由于培養(yǎng)基的間歇**不需要專門的**設備，投資少,，對設備要求簡單,，對蒸汽的要求也比較低，且**效果可靠,，因此,，間歇**是中小型生產工廠經常采用的一種培養(yǎng)基**方法。（三）,、培養(yǎng)基的連續(xù)**1,、定義：連續(xù)**也叫連消,，將配制好的并經預熱（60～75℃）的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔，使在短時間內達到**溫度（126～132℃）,。然后進入維持罐（或維持管）,，使在**溫度下維持3～7分鐘后再進入冷卻管，使其冷卻至接種溫度并直接進入已事先**（空罐**）過的發(fā)酵罐內,。其溫度一般以126～132℃為宜,，總蒸汽壓力要求達到～MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)**時,，需在培養(yǎng)基進入發(fā)酵罐前,，直接用蒸汽進行空罐**（空消），用無菌空氣保壓,，待培養(yǎng)基流入罐后,，開始冷卻。**時對培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器,。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式,、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式,，其過程均包括加熱,、維持和冷卻階段。2,、連續(xù)**的流程：（1）由熱交換器組成的**系統流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器，蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高,，經維持段保溫一定時間后,，培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進行冷卻。無血清培養(yǎng)基為細胞培養(yǎng)提供了純凈的背景,。廣東RPMI1640培養(yǎng)基包括

    無芽孢：E=209—250*103J/mol,。顯然，（5）式的比值〉1,，說明提高溫度對于第二個平行反應,，即菌體死亡的反應是有利的。提高溫度,，雖然兩個平行性反應的反應速度常數都提高了,，但是，達到同樣的**效果,，所需要的時間卻縮短了,，由于***個反應也就是營養(yǎng)成分破壞的反應速度常速增加的少，因此,，有利于減少培養(yǎng)基在**過程中營養(yǎng)成分的破壞,。換言之,，高溫短時**對于培養(yǎng)基營養(yǎng)成分是有利的。通常所說的高溫短時**可以提高生產效益,，其理論根據就在于此,。結論1：當**溫度上升時，微生物殺死速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加,。要減少營養(yǎng)成分的破壞,，可升高溫度**。結論2：在**時選擇較高的溫度,、較短的時間,，這樣便既可達到需要的**程度，同時又可減少營養(yǎng)物質的損失,。（二）,、影響**效果的因素（1）微生物種類：不同的微生物k值不同。（2）初始菌量：在保持N值不變的前提下,，t與初始菌量N0的對數成正比,。（3）培養(yǎng)基成份：油脂、蛋白質增加微生物的耐熱性,。(4)傳熱與混合狀況：影響受熱均勻度,。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度,。(7)pH：酸性pH下可加快微生物熱死速率三,、培養(yǎng)基的工業(yè)**。河南DMEM/F12培養(yǎng)基答疑解惑減血清培養(yǎng)基減少了血清對細胞的影響,。

    所描述的實施例**是本申請一部分實施例,，而不是全部的實施例?；诒旧暾堉械膶嵤├?，本領域普通技術人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都應當屬于本發(fā)明保護的范圍,。實施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,，然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b,。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l,，k2hpo42g/l,，mgso4·7h2o50mg/l，2-羥基乙胺40mg/l,，cecl310mg/l,，mnso4·h2o3mg/l,，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l,，生物素7μg/l,；將各原料攪拌均勻后，調節(jié)ph為,，121℃**15min,，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a,；所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸5g/l,，尿素2g/l，殼聚糖80mg/l,；將各原料攪拌均勻后,，調節(jié)ph為，121℃**15min,，自然冷卻,，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b；采用常規(guī)發(fā)酵工藝：將黃色短桿菌gdk-9按8％接種量將種子液（od600nm為）接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng),，發(fā)酵培養(yǎng)24h,，然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,，收集發(fā)酵液,；整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中，控制發(fā)酵溫度35℃,，通風比1∶,，攪拌轉速300r/min，溶氧維持在20％,。

    本發(fā)明涉及植物**培養(yǎng)技術領域，尤其是涉及一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法,。背景技術：繡球(hydrangeamacrophylla)為虎耳草科繡球屬落葉灌木,別名八仙花,、**花、粉團花,、雪球花,、草繡球等，是園林上應用***的觀賞植物,。原產于我國長江流域及以南,，自然株高2m。葉對生,，倒卵或橢圓形,，邊緣有鋸齒,，傘房花序頂生，直徑20cm,，近球形,。花色多變,，青白色,，漸轉粉紅色，再轉紫紅色,，花色美艷,。其花色又常隨土壤的酸堿度而改變,土壤ph值4～6時，花色多呈藍色,；ph值,，則呈紅色。繡球花葉片翠綠,，花色鮮艷,，盛開時花團錦簇，美麗多姿,，每簇花可開2個月之久,，觀賞期長。由于繡球花的孕性花極為少數,，所以不易結種,，常用分株、壓條或扦插方法繁殖,，但分株,、壓條繁殖倍率低，速度慢,，而扦插繁殖又會受到季節(jié)的限制,，不能常年生產苗木，很難滿足市場的需求,。技術實現要素：針對現有技術存在的不足,，本發(fā)明的目的之一是提供一種繁殖周期短，效率高,，成本低的繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法,。本發(fā)明的上述發(fā)明目的是通過以下技術方案得以實現的：一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法，具體步驟如下：s1：外植體選擇,；s2：外植體消毒,；s3：誘導培養(yǎng)；s4：增殖培養(yǎng)；s5：生根培養(yǎng),，其中,。減血清培養(yǎng)基減少了實驗中的血清干擾。

    3)培養(yǎng)方法：將配制的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長,、寬,、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中，用移液槍吸取帶有無菌水的無菌種子,，吹打在無菌濾紙上,，用無菌尖頭鑷子將種子均勻點播在培養(yǎng)基上；于溫度22-24℃,、濕度50-70％,、光照強度1500-2000lux、光照和黑暗交替(光照時間16h,、黑暗時間8h)條件下培養(yǎng),。(4)1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗,，表現為植株健壯,，蓮座葉均已伸展，葉色濃綠,，根系發(fā)達,、平均主根長為。如圖1所示,。對比培養(yǎng)例1：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,，其余完全同培養(yǎng)實例1，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示,。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％,，培養(yǎng)16d的幼苗，表現為植株健壯,，蓮座葉部分伸展,，葉色濃綠，根系發(fā)達,、平均主根長為,。如圖1所示。培養(yǎng)實例1和對比培養(yǎng)例1的培養(yǎng)結果比較：哥倫比亞型擬南芥在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％,；在相同條件下培養(yǎng)16d時，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳,，主要表現為蓮座葉長勢更好、根系更為發(fā)達,。如圖1所示,。F12培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)支持,。河南DMEM/F12培養(yǎng)基答疑解惑

減血清培養(yǎng)基減少了實驗中血清帶來的變異性。廣東RPMI1640培養(yǎng)基包括

    1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結果為：中雙11號油菜種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％,，培養(yǎng)9d的幼苗,，表現為植株健壯、平均株高為,，葉色濃綠,，莖稈粗壯、平均莖中粗為,，根系發(fā)達,、平均根數為(>)、平均主根長為,。如圖3所示,。培養(yǎng)實例3和對比培養(yǎng)例3的培養(yǎng)結果比較：中雙11號油菜種子在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)9d時,，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳，其株高,、根的數目優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基,，莖粗及平均主根長度與1/2ms生長培養(yǎng)基相近。如圖3所示,。培養(yǎng)實例4：馬鈴薯無菌苗培養(yǎng)生長培養(yǎng)基配制：1/2cs基本培養(yǎng)基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l,，用超純水溶解，,。1/2cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示,。培養(yǎng)方法：以克新18號馬鈴薯為例，將配制好的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長,、寬,、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中，選擇生長旺盛的馬鈴薯脫毒苗,，于無菌環(huán)境下,，根據實際需要，用手術剪刀剪取約1cm長的至少帶有1個葉芽的莖端或莖段,，用彎頭鑷子將其1/3-1/2長度垂直插入培養(yǎng)基中,；于溫度22-23℃、濕度50-70％,、光照強度2000-3000lux,、光照和黑暗交替(光照時間14h、黑暗時間10h)條件下培養(yǎng)。廣東RPMI1640培養(yǎng)基包括