酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明,,MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性,。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合,,可以干擾其與MdMYB9的互作,進(jìn)而負(fù)向調(diào)控MdTRB1介導(dǎo)的對花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用,。本研究表明,,JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物可以動態(tài)調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解,。酵母單雜交實驗步驟酵母文庫構(gòu)建原理,。福建酵母文庫應(yīng)用
通過酵母雙雜篩選實驗,進(jìn)一步研究AaWRKY9蛋白功能,,結(jié)果篩選到了與AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,,并通過Y2H、BiFC,、CoIP等進(jìn)行了驗證確認(rèn),。JAZs是JA介導(dǎo)的植物相應(yīng)中的負(fù)向調(diào)控因子,在毛狀體和老葉中高表達(dá),,在芽尖和嫩葉中表達(dá)量低,。為確認(rèn)AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促進(jìn)青蒿素積累過程中的轉(zhuǎn)錄***功能,通過雙熒光素酶報告基因檢測實驗發(fā)現(xiàn),,當(dāng)AaWRKY9與AaJAZ9共表達(dá)時,,其轉(zhuǎn)錄活性被抑制,而使用MeJA處理后,,這種抑制作用被抵消,,且AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性增強,反向驗證實驗結(jié)果一致,。說明JA可以通過降解JAZ9,,提高AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性,促進(jìn)青蒿素生物合成,。云南酵母文庫有什么用專業(yè)酵母文庫構(gòu)建和篩選公司多年經(jīng)驗,。
酵母雙雜交表明擬南芥AtBT2蛋白可以與AtRGA互作。與對照相比,,擬南芥bt1/2雙突變體幼苗高度降低,,而硝酸鹽處理可以進(jìn)一步抑制其生長,,外源施加GA可以回復(fù)其生長缺陷。在擬南芥中異源表達(dá)MdBT2可以明顯提高植株高度,,而PAC處理則會抑制這種生長的促進(jìn)作用,。在擬南芥中異源表達(dá)MdRGL3a可以明顯抑制植株生長,而硝酸鹽處理和MdBT2過表達(dá)則會緩解這種生長抑制作用,。外源GA處理可以逆轉(zhuǎn)以上對植株生長的影響(圖A-D),。以上結(jié)果表明,BT蛋白通過DELLA蛋白調(diào)控植株生長,,這一機制在不同的植物中具有保守性,。
歐易酵母文庫助力小麥根長抑制分子機制研究,近日,,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所景蕊蓮研究員,、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)王翔副教授為共同通訊作者,在 Journal of Experimental Botany 雜志(IF: 6.992)在線發(fā)表了題為“Wheat SHORT ROOT LENGTH 1 gene TaSRL1 regulates root length in an auxin-dependent pathway”的研究論文,,報道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長的分子機制,。文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。根系是植物從土壤中吸收水分,、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨特***,。根系結(jié)構(gòu)的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產(chǎn)量,。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,,與植物的多種發(fā)育過程和抗逆性有關(guān)。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經(jīng)多有報道,,但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究,。使用原裝酵母技術(shù)試劑盒、培養(yǎng)基,,保證實驗質(zhì)量,。實驗流程細(xì)致謹(jǐn)慎,實驗團隊經(jīng)驗豐富,。
通過傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng),,以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來源于不同年齡段的油松cDNA文庫,。將獲得的陽性克隆,,10個一組,挑選到1個96孔板的PCR板孔中,,獲得10*96個陽性克隆的96孔板,。以其中陽性克隆mix為模板,進(jìn)行PCR擴增,,并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化,。使用純化后的PCR產(chǎn)物,,進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測序文庫,通過NGS測序,,獲得6G的陽性克隆數(shù)據(jù),。通過分析二代測序數(shù)據(jù),獲得陽性克隆基因信息(去冗余后獲得135個互作子,,包含21個TFs,,2個TRs及酶類、熱激蛋白,、RNA結(jié)合等蛋白,,部分見表1)。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對一驗證(圖2),。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對分析,。對DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達(dá)譜、啟動子中的順勢作用元件功能進(jìn)行分析,,并對DIPs進(jìn)行GO注釋(圖3),。綜合生信分析結(jié)果,構(gòu)建針葉樹老化途徑的調(diào)控模型(圖4),。酵母文庫質(zhì)粒使用指南酵母菌的介紹 ,。廣東技術(shù)酵母文庫報價
酵母雙雜實驗過程中如何選擇核體系或者膜體系? 。福建酵母文庫應(yīng)用
歐易生物酵母文庫技術(shù)發(fā)表的又一篇高水平研究論文,。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控,。JAZ蛋白是茉莉酸信號反應(yīng)的阻遏物,通過抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來負(fù)向調(diào)節(jié)JA信號,?;ㄇ嗨睾驮ㄇ嗨厥欠N子、葉,、花和果實中重要的植物次生代謝產(chǎn)物,,可充當(dāng)抗氧化劑,幫助***活性氧和對**老,,對人類健康具有重要價值,。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB,、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控,。其中,蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的生物合成,,但其分子機制仍有待深入研究,。福建酵母文庫應(yīng)用
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