酵母文庫實(shí)驗(yàn):本研究報(bào)道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達(dá),，而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達(dá),。在擬南芥 lec1-1 中異源表達(dá) OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補(bǔ) lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導(dǎo)致種子發(fā)育異常,，種子變長,、變窄、變薄,，堊白率較高,。此外，osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達(dá)紊亂,。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達(dá)的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用,。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型,。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達(dá)導(dǎo)致了種子變小。綜上表明,，OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用,。博士期間長期從事酵母單/雙雜交文庫構(gòu)建及篩選的工作。四川宣傳酵母文庫報(bào)價(jià)

本研究利用水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選,，繪制了水稻轉(zhuǎn)錄因子和菌根共生相關(guān)基因之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),。該網(wǎng)絡(luò)受到保守的磷感應(yīng)途徑統(tǒng)一控制，以磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子（PHR）為中心,。PHRs 是菌根共生所必需的,，通過 P1BS 順式作用元件調(diào)控菌根共生相關(guān)基因表達(dá)。高磷條件下,，SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導(dǎo)的對菌根共生相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控,，進(jìn)而抑制菌根共生。過表達(dá) OsPHR2 可以部分拮抗磷介導(dǎo)的對菌根共生的抑制作用,。本研究發(fā)現(xiàn),，植物直接營養(yǎng)吸收和通過菌根共生的間接營養(yǎng)吸收，都受到相同的磷信號網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控,。本研究將有助于高效用磷植株的培育,。廣東生物技術(shù)酵母文庫歐易生物是國內(nèi)較早提供酵母雜交技術(shù)服務(wù)的生物公司，較早掌握Gateway和Smart兩種建庫方法,。

酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)：為進(jìn)一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長和增強(qiáng)抗旱性的分子機(jī)制,，本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料，構(gòu)建了棉花干旱脅迫酵母文庫,。并以GhLEA3為誘餌,，采用酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)，從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白,，并對互作蛋白進(jìn)行了GO和KEGG分析,，發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路，互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑,，如糖原生成和代謝途徑,。此外，GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導(dǎo)表達(dá)***,，且在GhLEA3敲除的棉株中表達(dá)量低于野生型棉株

酵母雙雜交,、pulldown和BiFC實(shí)驗(yàn)均顯示，MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作,。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達(dá)MdJAZ1,，花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達(dá)MdJAZ1/MdJAZ1,，結(jié)果顯示過表達(dá)MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進(jìn)作用,。Pull down 實(shí)驗(yàn)和熒光素酶互補(bǔ)成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,，在 MdJAZ1 存在下，MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱（圖 a-c）,；外源施加 JA 可以部分恢復(fù) MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合,。對于 MdTRB1 在 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素積累中的作用機(jī)制，本研究建立了一個新的模型：MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作,，增強(qiáng)了 MdMYB9 對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性,，進(jìn)而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,，MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,，干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合；在 JA 存在的條件下,，MdJAZ1 被降解,，MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。酵母結(jié)構(gòu)及功能介紹酵母的應(yīng)用 ,。

酵母文庫實(shí)驗(yàn)：本研究發(fā)現(xiàn)了一個硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,，它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交,、蛋白質(zhì) pull-down,、BiFC 實(shí)驗(yàn)證實(shí)，MdBT2 可以與一個 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,，這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的,。此外，異源表達(dá) MdBT2 部分回復(fù)了 MdRGL3a 過表達(dá)所導(dǎo)致的擬南芥生長抑制,。綜上表明,，MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進(jìn)硝酸鹽介導(dǎo)的植物生長。實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)顯示,，培養(yǎng) 45 天,，蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加（圖 A-C）。smart酵母建庫和gateway酵母建庫,滿足各類客戶的需求,。福建建庫酵母文庫報(bào)價(jià)

什么是酵母文庫的構(gòu)建? 只需構(gòu)建自己需要研究蛋白的BD載體,，就能和本司**儲備的酵母文庫進(jìn)行篩庫實(shí)驗(yàn)。四川宣傳酵母文庫報(bào)價(jià)

利用酵母文庫進(jìn)行雙雜交篩選,，結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號阻遏物 DELLA 蛋白,，主要分布于細(xì)胞核中,。MdRGL3a 對于 GA 處理非常敏感，可以引起其發(fā)生降解,，PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性,。進(jìn)一步的酵母一對一雜交驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明,，兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（圖 A-B）,。并通過 GST pull-down,、BiFC 實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合（圖 C-D）。細(xì)胞外降解實(shí)驗(yàn)顯示,，與對照相比,，MdRGL3a 與過表達(dá) MdBT2 的愈傷組織的總蛋白共同孵育，會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解加快,；而與抑制 MdBT2 表達(dá)的愈傷組織的總蛋白共同孵育,，會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解減緩（圖 A）。并且蛋白酶體抑制劑 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解（圖 B）,。改變 MdRGL3a 表達(dá)量并不影響 MdBT2 的降解,。以上結(jié)果表明，MdRGL3a 可能通過 26S 蛋白酶體途徑發(fā)生降解,，而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解,。四川宣傳酵母文庫報(bào)價(jià)

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