微量元素在細(xì)胞內(nèi)通常以與有機(jī)物結(jié)合的形式存在,。其中鐵在細(xì)胞中參與氧的轉(zhuǎn)運(yùn)；鈷是維生素B12的組成部分,，參與葉酸的合成和脂肪酸的合成,；鎳能夠***脫氧核糖核酸酶、乙酰輔酶A合成酶等在細(xì)胞內(nèi)具有重要功能的酶,，還具有穩(wěn)定核酸結(jié)構(gòu)的功能,；亞硒酸鈉中的硒，作為谷胱甘肽過氧化物酶的輔基,，具有抗過氧化物能力,，參與消除細(xì)胞內(nèi)的脂肪酸過氧化物，提高細(xì)胞的生長速率和活性,。在低血清,、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中,，為滿足細(xì)胞生長增殖需要，常常添加一些成份：蛋白質(zhì),、多肽,、核苷、嘌呤,、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物,、脂類、及一些血清替代因子等,。其中蛋白質(zhì)具有重要的作用,，動(dòng)物細(xì)胞對許多物質(zhì)（難溶于水的離子或脂類物質(zhì)）的攝取需要借助蛋白質(zhì)的傳遞作用，如白蛋白,、傳遞蛋白,、貼壁蛋白等能夠攜帶脂肪酸、***,、礦物質(zhì)等促進(jìn)細(xì)胞生長,。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種重要的傳遞蛋白，能夠結(jié)合鐵,，促進(jìn)細(xì)胞對鐵離子的吸收,，并具有***作用，其促生長作用可能與其具有生長因子的功能有關(guān),。胰島素可促進(jìn)細(xì)胞對葡萄糖和氨基酸的利用,，商業(yè)化中一些生長因子以重組蛋白形式添加到培養(yǎng)基中，主要用來刺激細(xì)胞增殖,，并可促進(jìn)糖元和脂肪酸的合成,。乙醇胺是一種重要的刺激細(xì)胞生長的化合物，是腦磷酸的合成前提,。F12培養(yǎng)基支持多種細(xì)胞的生長和增殖,。中國澳門MEM a培養(yǎng)基常見問題

    1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基上的存活率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗,，表現(xiàn)為植株健壯,、平均莖高、平均莖中粗為,，葉色濃綠,，根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為8個(gè),。如圖4所示,。對比培養(yǎng)例4：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例4，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示,。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：馬鈴薯莖端在1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率為100％,，培養(yǎng)16d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯,、平均莖高,、平均莖中粗為，葉色濃綠,，根系發(fā)達(dá),、平均根數(shù)為6個(gè)。如圖4所示,。培養(yǎng)實(shí)例4和對比培養(yǎng)例4的培養(yǎng)結(jié)果比較：馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)16d時(shí),，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳，其莖高,、莖中粗,、根的數(shù)量均優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基。如圖4所示,。培養(yǎng)實(shí)例5：哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)(1)擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基：cs基本培養(yǎng)基+,，用超純水溶解，,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示,。(2)擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基：cs基本培養(yǎng)基+2,，用超純水溶解,，,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。,。甘肅培養(yǎng)基供應(yīng)商無酚紅培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的高度準(zhǔn)確性,。

    流加質(zhì)量百分比濃度為20％的葡萄糖維持殘?zhí)遣坏陀冢ィ骷酉輨┫?。?shí)施例2一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,，然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b,。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖100g/l，酵母浸膏25g/l,，k2hpo41g/l,，mgso4·7h2o70mg/l，2-羥基乙胺20mg/l,，cecl35mg/l,，mnso4·h2o2mg/l,，feso4·7h2o2mg/l，vb15mg/l,，生物素5μg/l,；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為,，121℃**15min,，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a,；所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸7g/l,，尿素2g/l，殼聚糖50mg/l,；將各原料攪拌均勻后,，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min,，自然冷卻,，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b；采用常規(guī)發(fā)酵工藝：將黃色短桿菌gdk-9按8％接種量將種子液（od600nm為）接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),，發(fā)酵培養(yǎng)24h,，然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,，收集發(fā)酵液,；整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過程中，控制發(fā)酵溫度35℃,，通風(fēng)比1∶,，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，溶氧維持在20％,，流加質(zhì)量百分比濃度為20％的葡萄糖維持殘?zhí)遣坏陀冢?，流加消泡劑消泡。?shí)施例3一,、cecl3稀土鹽對菌體濃度,、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。

    cs液體培養(yǎng)基和1/2cs液體培養(yǎng)基在用不同ph超純水(ph為)配制時(shí)的ph都較為穩(wěn)定,，在未調(diào)ph的情況下,，可直接用于多種植物培養(yǎng)。如圖8所示,。(2)以克新18號(hào)馬鈴薯無菌苗為例,，觀察在未調(diào)ph和將ph調(diào)至：a、培養(yǎng)基制作方法：隨機(jī)選取超純水，測得其ph為,，用于配制8種不同的液體培養(yǎng)基,。第一種：1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為,；第二種：1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,，其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為；第三種：ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基,，其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為,；第四種：cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為,；第五種：1/,，其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至,；第六種：1/,，其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至,；第七種：，其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為,，調(diào)ph至,；第八種：，其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為,，調(diào)ph至,。b、培養(yǎng)方法：從培養(yǎng)實(shí)例4所述培養(yǎng)基獲得長勢**的馬鈴薯幼苗,，在清水中緩苗2-3d后選取長勢一致的馬鈴薯幼苗,，如圖9-a所示，置于上述8種不同液體培養(yǎng)基8d,，每隔2d更新1次液體培養(yǎng)基,；于溫度22-23℃、濕度50-70％,、光照強(qiáng)度2000-3000lux,、光照和黑暗交替(光照時(shí)間14h、黑暗時(shí)間10h)條件下培養(yǎng),。無酚紅培養(yǎng)基避免了酚紅對細(xì)胞的潛在毒性作用,。

    一）、實(shí)驗(yàn)室種子培養(yǎng)基**方法1,、高壓蒸汽**鍋,、手提式**鍋。容量小。2,、立式或臥式**鍋,。容量較大，一般能裝幾十瓶或幾百瓶,。3,、**柜。要和蒸汽鍋爐配套,，用于大量種瓶培養(yǎng)基的**,，一次能裝幾百至幾千瓶(袋)。（二）,、培養(yǎng)基的分批**1,、定義：將配制好的培養(yǎng)基輸入發(fā)酵罐中，用蒸汽加熱,，使培養(yǎng)基和設(shè)備同時(shí)**的一種**方式,，又稱實(shí)罐**。2,、**過程過程包括升溫,、保溫和冷卻等三個(gè)階段，各階段對**的貢獻(xiàn)：20%,、75%,、5%。培養(yǎng)基的升溫可由兩種方式實(shí)現(xiàn)：間接加熱,，在夾套或蛇管中通入蒸汽加熱,；直接加熱，在培養(yǎng)基中直接通入熱蒸汽加熱,。**過程中加熱和保溫階段的**作用是主要的,，而冷卻階段的**作用是次要的，一般很小,，可以忽略不計(jì),。此外，還應(yīng)指出的是,，應(yīng)當(dāng)避免長時(shí)間的加熱階段,，因?yàn)榧訜釙r(shí)間過長，不僅破壞營養(yǎng)物質(zhì),，而且也有可能引起培養(yǎng)液中某些有害物質(zhì)的生成,，從而影響培養(yǎng)過程的順利進(jìn)行。在實(shí)際生產(chǎn)中,，也可能遇到所供蒸汽不足,、溫度不夠高的情況,，這時(shí)可以適當(dāng)延長**時(shí)間。生產(chǎn)上甚至有用100℃蒸煮而達(dá)到徹底**的實(shí)例,。如要做固體曲而沒有高溫蒸汽時(shí),，可將原料用100蒸汽蒸30min，殺死其中的營養(yǎng)細(xì)胞,，但孢子與**的芽孢沒有被殺死,。無血清培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的純凈性。山西MEM培養(yǎng)基牌子

減血清培養(yǎng)基提高了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的可靠性和重復(fù)性,。中國澳門MEM a培養(yǎng)基常見問題

    3)培養(yǎng)方法：將配制的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長,、寬、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中,，用移液槍吸取帶有無菌水的無菌種子,，吹打在無菌濾紙上，用無菌尖頭鑷子將種子均勻點(diǎn)播在培養(yǎng)基上,；于溫度22-24℃,、濕度50-70％、光照強(qiáng)度1500-2000lux,、光照和黑暗交替(光照時(shí)間16h,、黑暗時(shí)間8h)條件下培養(yǎng)。(4)1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％,，培養(yǎng)16d的幼苗,，表現(xiàn)為植株健壯，蓮座葉均已伸展,，葉色濃綠，根系發(fā)達(dá),、平均主根長為,。如圖1所示。對比培養(yǎng)例1：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例1,，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％,，培養(yǎng)16d的幼苗,，表現(xiàn)為植株健壯，蓮座葉部分伸展,，葉色濃綠,，根系發(fā)達(dá)、平均主根長為,。如圖1所示,。培養(yǎng)實(shí)例1和對比培養(yǎng)例1的培養(yǎng)結(jié)果比較：哥倫比亞型擬南芥在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％,；在相同條件下培養(yǎng)16d時(shí),，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳，主要表現(xiàn)為蓮座葉長勢更好,、根系更為發(fā)達(dá)。如圖1所示,。中國澳門MEM a培養(yǎng)基常見問題