寶予德超微量分光光度計使用時注意小貼士:
(1)測量前將樣品中度混勻(可采用震蕩器或用手指彈震管底)
(2)移液器吸頭插入液面下吸取樣品,可避免吸入氣泡;TIP頭貼著下光纖表面打出樣品,,且只按到移液器***擋盡頭,,第二擋不要按,可以避免吹出氣泡到樣品中,。
(3)每次測量完畢后,用蒸餾水清潔上下光纖端面,這樣可以更好地保證下一次測量的準確性(主要針對超高濃度樣品,,一般樣品無此要求)。
(4)每次做空白檢測前一定要先用水清潔上下光纖表面,,可保證空白檢測準確,。
(5)每次測量的核酸樣品量建議為1-2微升,蛋白樣品建議2微升。 過少可能無法形成水柱,,過多可能溢出,。
(6)加樣后盡快測量,以防蒸發(fā)濃縮以及灰塵落入,,已加樣品不能多次檢測,,如需重測需重新滴加同一樣品,。
(7)儀器避免陽光直射,避免強風吹拂,,以避免蒸發(fā),。
(8)連續(xù)測量一段時間后擦凈樣品,用水清潔上下光纖表面,,然后用水或緩沖液進行重新空白后再檢測,。
(9)清潔光纖端面(上樣基座)時必須用潔凈質(zhì)軟的實驗室用紙(擦鏡紙等)進行輕輕擦拭。
測試在紫外區(qū)有吸收的樣品時用石英比色皿,。天津全光譜波長超微量分光光度計探針檢測
Micro Drop蛋白質(zhì)檢測功能:
Protein BCA檢測類型:
BCA是一種通過比色來檢測非純蛋白的濃度的方法,,它通常用于稀釋的蛋白濃度檢測,以及那些在紫外區(qū)域含有吸收光雜質(zhì)的蛋白的濃度檢測,。BCA法需要在蛋白定量前構建一個標準曲線,。
BCA法是檢測Cu+1離子的方法,在堿性環(huán)境下,,Cu+2離子會被蛋白還原為Cu+1離子,。兩個聯(lián)喹啉二羧酸BCA分子和一個Cu+1離子會形成紫色的螯合物。在有蛋白存在的情況下,,以750nm波長的吸光值為基線,,Cu-BCA形成的螯合物在562nm處有比較大吸光值。
常規(guī)檢測使用試劑/蛋白樣品的體積比為20:1,,檢測濃度范圍為0.20mg/ml到8.0mg/ml(BSA),。當使用基座檢測時,推薦使用4μl樣品和80μlBCA試劑,。
微量檢測使用試劑/樣品的體積比為1:1,,可以檢測蛋白濃度范圍從0.01mg/ml至0.20mg/ml。要準備足夠的樣品來做基座檢測,,建議使用10μl樣品和10μlBCA試劑(使用PCR管),。
按照試劑盒生產(chǎn)廠家的說明來準備標準品和構建標準曲線。確保在所有檢測過程中,,每個樣品的處理時間及環(huán)境溫度一致,。
山東超微量分光光度計試用MicroDrop可連接電腦/平板電腦,實現(xiàn)本地一指控制;WiFi無線連接功能,,節(jié)省時間和空間,。
分光光度計是一類很重要的分析儀器 ,無論在物理學、化學,、生物學,、醫(yī)學、材料學,、環(huán)境科學等科學研究領域 ,還是在化工,、醫(yī)藥、環(huán)境檢測,、冶金等現(xiàn)***產(chǎn)與管理部門 ,紫外可見分光光度計督有***而重要的應用,。分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量,。
由于核酸,,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量樣本量很小,于是超微量分光光度計應運而生,。超微量分光光度計近年來已經(jīng)替換普通的分光光度計成為分子生物學實驗室的新寵,,廣泛應用于生命科學實驗室蛋白質(zhì)組學和基因組學等領域。
超微量分光光度計已成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器,。常用于核酸,,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
測試在紫外區(qū)有吸收的樣品時用石英比色皿,,測試只在可見光區(qū)有吸收的樣品時使用玻璃比色皿,。石英比色皿在可見和紫外光區(qū)沒有吸收,而玻璃比色皿在紫外區(qū)有吸收,,所以不能用于紫外光區(qū),。對于一般的非光學專業(yè)人員,用眼睛是不能分開的兩種比色皿的,。但是兩者硬度差別很大很大,。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(***值)幾十倍,如果把兩個對磨,,石英比色皿將很少被磨損,,而玻璃比色皿磨損非常大。由于石英比色皿的透光范圍從0.12-4.5微米,,***的譜段范圍內(nèi)沒有任何吸收峰,。而玻璃比色皿只有0.4-4微米,且有許多離子吸收峰,。所以,,石英比色皿要比玻璃比色皿優(yōu)越的多,化驗數(shù)據(jù)更準確,、更可靠,。
BCA法的原理是蛋白在堿性溶液里與Cu2+形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長,。
Micro Drop蛋白質(zhì)檢測功能:
Protein & Labels檢測類型:
Protein & Labels可以用來檢測蛋白的濃度(A280nm)和熒光染料的濃度(蛋白芯片標記物),。它還可通過吸光值的比值來檢測金屬蛋白(如血色素)的純度。
Micro Drop能夠準確檢測100pmol/μl的熒光染料和20mg/ml的蛋白(BSA)而不用稀釋,。
1. 在功能鍵中選擇蛋白質(zhì),,在檢測方式中選擇Protein & Labels。
2. 輸入樣品編號,。
3. 從樣品下拉框中選擇檢測樣品的類型,,默認的設定為1 Abs=1mg/ml,。
4. 選擇濃度單位,默認的單位是mg/ml,。
5. 使用下拉菜單來選擇染料,默認的染料1為Cy3,,染料2為Cy5,。
6. 可以選擇基線校正,默認的校準波長為340nm,,也可以重新輸入一個校準波長,。
7. 選擇疊加顯示可以在采樣曲線框中顯示多個檢測樣品的實驗結果。
8. 用干凈的無塵紙擦干凈上下基座,,使用合適的液體建立空白對照,,空白對照液體能夠溶解目標溶液??瞻讓φ找后w的pH值和離子濃度應和檢測樣品一樣,。
核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率較高的功能。北京高靈敏度超微量分光光度計紫外檢測
不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源,。天津全光譜波長超微量分光光度計探針檢測
朗伯一比爾(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依據(jù)的基本原理,。當一束單色光(指路由一種顏色的光)通過一均勻的溶液時,一部分被吸收,,一部分透過,。
朗伯比爾定律:A = abc
其意義為:當一束單色光通過一均勻溶液時,溶液對單色光的吸光度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比,。
A =abc 中,,吸光系數(shù)a,表征吸光物質(zhì)的 靈敏度,。a值越大,,靈敏度越高。如果濃度的單位為物質(zhì)的量濃度(單位為:mol/L),,則吸光系數(shù)a可以寫成ε ,,ε稱為摩爾吸光系數(shù)。
由上式可知,,當溶液層厚度b和吸光系數(shù)a固定時,,吸光度A與溶液的濃度成線性關系。在定量分析時,,首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況(吸收光譜),,從中確定比較大吸收波長 ,然后以此波長 的光為光源(單色光),,進行吸光度A的測定,,這是朗伯比爾定律用于定量分析的首要條件,。
天津全光譜波長超微量分光光度計探針檢測
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