所以做過強(qiáng)檢的**器還必須進(jìn)行**效果的驗(yàn)證,。一些單位常常忽略了這個重要的問題。國內(nèi)市售的手提**器,，往往儀器指針達(dá)到所需的溫度,，但**物品的實(shí)際溫度卻未達(dá)到要求。導(dǎo)致**物品不徹底,，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。培養(yǎng)基**不徹底，影響培養(yǎng)基的使用及結(jié)果判斷,。因此高壓蒸氣**器無菌效果的驗(yàn)證是一個必須引起重視的問題,。（三）**時的注意事項(xiàng)使用高壓蒸氣**器時，首先應(yīng)注意在開放蒸氣的同時,，排除**器內(nèi)的冷空氣,。必須將器內(nèi)冷空氣全部排除后，才可關(guān)閉排氣孔,。假如**器內(nèi)仍存留有部分空氣時,，剛壓力表上雖已達(dá)到了某一壓力值，但器內(nèi)之溫度仍未達(dá)到相應(yīng)之度數(shù),。存留的空氣越多,，剛二者相差也越大。差也越大,，器內(nèi)溫度不足,，**則不徹底,。表蒸汽壓力與溫度的關(guān)系蒸汽壓力（kPa）密度（kg/cm2）溫度（℃）1126表高壓蒸汽**器中溫度與冷空氣排出量的關(guān)系蒸汽壓力（kPa）所達(dá)溫度,。F12培養(yǎng)基在細(xì)胞分化研究中表現(xiàn)優(yōu)越。江蘇無血清培養(yǎng)基價目表

    愈傷**誘導(dǎo)率為100％,。如圖6所示,。對比培養(yǎng)例6：將cs基本培養(yǎng)基替換為ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例6,，ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示,。ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為：本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時,，培養(yǎng)15-18d的葉片略微增厚，在葉片四周產(chǎn)生較少的淡綠色愈傷**,，愈傷**誘導(dǎo)率為90％,，在愈傷**團(tuán)塊上產(chǎn)生的嫩綠色不定芽數(shù)量較少；本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時,，培養(yǎng)9-11d在切口處產(chǎn)生大量淡黃色致密的愈傷**,，愈傷**誘導(dǎo)率為100％。如圖6所示,。培養(yǎng)實(shí)例6和對比培養(yǎng)例6的誘導(dǎo)結(jié)果比較：用上述方法進(jìn)行本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時,，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基愈傷**誘導(dǎo)率為100％，而ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)率*為90％,，在所述相同培養(yǎng)條件下,，與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基相比，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基可更快誘導(dǎo)出大量致密的葉片愈傷**,、產(chǎn)生更多的不定芽,；用上述方法進(jìn)行本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的根愈傷**形態(tài)相近,，兩種培養(yǎng)基的根愈傷**誘導(dǎo)率均為100％,。如圖6所示。培養(yǎng)實(shí)例7：水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)(1)水稻種子消毒及篩選：a,、選種：以秈稻縉恢10號為例,，將水稻種子晾曬干燥后于4℃下長期保存，挑選籽粒飽滿,、大小基本一致的水稻種子,，用剪刀從種子中部剪開，去除谷殼,。安徽Ham's F12培養(yǎng)基供應(yīng)商F12培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)成分,，支持細(xì)胞的快速增殖。

    擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)時,，培養(yǎng)6-9d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**,，培養(yǎng)20-22d獲得淡黃色松脆型愈傷**，在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛,，顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％,。如圖5所示。培養(yǎng)實(shí)例5和對比培養(yǎng)例5的誘導(dǎo)結(jié)果比較：用上述方法進(jìn)行哥倫比亞擬南芥葉片和根愈傷**誘導(dǎo)時,，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％,，但cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的愈傷**出愈時間比ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基提前至少1d；在相同培養(yǎng)條件下,，與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基相比,，經(jīng)cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)的葉片團(tuán)塊狀愈傷**更大,、誘導(dǎo)的根愈傷**更多。如圖5所示,。培養(yǎng)實(shí)例6：本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)實(shí)例6與培養(yǎng)實(shí)例5不同的地方在于,，步驟(1)將；步驟(2)將2,,；步驟(3)所取葉片為本氏***無菌苗葉片,，用手術(shù)剪刀將無菌葉片剪成，用鑷子將其平鋪于誘導(dǎo)培養(yǎng)基,；步驟(4)所取根為本氏***無菌苗的根,，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為：本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時，培養(yǎng)15-18d的葉片明顯增大增厚,，葉片四周產(chǎn)生大量的淡綠色致密的愈傷**,，愈傷**誘導(dǎo)率為100％，且在愈傷**團(tuán)塊上已開始產(chǎn)生多個嫩綠色的不定芽,；本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時,，培養(yǎng)9-11d在切口處產(chǎn)生大量淡黃色致密的愈傷**。

    第三節(jié)**的代謝與培養(yǎng)基新陳代謝(metabolism)足生物有機(jī)體基本的特征之一,，是生命活動中一切生化反應(yīng)的總稱,。它包括物質(zhì)的分解和物質(zhì)的合成過程。**吸收了外界的營養(yǎng),，在酶的作用下將其分解,，再在酶的作用下臺成**菌體的成分。分解與合成兩個過程伴同發(fā)生,，緊密相關(guān),，維持了**細(xì)胞的生命，進(jìn)行**的生長,。通過檢測**系統(tǒng)及代謝產(chǎn)物的生理,，來鑒定**的試驗(yàn)稱生化試驗(yàn)。生化試驗(yàn)可分為糖代謝試驗(yàn),、蛋白質(zhì)代謝試驗(yàn),、鹽利用試驗(yàn)和呼吸酶類斌驗(yàn)4種。l.代謝試驗(yàn)①氧化發(fā)酵試驗(yàn)O-F,；②糖（醇）類發(fā)酵試驗(yàn),；③VP和甲基紅試驗(yàn)2.蛋白質(zhì)代謝試驗(yàn)①蛋白水解試驗(yàn)；②硫化氫試驗(yàn),；③吲哚試驗(yàn),；④脫羧酶試驗(yàn),；③脫氨試驗(yàn),；⑥尿素酶試驗(yàn),。3.鹽類代謝試驗(yàn)①枸櫞酸鹽試驗(yàn)；②丙二酸鹽利用試驗(yàn),；③硝酸鹽還原試驗(yàn)4．呼吸酶類試驗(yàn)①氧化酶試驗(yàn),；②細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)表IMVIC試驗(yàn)對腸桿菌屬的鑒別作用菌名吲哚（I）甲基紅（M）VP（Vi）枸櫞酸鹽。無酚紅培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。

    二氧化碳不斷被釋放,，培養(yǎng)液變酸，pH值發(fā)生變化,。酚紅是細(xì)胞培養(yǎng)基中**常用的pH指示劑,，但依靠細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅等pH指示劑進(jìn)行判斷，需要實(shí)驗(yàn)員的經(jīng)驗(yàn)積累,，存在較大的主觀性,。實(shí)際上，個性化細(xì)胞培養(yǎng)基或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅含量較少或是不含酚紅,，只能通過pH計(jì)或者pH電極進(jìn)行pH值的檢測,，結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠。緩沖能力細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)具有一定的緩沖能力,。細(xì)胞培養(yǎng)過程中造成細(xì)胞培養(yǎng)液pH波動的主要物質(zhì)是細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2,。在封閉式培養(yǎng)過程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生碳酸，細(xì)胞培養(yǎng)液pH很快下降,；打開培養(yǎng)器具時CO2逸出則會引起pH升高,。細(xì)胞培養(yǎng)基通常采用NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng)，按下列化學(xué)反應(yīng)方程式調(diào)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值：H2O+CO2→H2CO3?H++HCO3－NaHCO3?Na++HCO3－此外,，還有緩沖能力較高的磷酸鹽緩沖系統(tǒng),。但碳酸鹽緩沖系統(tǒng)的細(xì)胞毒性小、成本低,，在細(xì)胞培養(yǎng)中應(yīng)用得更為***,。另一種較為常用的緩沖液是HEPES（羥乙基哌嗪乙硫磺酸）液，它是一種非離子兩性緩沖液,，在pH~,。高濃度的HEPES可能對細(xì)胞**性作用，細(xì)胞培養(yǎng)時HEPES的添加濃度一般為10～25mmol/L,。滲透壓細(xì)胞必須生活在等滲的環(huán)境中,，大多數(shù)體外培養(yǎng)的細(xì)胞對滲透壓有一定耐受性。研究顯示,。DMEM培養(yǎng)基提供了適宜的pH值和滲透壓,。貴州培養(yǎng)基報價

MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營養(yǎng)成分和礦物質(zhì)。江蘇無血清培養(yǎng)基價目表

    參與細(xì)胞的代謝活動。此外,，通過提供鈉,，K+和Ca2+，幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能,。Na+是細(xì)胞外液中**主要的陽離子,，對維持滲透壓的恒定有決定性的作用，還與Cl－共同參與生物電活動,、維持水平衡和酸堿平衡等,。K+主要分布在細(xì)胞內(nèi)液，對于***某些酶是必需的,，并在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡上也有極重要意義,。Ca2+和Mg2+主要參與信號傳導(dǎo)、能量代謝,、脂肪酸合成,、核糖體穩(wěn)定和蛋白質(zhì)合成等多種生理作用。PO43－,、SO42－,、HCO3－是基質(zhì)所需陰離子，同時是細(xì)胞內(nèi)電荷的調(diào)節(jié)者,。磷對于細(xì)胞的生長,、代謝和調(diào)控都有重要的作用，含磷的化合物如核酸,、磷脂,、蛋白質(zhì)是構(gòu)成細(xì)胞的主要成分，ATP,、ADP是能量生成,、存儲和利用的不可或缺的化合物。上述離子對于細(xì)胞的作用各有不同,，它們共同構(gòu)成了細(xì)胞賴以生存的滲透壓,、pH和電化學(xué)平衡的微環(huán)境，細(xì)胞對于某種元素的吸收利用會受到其它元素的干擾,，例如培養(yǎng)基中過高的鈣離子濃度會使鎂和鋅的吸收利用受到干擾,。因此，在保證培養(yǎng)基中上述離子濃度滿足要求以外,，還需保證上述離子之間種類和比例的平衡,。此外，微量元素如鐵,、鈷,、鎳,、硒、碘,、銅,、鋅、錳,、鉻、鉬,、氟等對于細(xì)胞生長代謝和產(chǎn)物合成都有促進(jìn)作用,。江蘇無血清培養(yǎng)基價目表