牛凝血酶（Bovine Thrombin）,，作為一種高特異性的絲氨酸蛋白水解酶,，具有重要的生物學(xué)功能的科研應(yīng)用。本文綜述了牛凝血酶的分子特性,、生物學(xué)作用及其在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用,。引言凝血酶是血液凝固過程中的關(guān)鍵酶,，負責(zé)將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，從而促進血栓形成,。牛凝血酶因其高比活度（>2000 IU/mg）和高純度，在生物醫(yī)學(xué)研究中用作工具酶,。材料與方法產(chǎn)品來源與純化：牛凝血酶從牛血漿中提取,，并通過一系列生物技術(shù)手段進行純化?；钚詼y定：利用特定的底物或熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）底物測定凝血酶活性,。應(yīng)用研究：通過體外實驗和體內(nèi)模型，研究牛凝血酶在血液學(xué),、分子生物學(xué)和藥物開發(fā)中的應(yīng)用,。結(jié)果分子特性：牛凝血酶由兩條肽鏈組成，分子量約為37 KD,，具有高度的專一性和高效的催化能力,。生物學(xué)作用：牛凝血酶能夠催化纖維蛋白原水解釋放A肽和B肽，形成纖維蛋白單體,，參與血液凝固和傷口愈合,。科研應(yīng)用：牛凝血酶在重組蛋白的特異性斷裂,、基因工程產(chǎn)品開發(fā),、以及作為診斷學(xué)中的凝血化驗工具等方面展現(xiàn)出重要價值。在某些疾病中,，特定蛋白質(zhì)的泛素化水平可能發(fā)生變化,，因此，泛素化蛋白質(zhì)可以作為疾病的生物標(biāo)志物,。Recombinant Human CD72 Protein,His Tag

基因工程與抗體技術(shù)通過基因工程方法,，可以構(gòu)建重組3C蛋白酶，并利用其切割特異性進行活性驗證,。此外,，通過動物實驗獲得3C蛋白酶抗體，可以探索利用抗體技術(shù)抑制3C蛋白酶活性,，進而達到抑制病毒復(fù)制的目的4,。研究進展與挑戰(zhàn)3C蛋白酶及其抑制劑的研究進展迅速，但仍面臨挑戰(zhàn),。例如,，需要深入了解不同耐藥突變對3CLpro自身活性的影響，以及不同抑制劑之間的交叉耐藥風(fēng)險,。這些研究對于開發(fā)新的廣譜抗病毒藥物具有重要意義38,。結(jié)論3C蛋白酶是一類在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶，是抗病毒藥物開發(fā)的重要靶點。深入研究3C蛋白酶的結(jié)構(gòu),、功能以及耐藥機制,，對于開發(fā)有效的抗病毒藥物和方法具有重要意義。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進步,，3C蛋白酶的研究將為人類戰(zhàn)勝病毒性疾病提供更多的科學(xué)依據(jù)策略,。Recombinant Human MSPR/RonProtein,His Tag全長跨膜蛋白是一類特殊的蛋白質(zhì)，它們嵌入在細胞膜的磷脂雙分子層中,，實現(xiàn)細胞內(nèi)外的跨越,。

3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非結(jié)構(gòu)蛋白的關(guān)鍵酶，在病毒復(fù)制過程中發(fā)揮著重要作用,。鼻病毒屬于小RNA病毒科,，其中的人鼻病毒3C蛋白酶基因編碼區(qū)全長552bp，編碼的蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量約為22000Da,。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特異性,，能特異切割位于Gln-Gly之間的肽鍵，識別位點為Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro,。本公司將人鼻病毒3C蛋白酶的編碼區(qū)基因,，在大腸桿菌中進行重組表達，純化后獲得了高純度的重組3C蛋白酶,，該蛋白酶能特異切割含有3C酶切位點的融合蛋白,，具有良好的生物學(xué)活性。同時,，本公司生產(chǎn)的3C蛋白酶帶有GST和MAT標(biāo)簽蛋白,，有利于后期將其從酶切體系中去除。產(chǎn)品性質(zhì):中文別名（Chinesesynonym）:3C蛋白酶英文別名（Englishsynonym）:3CProtease來源（Source）:大腸桿菌表達標(biāo)簽（label）:GST-3CProtease-MAT純度（Purity）:經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,，純度>95%分子量（Molecularweight）:47.38kDa比活性（Specificactivity）:500U/ml緩沖液組分（Buffer）:50mMTris-HCl,，150mMNaCl，1mMEDTA,，1mMDTT,，pH7.0酶活定義（UnitDefinition）:在緩沖液中切割100μg被檢測的融合蛋白，反應(yīng)條件為4℃16小時,切割率≥90%運輸和保存方法:干冰運輸,；保存于-20℃,。

α-凝血酶（α-Thrombin）是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶，由凝血酶原（Prothrombin,，II因子）經(jīng)蛋白水解活化而來,。它在凝血過程中起著非常重要的作用，不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生,，還負責(zé)提供反饋信號來尋找前輔因子：V因子和VIII因子,。也可以用作血管收縮劑,。在體內(nèi)，活化的X因子（FactorXa）切割凝血酶原,，釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶,。α-凝血酶由一條輕鏈（Achain）（Mw~6,000）和一條重鏈（Bchain）（Mw~31,000）通過二硫鍵連接而成。某些情況下,，α-凝血酶會發(fā)生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶,。β-凝血酶由對α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點的小片段（B1，B2）組合而成,。除了用于凝血研究之外，α-凝血酶還常用來位點特異性切割融合蛋白,?；蛑亟M時將凝血酶識別位點插入在目的蛋白與利于后續(xù)純化和/或表達的多肽或者蛋白之間，通過凝血酶切割表達的重組子即可釋放目的蛋白,。凝血酶本身可通過親和層析技術(shù)快速去除,。本品是由勻質(zhì)化的人凝血酶原經(jīng)由Xa因子，Va因子和磷脂活化而得,，經(jīng)SDS-PAGE檢測確保凝血酶原的完全活化,，并以NIH凝血酶的標(biāo)準(zhǔn)品為參考，提供的酶活力不少于3091NIHU/mg,?？缒さ鞍自谒拗骷毎械谋磉_水平通常有點低，研發(fā)困難,，對蛋白表達生產(chǎn)平臺技術(shù)要求極高,。

Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達重組腸激酶(不帶標(biāo)簽)注意事項1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切,，可能會有非特異性酶切出現(xiàn),。3.在＞200mM咪唑，或＞200mMNaCl,，或＞5%甘油,，酶切會受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,，為獲得理想的酶切結(jié)果,，請先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中，然后再進行酶切實驗,；若不方便透析,，可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下，NaCl濃度在50mM以下,，甘油濃度小于5%以下進行酶切,，酶的用量與蛋白比例不變,；若干擾因素很多，且不便去除,，需要適當(dāng)增加酶量或延長酶切時間,，有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對Enterokinase有很強的抑制作用,，痕量的磷酸鹽都會嚴重影響Enterokinase的活性,，因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶,，切割蛋白使用量少,，可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶,，可用陰離子交換樹脂（如DEAE-FF）對其進行洗脫,。推薦洗脫條件如下：平衡緩沖液：25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液：25mMTris-HClpH8.0，含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,，可適當(dāng)增加酶量,，或適當(dāng)延長酶切時間。泛素蛋白（Ubiquitin,，簡稱Ub）是一種在真核細胞中普遍存在的小分子蛋白,，具有高度保守性。Recombinant Mouse CDH17/Cadherin 17 Protein,His Tag

重組人泛素是一種蛋白質(zhì),，它是一種含有76個氨基酸的高度保守的蛋白質(zhì),，存在于細胞核和細胞質(zhì)中。Recombinant Human CD72 Protein,His Tag

重組腸激酶（rEK）是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段,，氨基酸序列與牛腸激酶輕鏈一致,，有著和天然提取的腸激酶同樣特異的酶切位點，切割位點Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,，以除去不需要的融合標(biāo)簽，同時重組腸激酶（rEK）具有比天然酶更高的切割活性,。重組腸激酶為采用重組大腸桿菌分泌表達的高純度,、高活性、高特異的牛腸激酶,，不含其他蛋白酶,，可以在較寬pH范圍（4.5-9.5）和較寬溫度范圍內(nèi)有效切割融合蛋白，并且在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性,。本品不含標(biāo)簽,，由于具有極高酶切活性，酶切反應(yīng)使用量少,，不影響下游蛋白應(yīng)用,，可不考慮除去,。產(chǎn)品信息規(guī)格100U/200U/500U/1000U/5000U產(chǎn)品性質(zhì)來源（Source）大腸桿菌表達分子量（MolecularWeight）理論值25.85kDa外觀（Appearance）澄清、無色至淡黃色液體酶濃度（EnzymeConcentration）≥5U/uL活性定義（ActivityDefinition）一個活性單位定義為25°C,，12-16h,，Recombinant Human CD72 Protein,His Tag