5'-3'外切核酸酶活性是指DNA聚合酶能夠從DNA鏈的5'端向3'端切除核苷酸的能力。這種活性通常用于修復(fù)受損的DNA或去除錯(cuò)誤配對(duì)的核苷酸,。具體來說,，5'-3'外切核酸酶活性可以在DNA合成過程中切除前方的核苷酸,，幫助錯(cuò)誤或不需要的序列,，從而確保DNA的正確復(fù)制和修復(fù),。在DNA聚合酶中,，5'-3'外切核酸酶活性與聚合酶活性相輔相成,。聚合酶在合成新鏈時(shí)，5'-3'外切酶活性可以在發(fā)現(xiàn)錯(cuò)誤時(shí)進(jìn)行修正,，確保合成的DNA鏈的準(zhǔn)確性,。例如，E.coliDNA聚合酶I具有這種外切酶活性,，可以在合成過程中去除錯(cuò)誤的核苷酸,，從而提高DNA的保真度。需要注意的是,，BstDNAPolymerase,LargeFragment不具有5'-3'外切核酸酶活性,，這使得它在某些應(yīng)用中更為穩(wěn)定，特別是在等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)中,，如LAMP（環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增）和RCA（滾環(huán)擴(kuò)增）等,。Cpf1是一種新發(fā)現(xiàn)的類2/型V CRISPR-Cas DNA內(nèi)切酶，在不同系統(tǒng)中顯示出一系列的活性,。Recombinant Human ABO Protein,hFc Tag

嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶I（BstDNAPolymeraseI）和它的大片段（LargeFragment）是兩種在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的酶,。它們的主要區(qū)別在于結(jié)構(gòu)和活性：1.**結(jié)構(gòu)**：-完整的BstDNAPolymeraseI包含一個(gè)5'→3'的核酸外切酶活性區(qū)域，而大片段是通過基因工程改造或蛋白酶處理去掉了這個(gè)外切酶活性區(qū)域的酶,。因此,，大片段沒有5'→3'的核酸外切酶活性，但保留了5'→3'的DNA聚合酶活性,。2.**活性**：-BstDNAPolymeraseI具有5'→3'的核酸外切酶活性,，這意味著它在合成DNA的同時(shí)可以“校對(duì)”錯(cuò)誤,，切除不匹配的核苷酸。而大片段由于缺少外切酶活性區(qū)域,，不具有這種校對(duì)能力。-大片段具有更強(qiáng)的鏈置換能力,，這使得它非常適合于等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng),，如環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）和滾環(huán)擴(kuò)增（RCA）。3.**應(yīng)用**：-BstDNAPolymeraseI由于具有校對(duì)功能,，可能更適合于需要高保真度的DNA合成反應(yīng),。-BstDNAPolymerase,LargeFragment由于其鏈置換能力，更適合于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),，這些技術(shù)不需要熱循環(huán)儀,，可以在恒定溫度下進(jìn)行DNA擴(kuò)增。4.**熱穩(wěn)定性**：-BstDNAPolymerase,LargeFragment通常在65°C左右的溫度下進(jìn)行反應(yīng),，而BstDNAPolymeraseI可能具有更寬的反應(yīng)溫度范圍,。Recombinant Mouse IL-3 Protein泛素連接酶E3識(shí)別特定的靶蛋白，并促進(jìn)E2上的泛素轉(zhuǎn)移到靶蛋白的賴氨酸殘基上,，形成泛素化標(biāo)記,。

在PCR實(shí)驗(yàn)中，除了BsuDNAPolymerase,，還有幾種聚合酶適合高溫?cái)U(kuò)增,，包括：1.**TaqDNAPolymerase**：這是常用的PCR聚合酶，來源于Thermusaquaticus,，能夠在72°C的比較好活性溫度下工作,。它具有良好的熱穩(wěn)定性，可以承受PCR的熱變性步驟,，且中途不需要再添加酶,。2.**PfuDNAPolymerase**：來源于Pyrococcusfuriosus，具有出色的熱穩(wěn)定性和3'→5'外切酶活性,，提供校正功能,，適用于對(duì)PCR保真性要求較高的實(shí)驗(yàn)，如基因篩選,、克隆表達(dá),、突變檢測(cè)、定點(diǎn)突變等,。3.**VentDNAPolymerase**：來源于Litoralis棲熱球菌,，具有3'→5'外切酶活性，可以去除錯(cuò)配的堿基,，具有校對(duì)功能,，保真度比TaqDNAPolymerase高5~15倍,。4.**KODDNAPolymerase**：來自Thermococcuskodakaraensis，具有高保真性和高熱穩(wěn)定性,，保真性比PfuDNAPolymerase更高,，優(yōu)化后的PCR反應(yīng)緩沖液能使得其擴(kuò)增速度達(dá)到Taq酶的2倍、Pfu酶的5-6倍,。5.**BstDNAPolymerase**：來源于Bacillusstearothermophilus,，具有3'到5'外切割活性，適用于等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng),，如LAMP技術(shù),，可在恒溫下進(jìn)行DNA擴(kuò)增，無需繁瑣的溫度循環(huán),。

T7EndonucleaseI（T7EI）是一種特殊的DNA內(nèi)切酶,，具有以下特點(diǎn)：1.**識(shí)別錯(cuò)配DNA**：T7EI能夠識(shí)別并切割不完全配對(duì)的DNA、十字型結(jié)構(gòu)DNA,、Holliday結(jié)構(gòu)或交叉DNA以及異源雙鏈DNA,。2.**切割位點(diǎn)**：T7EI切割錯(cuò)配位點(diǎn)5'端的、第二或第三個(gè)磷酸二酯鍵,。3.**靈敏度**：T7EI對(duì)錯(cuò)配DNA的識(shí)別非常靈敏,，能夠檢測(cè)并切割單堿基和多堿基的錯(cuò)配。4.**應(yīng)用**：T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)導(dǎo)致的基因突變的鑒定,。它通過識(shí)別錯(cuò)配DNA來幫助鑒定基因編輯是否成功以及是否有非目標(biāo)效應(yīng),。5.**直接電泳檢測(cè)**：T7EI的產(chǎn)物可以直接通過電泳進(jìn)行檢測(cè)，這使得它在實(shí)驗(yàn)操作中更為方便,。6.**來源**：T7EI來源于大腸桿菌菌株,，是一種麥芽糖結(jié)合蛋白（MBP）和T7核酸內(nèi)切酶I（T7EI）的融合蛋白。7.**成本效益**：盡管T7EI在商業(yè)上使用時(shí)成本較高,，但它在大規(guī)模樣本測(cè)試中,，尤其是在基因突變鑒定方面，提供了一種有效的篩選方法,。8.**特殊注意事項(xiàng)**：T7EI能夠識(shí)別長度大于或等于2bp的插入,、缺失或突變導(dǎo)致的錯(cuò)配DNA，但不能識(shí)別1bp的插入,、缺失或突變,。這些特點(diǎn)使得T7EndonucleaseI成為基因突變鑒定中一個(gè)非常有用的工具，尤其是在CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)的應(yīng)用中,。多泛素化的靶蛋白被26S蛋白酶體識(shí)別,。26S蛋白酶體由一個(gè)20S顆粒和兩個(gè)19S調(diào)節(jié)顆粒組成。

牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）是一種來源于牛痘病毒的I型真核拓?fù)洚悩?gòu)酶,，具有以下功能和應(yīng)用：1.**功能**：-牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I可以催化雙鏈DNA分子中單鏈DNA特定序列位置的磷酸二酯鍵的斷開和連接,。-具有解超螺旋的酶(DNARelaxingEnzyme)活性,，能夠通過快速的酶切和連接使雙鏈共價(jià)閉合環(huán)狀的正或負(fù)超螺旋DNA發(fā)生解超螺旋，形成含有較少的正或負(fù)超螺旋的雙鏈環(huán)狀DNA分子,。-能夠使雙鏈DNA形成繩結(jié)(knotting)或解開繩結(jié)(unknotting),，聯(lián)結(jié)互補(bǔ)的單鏈環(huán)狀DNA成為雙鏈環(huán)狀DNA。2.**應(yīng)用**：-作為一種DNA重組連接的新型工具酶,，用于DNA載體和重組片段的連接,、缺刻修復(fù)、接頭連接等,。-適用于TOPO克隆載體的制備、NGS建庫中的接頭連接等,。-在TOPO克隆技術(shù)中,，DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I同時(shí)具有限制酶和連接酶特性，其生物學(xué)功能是在復(fù)制期間切割并重新連接DNA,。3.**使用方法**：-用于DNA快速酶切流程,，包括配制體系反應(yīng)液、輕柔混勻,、37℃孵育15分鐘等步驟,。4.**儲(chǔ)存條件**：-建議在-25～-15℃保存，有效期為3年,。5.**注意事項(xiàng)**：-避免起泡或劇烈攪拌,、渦旋等操作，以防止酶失活,。牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I因其獨(dú)特的功能,，在分子生物學(xué)研究和基因工程中扮演著重要的角色。Uracil-DNA Glycosylase (UDG) 是一種在DNA修復(fù)過程中起作用的酶,，其主要功能是識(shí)別并去除DNA中的尿嘧啶堿基,。Recombinant Human TECK/CCL25

FnCas12a在切割DNA時(shí)產(chǎn)生黏性末端，有助于提高同源定向修復(fù)（HDR）的效率,。Recombinant Human ABO Protein,hFc Tag

磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米顆粒固相核酸富集技術(shù)來純化質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品,。它通常包括高性能納米磁珠和獨(dú)特的緩沖體系組合，通過裂解菌體后釋放的DNA,，能夠有效地結(jié)合于磁珠表面,，漂洗除雜后獲得高質(zhì)量的目的質(zhì)粒。以下是磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒的一些主要特點(diǎn)和應(yīng)用：1.**快速簡(jiǎn)便**：操作步驟簡(jiǎn)單,，無需多次離心,，整個(gè)抽提過程通常只需20-25分鐘。2.**高得率和純度**：可以從1-5ml新鮮大腸桿菌菌液中分離純化2-20μg高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA,。純化得到的DNA質(zhì)量高,，完整性好,，OD260/280比值一般為1.8~1.9之間，OD260/230比值大于2.0,。3.**適用性廣**：適用于1-5mL小體積高通量菌液質(zhì)粒抽提,，且抽提所得的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、測(cè)序,、文庫篩選,、連接和轉(zhuǎn)化等各種下游分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。4.**自動(dòng)化兼容**：可整合移液法自動(dòng)化儀器和磁棒法自動(dòng)化儀器進(jìn)行高通量提取實(shí)驗(yàn),。5.**安全性高**：操作過程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑,，更加環(huán)保和安全。6.**成本效益**：相比傳統(tǒng)的離心柱法,，磁珠法可以減少離心次數(shù),，獲得完整性更好的質(zhì)粒，且操作更為簡(jiǎn)便快捷,。7.**操作靈活**：磁珠的使用量可靈活調(diào)節(jié),，適合不同體積和濃度的樣品處理。Recombinant Human ABO Protein,hFc Tag