流式細(xì)胞儀是常用的細(xì)胞分析,、分選的儀器,,可以對(duì)處于液流中的各種熒光標(biāo)記的微粒進(jìn)行多參數(shù),、快速、準(zhǔn)確的定性、定量測(cè)定。流式細(xì)胞儀選購方法是什么,?明確目的:在購買流式細(xì)胞儀之前要考慮清楚自己的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模魇郊?xì)胞儀并不是wan能的,,比如說如果想要檢測(cè)亞微分辨率的微粒,,一般的流式細(xì)胞儀就都不合適。就熒光檢測(cè)而言,,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的新型流式細(xì)胞儀在分辨模糊昏暗的細(xì)胞群體方面,,不如那些貴一點(diǎn)的流式細(xì)胞儀,假如需要研究分析磷酸化受體和未磷酸化受體的話,,可能就要重新考慮流式細(xì)胞儀的選擇了,。細(xì)胞分析儀內(nèi)設(shè)光源、光學(xué)透鏡,、光電轉(zhuǎn)換器,、放大器、計(jì)算機(jī)等重要部件,可逐個(gè)統(tǒng)計(jì)和分析每種細(xì)胞,。常州全息無標(biāo)記3D顯微鏡供貨價(jià)格
染色待測(cè)細(xì)胞,,之后將單細(xì)胞懸液制作成功。用一定壓力往流動(dòng)室內(nèi)壓入待測(cè)樣品,,在高壓下從鞘液管噴出不含細(xì)胞的磷酸緩沖液,待測(cè)樣品流與鞘液管入口方向成一定角度,,如此,,鞘液就可以包繞著樣品高速流動(dòng),使一個(gè)圓形的流束組成,,在鞘液的包被下待測(cè)細(xì)胞單行排列,,依次從檢測(cè)區(qū)域通過。流式細(xì)胞儀的發(fā)光源一般是激光,。在樣品流上垂直照射著經(jīng)過聚焦整形后的光束,,在激光束的照射下的被熒光染色的細(xì)胞,會(huì)有激發(fā)熒光和散射光產(chǎn)生,。90度方向的光電倍增管和前向光電二極管同時(shí)接收這兩種信號(hào),。在前向小角度進(jìn)行光散射信號(hào)的檢測(cè),,細(xì)胞體積的大小基本上由這種信號(hào)來反映。細(xì)胞外囊泡分離分析系統(tǒng)售價(jià)細(xì)胞分析儀非常適合進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞熒光檢測(cè),、單個(gè)細(xì)胞質(zhì)量控制,、單個(gè)細(xì)胞精確鑒定等操作。
流式細(xì)胞儀在身體部位移植中的作用:流式細(xì)胞儀在身體部位移植中也占有重要地位,,它被用來判斷供者與受者之間配型是否合適,。其檢測(cè)手段是檢測(cè)受者血清中抗供者的抗HLA的抗體。根據(jù)抗體的種型,、效價(jià),、靶抗原和身體部位移植的類型不同,抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)也有所不同,。流式細(xì)胞儀與傳統(tǒng)方法相比更靈敏,、操作時(shí)間短并可同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞亞型、分辨出IgG和IgM抗體,。流式細(xì)胞儀所分析的靶細(xì)胞不只局限于淋巴細(xì)胞,,為移植的配型提供更有利的支持。移植術(shù)后,,免疫表型的監(jiān)測(cè)也很重要,。移植后CD4/CD8比值低下的病人排斥反應(yīng)發(fā)生較多;受者血清中產(chǎn)生抗供體細(xì)胞抗體者預(yù)后較差,,應(yīng)及時(shí)監(jiān)測(cè)以便進(jìn)行抗排斥的預(yù)防和ZL,。
流式細(xì)胞儀的高準(zhǔn)確度:以前,在兩個(gè)細(xì)胞間待測(cè)細(xì)胞成分存在5%以上的差異時(shí),,流式細(xì)胞儀才能檢測(cè)出來,;目前,兩個(gè)待測(cè)細(xì)胞間細(xì)胞成分只相差1%左右時(shí),,流式細(xì)胞儀便可檢測(cè)出來,。例如,在檢測(cè)男人和女人外周血淋巴細(xì)胞DNA含量時(shí),,只是X染色體和Y染色體DNA含量之間有所區(qū)別(大約相差約占整個(gè)細(xì)胞的2%左右),,應(yīng)用流式細(xì)胞儀便可以輕而易舉地把男人和女人的淋巴細(xì)胞區(qū)分開并分選出來。流式細(xì)胞儀的高精度:分辨率是衡量流式細(xì)胞儀測(cè)量精確度的指標(biāo),,通常用變異系數(shù)(CV)值來表示,。用流式細(xì)胞儀檢測(cè)某種細(xì)胞成分時(shí),比用其他分析細(xì)胞學(xué)技術(shù)的CV值都要小得多,,分辨率要高得多,。眾所周知,用某種儀器分析細(xì)胞時(shí),其CV值越大,,分析結(jié)果越不精確,。細(xì)胞分析儀是一種確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果精確、快速的科研儀器,,充分體現(xiàn)了人類探究未知領(lǐng)域的智慧和勇氣,。
死細(xì)胞利用PI、7-AAD或EMA進(jìn)行染色,這些染料不能夠?qū)罴?xì)胞進(jìn)行染色,。能夠同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志和活性分析為這個(gè)方法的優(yōu)勢(shì),。尤其適用于高度壞死的樣本。Z常用的是7-AAD,,由于在488nm激發(fā)下,,670nm左右為其Z大發(fā)射光,與FITC或PE進(jìn)行多色標(biāo)記非常適合,。但是隨著時(shí)間延長(zhǎng),,在固定的細(xì)胞群體,會(huì)重新分配7-AAD,,很難區(qū)分死活細(xì)胞,。因此,EMA,,對(duì)于染色并在固定后12小時(shí)以上分析的標(biāo)本是Z好的選擇,。EMA與死細(xì)胞DNA穩(wěn)定的共價(jià)結(jié)合使長(zhǎng)時(shí)間固定后仍能很好地區(qū)分固定前的死活狀態(tài)得以保證。細(xì)胞分析儀具有相對(duì)于其他技術(shù)更為快速,、準(zhǔn)確,、可靠的單細(xì)胞鑒別功能。細(xì)胞外囊泡分離分析系統(tǒng)售價(jià)
細(xì)胞分析儀在基因編輯,、細(xì)胞工程等領(lǐng)域中有著普遍的應(yīng)用,。常州全息無標(biāo)記3D顯微鏡供貨價(jià)格
細(xì)胞分析儀性能的技術(shù)指標(biāo)主要有熒光分辨率、熒光靈敏度,、分析參數(shù)多少及分析,、分選速度及純度等。熒光分辨率是指分辨兩個(gè)相鄰峰的Z小距離,,通常用變異系數(shù)(CV值)來表示?,F(xiàn)在市場(chǎng)上主流型號(hào)的熒光分辨率小于2.0%,有的甚至在1%之內(nèi),。熒光靈敏度反映了儀器探測(cè)Z小熒光光強(qiáng)的能力,一般用熒光微球上可測(cè)出的熒光(FITC)的Z小分子數(shù)來表示,。目前細(xì)胞分析儀可以達(dá)到100以內(nèi),。一般分析速度為500-10000個(gè)細(xì)胞/s,分選速度控制在1000個(gè)細(xì)胞/s以下,,分選純度>98%,,有的細(xì)胞分析儀分析速度可達(dá)100000個(gè)細(xì)胞/s,,分選速度可達(dá)70000個(gè)細(xì)胞/s,分選純度>98%,。常州全息無標(biāo)記3D顯微鏡供貨價(jià)格