電子探針(Electron Probe Microanalysis)是一種利用電子束作用樣品后產(chǎn)生的特征X射線進行微區(qū)成分分析的儀器, [1]可以用來分析薄片中礦物微區(qū)的化學組成,。除H,、He、Li,、Be等幾個較輕元素外,,還有U元素以后的元素以外都可進行定性和定量分析。電子探針的大批量是利用經(jīng)過加速和聚焦的極窄的電子束為探針,,激發(fā)試樣中某一微小區(qū)域,,使其發(fā)出特征X射線,測定該X射線的波長和強度,,即可對該微區(qū)的元素作定性或定量分析,。電子探針顯微分析原理及其發(fā)展的初期是建立在X射線光譜分析和電子顯微鏡這兩種技術(shù)基礎(chǔ)上的,該儀器實質(zhì)上就是這兩種儀器的科學組合,。分析元素從原子序數(shù)3(鋰)至92(鈾)。感量可達10-14至10-15g,。青浦區(qū)品牌探針推薦貨源
②隨機引物法,。隨機引物是指含有各種可能排列順序的寡聚核苷酸片斷的混合物,,因此它可以與任意核苷酸序列雜交,起到聚合酶反應的引物作用,。將待標記的DNA探針片斷變性后與隨機引物一起雜交,,然后以此雜交的寡聚核苷酸為引物,在大腸桿菌DNA聚合酶I大斷段(KlenowFragment)催化下,,合成與探針DNA互補的DNA鏈,,當在反應體系中含有a-32P-dNTP時,即形成放射性同位素標記的DNA探針,。具有上述優(yōu)點,,可代替缺口平移法。此外大小,、單雙DNA均可標記,,標記均勻,標記率高,,但也不能標記環(huán)狀DNA。隨機引物法標記探針一般長400~600bp,。閔行區(qū)優(yōu)勢探針五星服務(wù)X射線譜儀,。測量各種元素產(chǎn)生的X射線波長和強度,并以此對微小體積中所含元素進行定性和定量分析,。
細菌的基因組大小約5×106bp,,約含3000個基因。各種細菌之間絕大部分DNA是相同的,,要獲得某細菌特異的核酸探針,,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DNA切成小片段后分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫,。然后用多種其它菌種的DNA作探針來篩選,,產(chǎn)生雜交信號的克隆被剔除,,***剩下的不與任何其它細菌雜交的克隆則可能含有該細菌特異性DNA片段。將此重組質(zhì)粒標記后作探針進一步鑒定,,亦可經(jīng)DNA序列分析鑒定其基因來源和功能,。因此要得到一種特異性DNA探針,,常常是比較繁瑣的,。
探針的標記也可以采用隨機引物法,,即向變性的探針溶液加入6個核苷酸的隨機DNA小片段,作為引物,,當后者與單鏈DNA互補結(jié)合后,,按堿基互補原則不斷在其3’OH端添加同位素標記的單核苷酸,這樣也可以獲得比放射性很高的DNA探針,。DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,,人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體,。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素,、生物素或熒光染料等標記后制成的探針??膳c固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結(jié)合,,經(jīng)放射自顯影或其他檢測手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。當某一X射線光子進入計數(shù)管后,,管內(nèi)氣體電離,,并在電場作用下產(chǎn)生電脈沖信號。
探針是用于測試PCBA的一種測試針,,表面鍍金,,內(nèi)部有平均壽命3萬~10萬次的高性能彈簧,。國外比較有名的生產(chǎn)廠家有: QA ,IDI、UC,、Semiprobe,、ECT,INGUN,,BT探針的材質(zhì):W,ReW,CU,、 A+1.主要采用的材質(zhì)為W,,ReW, 彈性一般,,容易偏移,粘金屑,,需要多次的清洗,,磨損損針長,壽命一般,。2. A+材質(zhì)的免清針,,這種材質(zhì)彈性較好,測試中不容易偏移,,并且不粘金屑,,免清洗,,因此壽命較長,。探針分類探針根據(jù)電子測試用途可分為:A、光電路板測試探針:未安裝元器件前的電路板測試和只開路,、短路檢測探針,,國內(nèi)大部分的探針產(chǎn)品均可替代進口產(chǎn)品;“Wi-Fi信道掃描工具”處于被動監(jiān)測模式,無需用戶主動連接某個WiFi,需打開手機WiFi功能時即可捕獲,。浦東新區(qū)挑選探針商家
電子探針可以對試樣中微小區(qū)域(微米級)的化學組成進行定性或定量分析,。青浦區(qū)品牌探針推薦貨源
為了確定探針是否與相應的基因組DNA雜交,,有必要對探針加以標記,,以便在結(jié)合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基,。但近年來已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標記物的方法,。非同位素標記的優(yōu)點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染,。**常用的探針標記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當濃度的DNA酶Ⅰ(DNAseⅠ)在探針DNA雙鏈上造成缺口,,然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ(DNa poly merasⅠ)的5’→3’的外切酶活性,,切去帶有5’磷酸的核苷酸;同時又利用該酶的5’→3’聚酶活性,,使32P標記的互補核苷酸補入缺口,,DNA聚合酶Ⅰ的這兩種活性的交替作用,使缺口不斷向3’的方向移動,,同時DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標記的核苷酸所取代,。青浦區(qū)品牌探針推薦貨源
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