越多，可以成像的神經(jīng)元越多,，但多束會導(dǎo)致熒光衰減時間重疊增加,，從而限制了分辨信號源的能力；并且復(fù)用對電子設(shè)備的工作速度要求很高,；大量的光束也需要較高的激光功率來維持單束的信噪比,，這樣容易導(dǎo)致組織損傷,。從產(chǎn)品類型及技術(shù)方面來看，正置顯微鏡占據(jù)絕大多數(shù)市場,。美國飛秒激光多光子顯微鏡方案

多光子激光掃描顯微鏡的產(chǎn)業(yè)發(fā)展,，世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要分布在德國和日本，德國以徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司為基礎(chǔ),，日本以尼康和奧林巴斯為基礎(chǔ),。2020年以來，這些企業(yè)占據(jù)了全球多光子激光掃描顯微鏡市場的64.44%,，它們的發(fā)展策略影響著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向,。目前，世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求正在增長,，中國市場的需求增長更快,。未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將仍有巨大的發(fā)展?jié)摿Α?a href="http://18740.cn/zdcbsx/kzk7cqlirz/23180335.html" target="_blank">美國熒光多光子顯微鏡價格多少多光子顯微鏡之類的先進(jìn)光學(xué)技術(shù)能夠在活生物體的大腦表面下更深地成像。

2020年,，JianglaiWu等人提出提高2PM橫向掃描速率的裝置,，稱為FACED（free-spaceangular-chirp-enhanceddelay）。圓柱透鏡將激光束一維聚焦,，會聚角為Δθ,。光束進(jìn)入到一對幾乎平行的高反射鏡中，其間距為S,，偏角為α,。經(jīng)過反射鏡多次反射后，激光脈沖被分成多個傳播方向不同的子脈沖（N=Δθ/α）,，脈沖間以2S/c的時間延遲（c,，光速）回射。FACED模塊輸出處的子脈沖序列可以看作從虛擬光源陣列發(fā)出的光,，這些子脈沖在中繼到顯微鏡物鏡后形成了一個空間上分離且時間延遲的焦點(diǎn)陣列,。然后將該模塊并入具有高速數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)雙光子熒光顯微鏡中。光源是具有1MHz重復(fù)頻率的920nm的激光器,，通過FACED模塊可產(chǎn)生80個脈沖焦點(diǎn),，其脈沖時間間隔為2ns。這些焦點(diǎn)是虛擬源的圖像,，虛擬源越遠(yuǎn),，物鏡處的光束尺寸越大，焦點(diǎn)越小,。光束沿y軸比x軸能更好地充滿物鏡,，從而導(dǎo)致x軸的橫向分辨率為0.82μm，y軸的橫向分辨率為0.35μm。

現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展和科技的進(jìn)步,，特別是隨著后基因組時代的到來,，人們已經(jīng)能夠根據(jù)需要建立各種細(xì)胞模型，為在體研究基因表達(dá)規(guī)律,、分子間的相互作用,、細(xì)胞的增殖、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、誘導(dǎo)分化,、細(xì)胞凋亡以及新的血管生成等提供了良好的生物學(xué)條件。然而,，盡管人們利用現(xiàn)有的分子生物學(xué)方法,，已經(jīng)對基因表達(dá)和蛋白質(zhì)之間的相互作用進(jìn)行了深入、細(xì)致的研究,，但仍然不能實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)和基因活動的實(shí)時,、動態(tài)監(jiān)測。在細(xì)胞的生理過程中,，基因,、尤其是蛋白質(zhì)的表達(dá)、修飾和相萬作用往往發(fā)生可逆的,、動態(tài)的變化,。目前的分子生物學(xué)方法還不能捕獲到蛋白質(zhì)和基因的這些變化,，但獲取這些信息對與研究基因的表達(dá)和蛋白質(zhì)之間的相互作用又至關(guān)重要,。因此,，發(fā)展能用于、動態(tài),、實(shí)時,、連續(xù)監(jiān)測蛋白質(zhì)和基因活動的方法是非常有必要的。多光子顯微鏡作為一種研究微觀結(jié)構(gòu)和功能的技術(shù),，在眾多領(lǐng)域得到了普遍的應(yīng)用,。

多光子激發(fā)掃描顯微成像系統(tǒng)的不足。只能對熒光成像,。如果樣品包括能夠吸收激發(fā)光的色團(tuán),，如色素，樣品可能受到熱損傷,。分辨率略有降低,，雖然可以通過同時利用共焦的小孔得到改善，但是信號會有損耗,。受昂貴的超快激光器限制，多光子掃描顯微鏡的成本較高。多光子激發(fā)顯微鏡應(yīng)用舉例,。動物和腦片神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能,、動物腦皮層的成像、胚胎發(fā)育過程的長時間動態(tài)觀測,、多光子激發(fā)光解籠,、細(xì)胞內(nèi)微區(qū)鈣動力學(xué)、多光子激發(fā)自發(fā)熒光,、其它應(yīng)用,。帶寬足以覆蓋鈦藍(lán)寶石激光器的可調(diào)諧范圍和用于多光子顯微鏡的許多其它激光器的典型中心頻率。美國高速高分辨率多光子顯微鏡價格

多光子顯微鏡技術(shù)是對完整組織進(jìn)行深層熒光成像的優(yōu)先技術(shù),。美國飛秒激光多光子顯微鏡方案

多光子激發(fā)在紫外成像的優(yōu)勢在可見光脈沖中能得到紫外衍射的顯微觀察像,。即使不使用紫外域光源、光學(xué)元件用可見光源,、光學(xué)元件就能得到紫外光激勵的高空間分辨率圖像,。多光子在生物成像中的優(yōu)勢在生物顯微鏡觀察方面，較早考慮的是不損壞生物本身的活性狀態(tài),，維持水分,、離子濃度、氧和養(yǎng)分的流通,。在光觀察場合,，無論是熱還是光子能量方面都必須停留在細(xì)胞不受損傷的照射量、光能量內(nèi),。多光子顯微鏡則能夠滿足此,，而且還具有很多優(yōu)點(diǎn)。如三維分辨率,、深度侵入,、在散射效率、背景光,、信噪比,、控制等方面，均有以往激光顯微鏡不具備,，或具有無法比擬的超越特性,。美國飛秒激光多光子顯微鏡方案