超微量分光光度計比色法測定蛋白質(zhì)濃度:
蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物,比色法測定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分:氨基酸(如酪氨酸,,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應(yīng),,產(chǎn)生有色物質(zhì),。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān),,從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度,。
比色方法一般有BCA,,Bradford,,Lowry等幾種方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反應(yīng)為基礎(chǔ),,并有所改進,。蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng),產(chǎn)生藍色的反應(yīng)物,。但是與Biuret相比,,Lowry法敏感性更高。缺點是需要順序加入幾種不同的反應(yīng)試劑;反應(yīng)需要的時間較長;容易受到非蛋白物質(zhì)的影響;含EDTA,,Tritonx-100等物質(zhì)的蛋白不適合此種方法,。
Bradford法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng)。河北全光譜波長超微量分光光度計價格優(yōu)惠
光譜儀和分光光度計有什么區(qū)別,?
使用光譜進行定性分析的儀器叫做光譜儀,。 使用分光棱鏡或者光柵產(chǎn)生光譜,并利用其中特定的某個或某段光譜線強度來進行定量分析的儀器叫做分光光度計,。這兩種叫法基本沒差別,,光譜儀都是要有分光組件的,比如ICP-AES, AAS,。 但是歷史上因為中國上海精密儀器廠首先將紫外可見分光光度計進行了國產(chǎn)化,,當時的技術(shù)難點也就在分光技術(shù)上。老一代的分析員都是把紫外可見分光光度計直接稱作分光光度計,,所以分光光度計也特指紫外可見分光光度計,。而熒光光譜儀、核磁共振光譜儀,、掃描隧道光譜儀其實也是要有分光組件的,,現(xiàn)在都是用光譜儀這個名詞來統(tǒng)稱了,,因此光譜儀的概念比分光光度計范圍要大一些,新一些,。而分光光度計更集中在定量分析方面的稱呼,,有人把AES、AAS也稱作分光光度計因為它們在一般性的分析工作中也主要是用來定量的,,這就造成了“分光光度計”和“光譜儀”兩種叫法的混亂,。
海南操作簡便超微量分光光度計分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進行定性或定量分析,。
超微量分光光度計比色法測定蛋白質(zhì)濃度:
BCA法:這是一種較新的,、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應(yīng)產(chǎn)生Cu+,,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,,吸收峰在562nm波長,。此化合物與蛋白濃度的線性關(guān)系極強,反應(yīng)后形成的化合物非常穩(wěn)定,。相對于Lowry法,,操作簡單,敏感度高,。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質(zhì)之間以及去污劑的干擾,。
Bradford法:這種方法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng),產(chǎn)生的有色化合物吸收峰595nm,。其比較大的特點是,,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍,;操作更簡單,,速度更快;只需要一種反應(yīng)試劑,;化合物可以穩(wěn)定1小時,,方便結(jié)果;而且與一系列干擾Lowry,,BCA反應(yīng)的還原劑(如DTT,,巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的,。**主要的缺點是不同的標準品會導致同一樣品的結(jié)果差異較大,,無可比性。
超微量分光光度計與傳統(tǒng)分光光度計相比,,前者具備的獨特優(yōu)點在于(二):
(4)氙氣閃光燈為燈源,,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見),,使用壽命更長;
(5)不需要預(yù)熱,,可隨時檢測,,檢測時間短【BIO-DL MicroDrop<5秒】;
(6)顯示吸光度值的同時,,程序直接給出濃度值(核酸,、蛋白和熒光染料);
(7)占據(jù)實驗室空間體積比傳統(tǒng)分光光度計小很多【BIO-DL MicroDrop重量:2.1kg】,。
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物質(zhì)對光的選擇性吸收波長,,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù),。
分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進行定性或定量分析,。常用的波長范圍為:(1)200~380nm的紫外光區(qū),,(2)380~780nm的可見光區(qū),(3)2.5~25μm(按波數(shù)計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū),。所用儀器為紫外分光光度計,、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計,。為保證測量的精密度和準確度,,所有儀器應(yīng)按照國家計量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定,定期進行校正檢定,。熒光分光光度計的光源和檢測器是成直角分布的,,而紫外可見分光光度計是成一條直線的。廣東全光譜波長超微量分光光度計菌液檢測
熒光分光光度計和紫外可見分光光度計是實驗室常用的光學儀器,。河北全光譜波長超微量分光光度計價格優(yōu)惠
使用Micro Drop可以方便地使用微量樣品進行紫外-可見分光檢測:
1. 不用稀釋就可以檢測濃度小于15000ng/μl(dsDNA)的核酸濃度,;
2. 普通的紫外-可見分光光度檢測;
3. 純蛋白濃度檢測(A280),;
4. 微陣列和Protein & Labels應(yīng)用中的熒光染料基團檢測,;
5. BCA蛋白定量分析;
6. Bradford蛋白定量分析,;
7. Lowry法蛋白定量分析,;
8. Pierce 660nm蛋白定量分析;
9. 微生物細胞培養(yǎng)檢測,。
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上海寶予德科學儀器有限公司致力于醫(yī)藥健康,以科技創(chuàng)新實現(xiàn)高質(zhì)量管理的追求,。寶予德作為醫(yī)藥健康的企業(yè)之一,,為客戶提供良好的移液器,吸頭,,酶標儀,,分光光度計。寶予德繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,,既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長,,又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破,。寶予德始終關(guān)注醫(yī)藥健康行業(yè),。滿足市場需求,提高產(chǎn)品價值,,是我們前行的力量,。