1,、胰酶是,，就是說PBS,注意,，盡量不要用水來溶,，因為要保持滲透壓。2,、EDTA的工作液溶度是－,，根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度自己調(diào)整。EDTA并不是必須的,，容易消化的細(xì)胞可不加,。EDTA對細(xì)胞貼壁性有影響，因此使用時要甚重,。如果影響貼壁,，但消化時必須要用，那么在用完全培養(yǎng)基終止消化后,，可離心棄上清,，再加完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，可去除EDTA,。如果對貼壁沒影響,，那么可不離心。3,、EDTA的濃度也是質(zhì)量體積比。和胰酶一起溶于PBS,。4,、注意，血清可終止胰酶的作用,，但不能終止EDTA的作用,，對有些細(xì)胞來說，終止消化后的離心是必要的,。5,、胰酶和EDTA在pH為8左右的時候**易溶解，在配制時可先滴幾滴NaOH將pH調(diào)至8，注意,，胰酶可使溶液變酸,，所以要邊溶邊測pH，隨時調(diào)整,。注意,，不可加過量NaOH，否則過堿,，細(xì)胞會受不了,。6、胰酶EDTA相對比較難溶,，可用磁力攪拌器,，或放入4度冰箱過夜，待溶解后過濾**,。7,、可配2－3乘的胰酶，這樣比較節(jié)約時間和濾器,，用的時候?qū)ι?*PBS即可,。8、儲存液放在－20度冰箱凍存,，使用液放在4度,，用的時候不要放在27度水浴鍋溫浴，因為這樣會讓胰酶很快失效,，使用前放在室溫下一會,。胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點，通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞,。四川EDTA胰酶介紹

    (不含EDTA含酚紅)性質(zhì),、用途與生產(chǎn)工藝背景胰酶又名胰醇素、胰液素,。白色或淡黃色無定形粉末,。系從各種動物胰臟制取的混合物，主要是蛋白酶,、脂酶,、淀粉酶。溶于水呈微渾溶液,。不溶于醇,、醚。有引濕性,，遇酸,、堿及熱即喪失活力,，水溶液遇酸、熱,、重金屬或單寧酸時產(chǎn)生沉淀,。為助消化藥，用于缺乏胰液的***癥,。也用于皮革工業(yè)和紡織印染,，主要用于酶法脫毛。將絞碎的豬胰漿經(jīng)***,、提取,、沉淀、脫脂,、干燥,、粉碎而得。簡介(不含EDTA含酚紅)為細(xì)胞培養(yǎng)基,，1.不含EDTA含酚紅：含酚紅,，（1：250）溶于HBSS溶液，不含鈣鎂,。-20℃保存,。胰(不含EDTA含酚紅)含，不含EDTA和酚紅,，溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中,，經(jīng)過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化,，通常室溫消化2分鐘左右就消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞,。使用方法(不含EDTA含酚紅)使用說明---貼壁細(xì)胞Chemicalbook的消化：a)吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS,、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,，以去除殘余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液,，蓋過細(xì)胞即可,，室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時間有所不同,，對于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長消化時間,。c)顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮,，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化。 廣西重組胰酶進貨價0.25%胰酶細(xì)胞消化液(含有EDTA,，含酚紅)消化細(xì)胞時間不宜過長,。

    產(chǎn)品簡介產(chǎn)品簡介：產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱產(chǎn)品包裝產(chǎn)品價格C0201胰酶細(xì)胞消化液100ml碧云天生產(chǎn)的胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含,。該消化液經(jīng)過過濾**，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,，或者一些**的消化,。本胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點，通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞,。包裝清單：產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱包裝C0201胰酶細(xì)胞消化液100ml―說明書1份保存條件：4℃保存,，一年有效。注意事項：在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被**污染,。胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時間不宜過長,，否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差。為了您的安全和**,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。使用說明使用說明：1.貼壁細(xì)胞的消化：a)吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS,、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,，以去除殘余的血清。b)加入少量胰酶細(xì)胞消化液,，略蓋過細(xì)胞即可,，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時間有所不同,。c)顯微鏡下觀察,，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化,；或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,。此時吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,，吹打下細(xì)胞,，即可直接用于后續(xù)實驗。d)如果發(fā)現(xiàn)消化不足,。

細(xì)胞消化胰酶的配制對一般細(xì)胞0.25%胰酶(胰蛋白酶,，Trypsin)配方：100mlPBS,0.25g胰酶步驟：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸餾水)2稱胰酶0.25g3加入PBS中，低速攪拌〈4h冰浴中,或者4℃過夜低速攪拌0.5h冰浴中4調(diào)PH7.45仍在冰浴中6過濾,，分裝,，-20℃保存，4℃短期內(nèi)用完tip:低速很重要,，機械攪拌對酶是一種沖擊,，如果起沫，酶就變性了,。低溫,，防止酶失活對難消化的細(xì)胞：在上述配方中,，加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因為EDTA可以絡(luò)合Ca2+，增加消化效力胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的,。

品名：0.25%胰蛋白酶溶液,，1X分類：細(xì)胞消化試劑規(guī)格：100ML用途：消化試劑，如胰蛋白酶,，被用于將粘附細(xì)胞從其附著的表面或底物上分離和降解,，以及將組織進行游離，以開展原代細(xì)胞培養(yǎng),。產(chǎn)品包括2種常用濃度的γ照射豬胰蛋白酶（1：250）以及一種新型非哺乳動物豬胰蛋白酶替代品,，稱為ThermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一種蛋白水解酶和膠原水解酶的混合超濾溶液，可以快速消化,，同時不損傷細(xì)胞,。其非哺乳動物配方使它適用于無血清應(yīng)用，不需要失效或?qū)γ敢种苿?。此試劑可使?xì)胞被快速分離,，形成單細(xì)胞懸浮物，保持高細(xì)胞活力,，并使傳代時的變異減至**小,。胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。青海進口胰酶是什么

適用于貼壁細(xì)胞的消化傳代,；也可用于組織細(xì)胞分離的初步消化,。四川EDTA胰酶介紹

    ①制備粗酶液稱取定量粗胰酶，其胰蛋白酶活性為,，胰淀粉酶活性為,，胰脂肪酶活性為。將其用pH值為,、濃度為0．2mol/L的乙酸-乙酸鈉緩沖液溶解,，然后進行真空過濾，收集濾液并用磷酸緩沖液進行稀釋,，使胰蛋白酶活性為3-10U/mg,，備用。②制備反膠束將AOT置于100℃烘箱中干燥至恒重,，放入干燥器中冷卻至室溫,。然后稱取，加入10L異辛烷,，在攪拌下使其形成均勻的分散液,，再加入定量蒸餾水，在200r/min的轉(zhuǎn)速下處理2h,，獲得濃度為,。使用時用異辛烷稀釋10倍,。③萃取將稀釋10倍的AOT-異辛烷反膠束置于萃取器中，按照AOT異辛烷反膠束：粗酶溶液體積比為（2-3):1的比例加入粗酶溶液萃取3-4次,，，在300-400r/min的轉(zhuǎn)速下萃取5-10min,。如此每次萃取完成后,，均進行離心分離，離心機轉(zhuǎn)速為4000-6000r/min,，時間10-15min收集,、合并離心上層清液，進行反萃取,，下層萃余液用于制備胰脂肪酶,。④反萃取將荷載胰蛋白酶的AOT-異辛烷反膠束置于萃取器中，在攪拌下加入等體積的反萃取液進行反萃取15-20min萃取液為0．,。如此反萃取3次,，每次萃取完成后，均進行離心分離,，離心機轉(zhuǎn)速為4000-6000r/min,時間為15-20min,。分別收集、合并離心上層清液和下層反萃取液,，前者再生后可再次萃取胰蛋白酶,。 四川EDTA胰酶介紹