如何選用培養(yǎng)基?選擇培養(yǎng)基沒(méi)有一定標(biāo)準(zhǔn),有幾點(diǎn)建議可供參考:1.建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞優(yōu)先的培養(yǎng)基,??梢圆殚單墨I(xiàn),或在購(gòu)買(mǎi)細(xì)胞株時(shí)咨詢,。2.根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn),、實(shí)驗(yàn)的需要來(lái)選擇培養(yǎng)基。如小鼠細(xì)胞株多選1640,;進(jìn)行細(xì)胞雜交,、基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),可選擇IMDM,。3.用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞,,觀察其生長(zhǎng)狀態(tài),可以用生長(zhǎng)曲線,、集落形成率等指標(biāo)判斷,,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇比較好培養(yǎng)基,這是客觀的方法,,但比較繁瑣,。(AmericanTypeCultureCollection)收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開(kāi)ATCC網(wǎng)頁(yè)的Cellsandhybridomas鏈接,,輸入細(xì)胞名稱(chēng)就可以搜索ATCC的細(xì)胞數(shù)據(jù)庫(kù),。數(shù)據(jù)庫(kù)中有每一種細(xì)胞的詳細(xì)描述,包括細(xì)胞的來(lái)源,,培養(yǎng)和凍存條件,,以及相關(guān)文獻(xiàn)等資料。 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的制作方法難嗎,?上海中喬新舟告訴您,。天津子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基購(gòu)買(mǎi)
細(xì)胞培養(yǎng)基的類(lèi)型動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)可以使用的培養(yǎng)基或人工/合成的培養(yǎng)基混合一些天然產(chǎn)物,。天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基只由天然生成的生物液體組成。天然培養(yǎng)基非常有用和方便,,適用于多種不同的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),。但是,由于缺乏對(duì)這些天然培養(yǎng)基確切成分的認(rèn)識(shí),,使用天然培養(yǎng)基的主要缺點(diǎn)是可重復(fù)性差,。人工培養(yǎng)基通過(guò)人為地加入一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(有機(jī)的和無(wú)機(jī)的)、維生素,、鹽,、O2和CO2氣體、血清蛋白,、碳水化合物,、輔因子,制備成人工或合成的培養(yǎng)基[1],。不同的人工培養(yǎng)基被分別設(shè)計(jì)用于下面的某個(gè)用途:1)及時(shí)生存(平衡的鹽溶液,,有特定的pH和滲透壓)2)長(zhǎng)時(shí)間生存(平衡鹽溶液輔以各種配方的有機(jī)化合物和/或血清)3)不確定生長(zhǎng)4)特定功能。 天津子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基購(gòu)買(mǎi)上海中喬新舟 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基誠(chéng)信經(jīng)營(yíng),。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟,!
L15細(xì)胞培養(yǎng)基L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株,。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,,氨基酸組成進(jìn)一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖,。至于選擇何種培養(yǎng)基并沒(méi)有一定的標(biāo)準(zhǔn),,有幾點(diǎn)建議可供參考:(1)建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞優(yōu)先的培養(yǎng)基??梢圆殚唴⒖嘉墨I(xiàn),,或在購(gòu)買(mǎi)細(xì)胞株時(shí)咨詢。也可以在一些生物公司的網(wǎng)站上搜索,,如Invitrogen網(wǎng)站上有一個(gè)CellLineDatabase的工具,,選擇你感興趣的細(xì)胞類(lèi)型,它就會(huì)彈出推薦的培養(yǎng)基,、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,,有時(shí)還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟,很方便,。(2)其它實(shí)驗(yàn)室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,,許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞。(3)根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來(lái)選擇培養(yǎng)基,。如小鼠細(xì)胞株多選RPMI1640,。(4)用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞,觀察其生長(zhǎng)狀態(tài),,可以用生長(zhǎng)曲線,、集落形成率等指標(biāo)判斷,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇比較好培養(yǎng)基,,這是客觀的方法,,但比較繁瑣。
pH氣體也是細(xì)胞生存的必需條件之一,,所需氣體豐要是氧和二氧化碳,。氧參與三羧酸循環(huán),產(chǎn)生能量供給細(xì)胞生長(zhǎng),、增殖和合成各種成分,。一些細(xì)胞在缺氧情況下,借糖酵解也可獲取能量,,但多數(shù)細(xì)胞缺氧不能生存,。在開(kāi)放培養(yǎng)時(shí),一般置細(xì)胞于95%空氣加5%二氧化碳的混合氣體環(huán)境中培養(yǎng),。二氧化碳既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物,,也是細(xì)胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)基的pH有直接關(guān)系,。動(dòng)物細(xì)胞大多數(shù)需要輕微的堿性條件,pH值約在7.2~7.4℃在細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中,,隨細(xì)胞數(shù)量的增多和代謝活動(dòng)的加強(qiáng),,二氧化碳不斷被釋放,培養(yǎng)液變酸,,PH值發(fā)生變化,。由于NaHCO3容易分解為二氧化碳,很不穩(wěn)定,,致使緩沖系統(tǒng)難以精確地控制,。故這一緩沖系統(tǒng)適合密閉培養(yǎng)。HEPES結(jié)合碳酸氫鈉使用,,可提供更有效的緩沖體系,,主要是防止pH值迅速變動(dòng),但比較大缺點(diǎn)是在開(kāi)放培養(yǎng)或觀察時(shí)難以維持正常的pH值,。造成pH波動(dòng)主要是代謝產(chǎn)生的CO2,,在封閉式培養(yǎng)過(guò)程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生碳酸,培養(yǎng)基pH很快下降,。為解決這一問(wèn)題,,合成培養(yǎng)基中使用了NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng),,并采用開(kāi)放培養(yǎng),使細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2及時(shí)溢出培養(yǎng)瓶,,再通過(guò)穩(wěn)定調(diào)節(jié)溫箱中CO2濃度(5%),,與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài)。 上海中喬新舟告訴您 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇方法,。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟,!
體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中,因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分,、促生長(zhǎng)因子,、、滲透壓,、pH等諸多方面的要求,。一、營(yíng)養(yǎng)成分維持細(xì)胞生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)條件一般包括以下幾個(gè)方面:1,、氨基酸:是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的原料,。所有細(xì)胞都需要12種必須氨基酸:纈氨酸、亮,、異亮,、蘇、賴,、色,、苯丙、蛋,、組,、酪、精氨酸,、胱氨酸,。此外還需要谷氨酰胺,它在細(xì)胞代謝過(guò)程中有重要作用,,所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來(lái)源,,同樣也是合成三、二,、一磷酸酰苷所需要的基本物質(zhì),。體外培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基內(nèi)都含有必需氨基酸。2,、單糖:培養(yǎng)中的細(xì)胞可以進(jìn)行有氧與無(wú)氧酵解,,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪,、核酸的原料,。細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收能力比較高,半乳糖比較低,。體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),,幾乎所有的培養(yǎng)基或培養(yǎng)液中都以葡萄糖作為必含的能源物質(zhì)。3,、維生素:主要扮演輔酶,、輔基的角色,必不可少,。生物素,、葉酸、煙酰胺,、泛酸,、吡哆醇、核黃素,、硫胺素,、維生素B12都是培養(yǎng)基常有的成分。4,、無(wú)機(jī)離子與微量元素:細(xì)胞生長(zhǎng)除需要鈉,、鉀、鈣,、鎂,、氮和磷等基本元素,還需要微量元素,,如鐵,、鋅、硒,、銅、錳,、鉬,、釩等。 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基如何選擇,?上海中喬新舟告訴您,。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟!天津子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基購(gòu)買(mǎi)
上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的定制規(guī)格,。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟,!天津子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基購(gòu)買(mǎi)
含血清細(xì)胞培養(yǎng)液的粘滯性主要是由血清引起的,在轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)貼壁細(xì)胞時(shí),培養(yǎng)液的粘滯性對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)沒(méi)有多大影響,;但在生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),,細(xì)胞培養(yǎng)液的粘滯性則直接影響攪拌轉(zhuǎn)速控制及攪拌剪切力對(duì)細(xì)胞造成的損傷程度。表面張力對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有較大的作用,,尤其在利用生物反應(yīng)器進(jìn)行懸浮培養(yǎng)時(shí),,攪拌和通氣都會(huì)引起泡沫的產(chǎn)生。對(duì)于含血清培養(yǎng)液,,由于血清中多種蛋白的存在,,攪拌時(shí)產(chǎn)生的氣泡較多,氣泡的上升運(yùn)動(dòng)對(duì)細(xì)胞的損傷程度還有爭(zhēng)議,,但氣泡的破裂對(duì)細(xì)胞有明顯的損傷作用,。為降低這種損傷,可通過(guò)在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加一些保護(hù)劑,,降低細(xì)胞-氣體和細(xì)胞-液體的表面張力,,減少氣泡的形成。天津子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基購(gòu)買(mǎi)
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1,、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞,。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清,、無(wú)血清,、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清,、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒,、細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒,、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等,。
4、細(xì)胞系(株):種類(lèi)豐富(1000余種),,已通過(guò)STR鑒定,;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5,、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒,、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品,。
6,、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記,、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,,細(xì)菌基因敲除,、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除,、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn),。