肝臟是人體“的”代謝,與,、,、糖尿病等代謝性疾病密切相關(guān)。肝細(xì)胞在肝臟參與的各種代謝過程中發(fā)揮了主要作用,。肝細(xì)胞是實(shí)質(zhì)細(xì)胞,,在肝臟中的比例多;此外實(shí)質(zhì)細(xì)胞還包括少量的膽管內(nèi)皮細(xì)胞,。而非實(shí)質(zhì)細(xì)胞則包括星狀細(xì)胞,,巨噬細(xì)胞,NK細(xì)胞,,成纖維細(xì)胞等,,只占整個(gè)肝臟細(xì)胞的20%左右。原代肝細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn):①原代肝細(xì)胞由于離體時(shí)間短,,因此其能夠保持在體內(nèi)的生物學(xué)特性,,是更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型。②原代肝細(xì)胞能夠避免體內(nèi)實(shí)驗(yàn)時(shí)肝臟其他細(xì)胞對(duì)肝細(xì)胞的影響,從而得出更加準(zhǔn)確的研究結(jié)果,。③原代細(xì)胞相比體內(nèi)實(shí)驗(yàn)具有更好的可控性,。 原代肝細(xì)胞去哪找?上海中喬新舟告訴您,。江蘇原代肝細(xì)胞可以存活多久
結(jié)合國(guó)內(nèi)外小鼠原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)的方法并加以改良,,成功獲得了產(chǎn)量高、活率高,、純度高的原代肝細(xì)胞,,在此基礎(chǔ)上采用不同濃度的FFA混合物(油酸∶棕櫚酸=2∶1)誘導(dǎo)貼壁的原代肝細(xì)胞,成功構(gòu)建了肝脂肪變性細(xì)胞模型,,并且能夠很好地模擬體內(nèi)肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞脂質(zhì)累積的現(xiàn)象,。由于肝脂肪變性細(xì)胞模型還存在一定的局限性,如不能充分模擬肝臟局部微環(huán)境對(duì)NAFLD發(fā)病過程的影響,,因此還需將細(xì)胞模型與動(dòng)物模型相互聯(lián)系起來,,使兩種模型相互補(bǔ)充,取長(zhǎng)補(bǔ)短,,為進(jìn)一步研究NAFLD的發(fā)病機(jī)制及藥物治療奠定基礎(chǔ),。甘肅雞胚原代肝細(xì)胞中喬新舟原代肝細(xì)胞的價(jià)格分析。歡迎來電咨詢上海中喬新舟,!
細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究常用的手段之一,,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或的一部分進(jìn)行培養(yǎng),,也稱初代培養(yǎng),。嚴(yán)格地說即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到次傳代階段,但實(shí)際上,,通常把代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),。一般持續(xù)1-4周。此期細(xì)胞呈活躍的移動(dòng),,可見細(xì)胞分裂,,但不旺盛。原代培養(yǎng)細(xì)胞與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上相似性大,。由于培養(yǎng)的細(xì)胞剛剛從組織分離出來,,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng),、代謝,、繁殖提供有力的手段。同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件,。原代培養(yǎng)的過程指動(dòng)物的組織或從機(jī)體取出后,,經(jīng)機(jī)械法或各種酶類(常用胰蛋白酶)和鰲合劑(常用EDTA)處理,使之分散成單個(gè)細(xì)胞,,加入適量培養(yǎng)基,,置于合適的培養(yǎng)容器中,在無菌,、適當(dāng)溫度和一定條件下,,使之生存、生長(zhǎng)和繁殖的過程,。
原代肝細(xì)胞分離試劑盒說明書實(shí)驗(yàn)方案參考一,、設(shè)備和試劑準(zhǔn)備(一)儀器設(shè)備(組織塊)超凈工作臺(tái)或者生物安全柜、水浴鍋,、一次性100mm培養(yǎng)皿1個(gè),、滅菌剪刀和鑷子若干、滅菌100mL搖瓶,、電動(dòng)移液器,、一次性15/50mL離心管若干、一次性50mL注射器及μm過濾器若干,、100mL無菌試劑瓶,、離心機(jī)、一次性5ml巴氏吸管,、75%酒精及其噴壺,、、碎冰,、泡沫盒,。(二)儀器設(shè)備(實(shí)體消化)超凈工作臺(tái)或者生物安全柜、水浴鍋,、蠕動(dòng)泵(LongerPump,,YZ1515X)、手推式電動(dòng)廢液缸,、一次性100mm培養(yǎng)皿1個(gè),、乳膠管(滅菌、長(zhǎng)度168cm,,規(guī)格充滿14ml液體),、滅菌剪刀和鑷子若干、滅菌動(dòng)脈夾,、滅菌止血鉗,、一次性輸液針(黑色*25)、電動(dòng)移液器,、一次性15/50mL離心管若干,、一次性50mL注射器及μm過濾器若干、100mL無菌試劑瓶、離心機(jī),、泡沫板,、廢液托盤、固定針頭,、一次性5ml巴氏吸管,、75%酒精及其噴壺、,、碎冰,、泡沫盒、新鮮配置6%的戊巴比妥鈉,。 原代肝細(xì)胞怎么選,?上海中喬新舟告訴您。
藥物性肝損傷(DILI)是臨床常見的肝損傷類型,,是嚴(yán)重的藥物不良反應(yīng)之一,。細(xì)胞死亡是DILI的重要特征,藥物可通過誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和死亡受體等方式凋亡通路,,誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡或壞死,,誘發(fā)肝損傷。除凋亡和壞死外,,DILI過程中還伴隨著自噬,、焦亡和鐵死亡。自噬可以去除受損的蛋白質(zhì)以及細(xì)胞器,,是肝細(xì)胞存活的重要機(jī)制,,但也可能誘導(dǎo)肝細(xì)胞死亡。焦亡和鐵死亡是近發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞死亡方式,,其在DILI中的作用尚未完全闡明,。阻斷肝細(xì)胞死亡通路,是DILI的重要手段,。水飛薊素,、柚皮素、人參皂苷等可以抑制肝細(xì)胞死亡通路,,是DILI的潛在藥,。針對(duì)不同細(xì)胞死亡方式的機(jī)制和特點(diǎn),研究改善肝細(xì)胞死亡的藥物對(duì)DILI具有重要意義,??偨Y(jié)了DILI中肝細(xì)胞死亡的機(jī)制,并論述了潛在的藥物,。 原代肝細(xì)胞的應(yīng)用范圍十分廣闊,。歡迎來電咨詢上海中喬新舟,!江蘇原代肝細(xì)胞可以存活多久
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原代培養(yǎng):1.取出小鼠后瀝干酒精,,放入超凈臺(tái)內(nèi),固定在泡沫板上,。2.用鑷子提起皮膚,,用解剖剪剪開皮膚一個(gè)橫切口,,將皮膚向上撕開,,然后剪開肌肉等,暴露出腹腔,,在左側(cè)找到脾臟,,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無菌培養(yǎng)皿中,。3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,,并剔除多余無用的組織。4.將篩網(wǎng)置于平皿中,,脾臟置于篩網(wǎng)上,,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨,,同時(shí)不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗,。5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),,吸去上清(去除血液等),。6.加入10ml培養(yǎng)液,吹打混勻,,取樣計(jì)數(shù),。7.將稀釋好的細(xì)胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中,輕輕搖晃混勻,,在培養(yǎng)瓶上,。面做好標(biāo)志,注明細(xì)胞,、組別及日期,。然后將培養(yǎng)瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 江蘇原代肝細(xì)胞可以存活多久
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1,、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞,。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清,、無血清,、無異源蛋白無動(dòng)物成分培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清,、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒,、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、ELISA試劑盒,、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等,。
4,、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定,;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基,。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒,、端粒酶檢測(cè)試劑盒,、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6,、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記,、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,,細(xì)菌基因敲除,、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除,、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn),。