一般酶標(biāo)儀的測(cè)定波長(zhǎng)在400~750nm或800nm之間,,完全可以滿足ELISA的顯色測(cè)定。目前國(guó)內(nèi)常見(jiàn)的ELISA試劑盒所使用的標(biāo)記用酶均為辣根過(guò)氧化物酶(HRP),,底物通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD),,其在過(guò)氧化氫溶液的存在下,經(jīng)HRP作用,,分別氧化為2,,2,—二氨基偶氮苯(DAB)和聯(lián)苯醌,。當(dāng)pH值為5.0左右時(shí),,DAB在450nm波長(zhǎng)處有比較大吸收,當(dāng)pH值降為L(zhǎng) 0時(shí),,比較大吸收波長(zhǎng)移至492 nm,,同時(shí)摩爾消光系數(shù)變大,顯色加深,,因而常用強(qiáng)酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng),。酶標(biāo)儀是對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)(EIA)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。湖南酶標(biāo)儀
酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下,,檢測(cè)被測(cè)物的吸光值大小,。隨著檢測(cè)方式的不斷發(fā)展,擁有多種檢測(cè)模式的單體臺(tái)式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀,,可檢測(cè)吸光度(Abs),、熒光強(qiáng)度(FI)、時(shí)間分辨熒光(TRF),、熒光偏振(FP),、和化學(xué)發(fā)光(Lum)。酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀,。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長(zhǎng)范圍內(nèi)的任意波長(zhǎng),,而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的濾光片,只能截取特定波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè),??蓮V泛應(yīng)用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量(A280/BCA/Braford/Lowry),,酶活,、酶動(dòng)力學(xué)檢測(cè),,酶聯(lián)免疫測(cè)定(ELISAs),細(xì)胞增殖與毒性分析,,細(xì)胞凋亡檢測(cè)(MTT),,報(bào)告基因檢測(cè)及G蛋白偶聯(lián)受體分析(GPCR)等。酶標(biāo)儀常用波長(zhǎng)為:405nm,,450nm,,490nm與630nm。
酶標(biāo)儀比較廣地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn),、生物學(xué)研究,、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,。湖南酶標(biāo)儀
酶標(biāo)儀在血液檢驗(yàn)上的應(yīng)用:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的測(cè)定,,是對(duì)獻(xiàn)血者不可缺少的篩查項(xiàng)目之一。方法上有速率法和賴氏法等,。若采用賴氏試管法,,費(fèi)工、費(fèi)時(shí),,不但從方法上得不到統(tǒng)一,,而且不利于計(jì)算機(jī)對(duì)原始數(shù)據(jù)的網(wǎng)絡(luò)化管理。若采用微板酶標(biāo)儀定量(U/L)方法,,利用酶標(biāo)儀與計(jì)算機(jī)接口,,聯(lián)接血站局域網(wǎng)絡(luò),這就同其他酶法檢測(cè)項(xiàng)目一樣,,實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)室原始數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)管理[3],。采用試管法檢測(cè)Rh血型,操作繁鎖,,肉眼判讀結(jié)果缺乏客觀性,。故將平底微板法與酶標(biāo)儀掃描,電腦自動(dòng)判讀打印技術(shù)相結(jié)合,,用TCEAN全自動(dòng)加樣分析系統(tǒng)完成,。經(jīng)常規(guī)13032份標(biāo)本的檢測(cè),符合率達(dá)100%[4],。利用酶標(biāo)儀法檢測(cè)Rh血型具有較好的重復(fù)性,、準(zhǔn)確性,操作簡(jiǎn)便快速,、判讀結(jié)果客觀可靠,,也易于原始結(jié)果的保存,提高自動(dòng)化程度,能的篩選獻(xiàn)血者,,有利于實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)化管理,,也有利于血站稀有血型庫(kù)的建立。湖南酶標(biāo)儀
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