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細(xì)胞培養(yǎng)胰蛋白酶生物制品簡(jiǎn)介中文名稱:胰蛋白酶中文同義詞:胰蛋白酶;胰蛋白酶1:250(豬胰臟);胰蛋白酶1:300(豬胰臟);胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;胰蛋白酶1:250;蛋白酶類英文名稱:Trypsin英文同義詞:TRYPSIN;TRYPSIN,1-250;TRYPSIN,1-300;TRYPSIN-EDTA;TRYPSIN,HUMANPANCREAS;TRYPSINPORCINE;TRYPSIN,PORCINEPANCREAS;CAS號(hào):9002-07-7分子式:C6H15O12P3分子量:≈24000EINECS號(hào):232-650-8胰蛋白酶物化性質(zhì)胰蛋白酶是從牛、豬,、羊的胰臟提取,,純化獲得的結(jié)晶,再制成的凍干制劑,。易溶于水,,不溶于三氯甲烷,、乙醇,、**等有機(jī)溶劑。在,,短時(shí)間煮沸幾乎不失活,;在堿溶液中加熱則變性沉淀,Ca2+有保護(hù)和***作用,,胰蛋白酶的等電點(diǎn)為,。牛胰蛋白酶原有229個(gè)氨基酸組成,含6對(duì)二硫鍵,,其氨基酸排列順序和晶體結(jié)構(gòu)已被闡明,。在腸激酶活自身催化下,酶原的N末端賴氨酸與異亮氨酸殘基之間的肽鍵被水解,,釋放出來纈-天-天-天-天-賴6肽,,生成有活性的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸殘基223個(gè),,分子量23800[2],,活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶,。豬胰蛋白酶的化學(xué)結(jié)構(gòu)與牛胰蛋白酶十分相似,在氨基酸殘基排列順序中,,只有41個(gè)氨基酸殘基不同,。胰酶是一種復(fù)合消化酶制劑。重慶重組胰酶市場(chǎng)報(bào)價(jià)
胰酶分裝凍存時(shí)要注意什么,?胰酶分裝時(shí)盡量分裝成多瓶,,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因?yàn)槔鋬霰4鏁r(shí)體積會(huì)膨脹,,多次使用同一瓶胰酶反復(fù)凍融會(huì)降低消化效果并增大污染的可能性,。5、怎么才能判斷胰酶消化完全,?注意:不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才表示消化好了,。一般肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,,多半呈沙狀移動(dòng)就可以了,,就應(yīng)該停止消化。6,、胰酶適用于哪些細(xì)胞消化,?它的消化效果與哪些有關(guān)呢?胰酶適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織和傳代細(xì)胞,,如胚胎,、上皮、肝,、腎等組織,,但對(duì)纖維性組織和較硬的*組織效果較差。胰酶的消化效果主要與pH值,、溫度,、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關(guān),。江西進(jìn)口胰酶有哪些消化液經(jīng)過過濾除菌,,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,。
胰蛋白酶**初在牛的胰腺中被發(fā)現(xiàn),,現(xiàn)在已經(jīng)擴(kuò)展到多種來源,包括哺乳動(dòng)物(人,、牛,、豬和狗)、無脊椎動(dòng)物和微生物等。胰蛋白酶的商業(yè)化生產(chǎn)主要依賴哺乳動(dòng)物的胰腺組織提取或者重組表達(dá)提取,。直接從哺乳動(dòng)物胰腺組織中提取的缺點(diǎn)是生產(chǎn)成本高,,易造成其他結(jié)構(gòu)相近的蛋白污染。重組表達(dá)提取胰蛋白酶可以縮短提取時(shí)間,、降低生產(chǎn)成本,,提取的蛋白純度高,通過優(yōu)化重組表達(dá)體系可以提高蛋白的表達(dá)量,,這些優(yōu)勢(shì)為其在醫(yī)療,、食品等行業(yè)中的應(yīng)用提供了更多的可能性。[1]折疊
胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含0.25%胰酶(Trypsin),、0.02%EDTA和酚紅,不含Ca2+和Mg2+,。該消化液已用0.22μm濾膜過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。本胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn),通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞,。使用說明:貼壁細(xì)胞的消化:1,、吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清,。2,、加入少量胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅),略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同,。3,、顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化,或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來;此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液,;加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。4、如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化,。5,、如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。EDTA是一種二價(jià)金屬離子螯合劑,,用于結(jié)合抑制胰蛋白酶活性的鈣離子和鎂離子,。
胰酶消化細(xì)胞的原理首先,,胰酶消化細(xì)胞的原理涉及到胰腺的分泌。當(dāng)我們進(jìn)食后,,胃內(nèi)的食物會(huì)刺激胃黏膜釋放胃液,,同時(shí)也會(huì)刺激胰腺分泌胰液。胰液中含有多種酶類物質(zhì),,其中包括胰蛋白酶,、胰脂酶和胰淀粉酶等。這些酶類物質(zhì)會(huì)通過胰管進(jìn)入到小腸內(nèi),,開始對(duì)食物進(jìn)行消化作用,。其次,,胰酶消化細(xì)胞的原理涉及到酶與底物的結(jié)合。胰酶在小腸內(nèi)與食物中的蛋白質(zhì),、脂肪和碳水化合物等成分結(jié)合,,形成酶-底物復(fù)合物。胰蛋白酶主要作用于蛋白質(zhì),,能夠?qū)⒌鞍踪|(zhì)分解為氨基酸,;胰脂酶主要作用于脂肪,能夠?qū)⒅痉纸鉃楦视秃椭舅?;胰淀粉酶主要作用于碳水化合物,,能夠?qū)⒌矸鄯纸鉃槠咸烟恰?**,胰酶消化細(xì)胞的原理涉及到產(chǎn)物的吸收,。經(jīng)過胰酶的作用,,食物中的大分子成分被分解為小分子,這些小分子能夠通過腸壁被吸收到血液循環(huán)中,,為人體提供能量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),。胰酶的作用直接影響著人體對(duì)食物的消化和吸收,對(duì)維持人體的正常代謝和生理功能至關(guān)重要,。綜上所述,,胰酶消化細(xì)胞的原理是一個(gè)復(fù)雜而精密的過程,它涉及到胰腺的分泌,、酶與底物的結(jié)合以及產(chǎn)物的吸收等環(huán)節(jié),。胰酶在人體內(nèi)發(fā)揮著重要的作用,它對(duì)人體的健康和生命至關(guān)重要,。因此,,我們應(yīng)該注重保護(hù)胰腺的健康,合理飲食,。 胰蛋白酶是一種異源蛋白酶,,與培養(yǎng)皿結(jié)合可以降解細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)。福建國(guó)產(chǎn)胰酶價(jià)格查詢
胰酶4℃保存,,一年有效,;-20℃可保存更長(zhǎng)時(shí)間。重慶重組胰酶市場(chǎng)報(bào)價(jià)
乙二胺四乙酸:(EDTA)是一種有機(jī)化合物,,常溫常壓下為白色粉末,。它是一種能與Mg2+、Ca2+,、Mn2+,、Fe2+等二價(jià)金屬離子結(jié)合的螯合劑。動(dòng)物細(xì)胞在粘附的時(shí)候,需要有Ca或Mg離子的參與,,EDTA與他們結(jié)合后,,導(dǎo)致動(dòng)物細(xì)胞粘附能力降低,再加上胰蛋白酶的消化作用,,使得細(xì)胞與瓶壁快速脫離,。兩者起到了協(xié)同消化的作用。難消化的細(xì)胞,,胰酶中可填加EDTA,。EDTA對(duì)細(xì)胞貼壁性有影響,因此使用時(shí)要甚重,。如果影響貼壁,,但消化時(shí)必須要用,那么在用完全培養(yǎng)基終止消化后,,可離心棄上清,,再加完全培養(yǎng)基培養(yǎng),可去除EDTA,。如果對(duì)貼壁沒影響,,那么可不離心。重慶重組胰酶市場(chǎng)報(bào)價(jià)