解決鈣成像裝置對核磁成像的干擾：考慮到金屬對核磁成像的影響，研究人員在核磁共振成像的模塊上裝上了鈣成像模塊,，該成像模塊所有的金屬元件全部被更換為非導電塑料,。考慮到磁場對光纖記錄系統(tǒng)的干擾,，減少鈣信號的噪音,，將相干光纖激光器與核磁共振放置相鄰不同的房間。解決鈣成像和核磁成像區(qū)域的一致性：在成像過程中,，以皮層區(qū)域的血管分布為參照物,，以保證鈣成像和核磁成像的區(qū)域基本保持一致。但在實際成像中,，鈣離子變化和血氧水平依賴性信號所響應的區(qū)域并不是完全重合,。因此研究人員將響應區(qū)域內(nèi)的信號變化幅度進行均一化，盡量避免因統(tǒng)計閾值引起差異,。傳統(tǒng)的鈣成像技術受限于顯微鏡的視野,，只能對很小的一片區(qū)域進行記錄。inscopix鈣成像nVista

大家都知道,，只有游離鈣才具有生物學活性,，而細胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定，同時也受鈣結(jié)合蛋白的影響,。細胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,，其中包括電壓門控鈣離子通道、離子型谷氨酰胺受體,、煙堿型膽堿能受體（nAChR）和瞬時受體電位C型通道（TRPC）等,。神經(jīng)元鈣成像的原理就是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強度表現(xiàn)出來，以反映神經(jīng)元活性,。該方法可以同時觀察多個功能或位置相關的腦細胞,。哈爾濱細胞鈣離子鈣成像售后保障現(xiàn)在鈣成像技術使用的鈣離子指示劑主要有化學性鈣離子指示劑和基因編碼鈣離子指示劑。

包含鈣離子指示劑的細胞可以通過熒光顯微鏡(fluorescencemicroscope)觀測,，然后通過CCD攝像機捕捉,、記錄圖像?，F(xiàn)在鈣成像技術主要在以下幾類神經(jīng)科學研究方面有廣泛應用：1.記錄培養(yǎng)的神經(jīng)元的活動。2.記錄腦片上神經(jīng)元的活動,。記錄神經(jīng)元的活動,。由于離體實驗本身的限制，現(xiàn)在越來越多的神經(jīng)方面科學家傾向于做在體鈣成像實驗,，希望能得到更準確且更能反應生理狀況的數(shù)據(jù),。得益于雙光子熒光顯微鏡的發(fā)展，現(xiàn)在在實驗動物處于huoti狀態(tài)下的鈣成像技術取得了飛速進展,。4.記錄神經(jīng)元樹突和樹突棘（spine）的活動,。由于對于實驗精度的要求，有些科學家不僅只想記錄單個神經(jīng)元的反應,，他們還想更確切地知道神經(jīng)元上哪些樹突和樹突棘參與了某個行為,，也就是說他們需要在huoti條件下，對單根樹突以及某些spine進行鈣成像記錄實驗,。由于雙光子熒光顯微鏡和GCaMP6基因編碼鈣離子指示劑的發(fā)展,，現(xiàn)在，對樹突和樹突棘用鈣成像實驗進行記錄也成為了可能,。

使用MPM對神經(jīng)元進行鈣成像時,，通過隨機訪問掃描—即激光束在整個視場上的任意選定點上進行快速掃描—可以只掃描感興趣的神經(jīng)元，這樣不僅避免掃描到任何未標記的神經(jīng)纖維,，還可以優(yōu)化激光束的掃描時間,。隨機訪問掃描可以通過聲光偏轉(zhuǎn)器（AOD）來實現(xiàn)，其原理是將具有一個射頻信號的壓電傳感器粘在合適的晶體上,，所產(chǎn)生的聲波引起周期性的折射率光柵,，激光束通過光柵時發(fā)生衍射。通過射頻電信號調(diào)控聲波的強度和頻率從而可以改變衍射光的強度和方向,，這樣使用1個AOD就可以實現(xiàn)一維橫向的任意點掃描,，利用1對AOD，結(jié)合其他軸向掃描技術可實現(xiàn)3D的隨機訪問掃描,。但是該技術對樣本的運動很敏感,，易出現(xiàn)運動偽影。目前,，快速光柵掃描即在FOV中進行逐行掃描,，由于利用算法可以輕松解決運動偽影而被guangfan的使用。進行鈣測定必須借助外界的某種可視化物質(zhì)作為它的標志物,。

傳統(tǒng)的寬場熒光顯微鏡由于光散射的影響,，只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進行成像，共聚焦顯微鏡由于光損傷較大，一般也只用于離體鈣成像,。隨著熒光顯微鏡技術的迅速發(fā)展,，在體鈣成像技術得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進行在體成像的時候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信噪比,。例如,，用雙光子顯微鏡對海馬樹突棘的鈣離子信號進行成像，研究神經(jīng)元突觸后長時程yizhi,；觀察小鼠運動皮層神經(jīng)元在嗅覺選擇任務中刺激相關電位等等,。不過，這些實驗還是需要對動物進行麻醉和固定,，而神經(jīng)科學領域很多研究更希望能夠?qū)ψ杂苫顒拥膭游镞M行研究。鈣成像系統(tǒng)集成自動控制和精確計時的多模式輸入端口,。深圳在體鈣成像inscopix

神經(jīng)方面科學迫切需要一種能夠兼顧全局和微觀的新型鈣成像技術,。inscopix鈣成像nVista

對于成像和長時間成像，較重要的是要保證細胞的正常生長,。熒光團受激發(fā)光光照后產(chǎn)生的氧化物質(zhì)與蛋白質(zhì),、核酸和脂肪等發(fā)生反應，熒光信號降低的同時（光致退色）也降低了細胞壽命（光線損傷）,。在光照過程中氧化劑的產(chǎn)生,主要決定于熒光團的光化學性質(zhì)和光照劑量,因此減少光照劑量成為解決上述問題的途徑之一,。光漂白（Photobleaching）指在光的照射下熒光物質(zhì)所激發(fā)出來的熒光強度隨著時間推移逐步減弱乃至消失的現(xiàn)象。熒光成像的質(zhì)量很大程度上依賴于熒光信號強度,，提高激發(fā)光強度固然可以提高信號強度,，但激發(fā)光的強度不是可以無限提高的，當激發(fā)光的強度超過一定限度時,，光吸收就趨于飽和,，并不可逆地破壞激發(fā)態(tài)分子，這就是光漂白現(xiàn)象,。在顯微技術中,，光漂白使得觀測變得很復雜，因為它會造成破壞,，使螢光團無法繼續(xù)放光,，從而干擾實驗結(jié)果。inscopix鈣成像nVista