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來源: 發(fā)布時間:2025-06-07

在不損耗試樣的情況下,,電子探針通常能分析直徑和深度不小于1微米范圍內、原子序數(shù)4以上的所有元素,;但是對原子序數(shù)小于12的元素,,其靈敏度較差。常規(guī)分析的典型檢測相對靈敏度為萬分之一,,在有些情況下可達十萬分之一,。檢測的***靈敏度因元素而異,一般為10-14~10-16克,。用這種方法可以方便地進行點,、線、面上的元素分析,,并獲得元素分布的圖象,。對原子序數(shù)高于10、濃度高于10%的元素,,定量分析的相對精度優(yōu)于±2%,。電子探針儀是 X射線光譜學與電子光學技術相結合而產(chǎn)生的。1948年法國的R.卡斯坦制造了***臺電子探針儀。1958年法國首先制造出商品儀器,。電子探針儀與掃描電子顯微鏡在結構上有許多共同處,。70年代以來生產(chǎn)的電子探針儀上一般都帶有掃描電子顯微鏡功能,有的還附加另一些附件,,使之除作微區(qū)成分分析外,,還能觀察和研究微觀形貌、晶體結構等,。分析對象是固體物質表面細小顆?;蛭⑿^(qū)域,小范圍直徑為1μm,。寶山區(qū)挑選探針按需定制

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體外轉錄技術不斷完善,,已相繼建立了單向和雙向體外轉錄系統(tǒng)。該系統(tǒng)主要基于一類新型載體pSP和pGEM,,這類載體在多克隆位點兩側分別帶有SP6啟動子和T7啟動子,,在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可以進行RNA轉錄,如果在多克隆位點接頭中插入了外源DNA片段,,則可以此DNA兩條鏈中的一條為模板轉錄生成RNA,。這種體外轉錄反應效率很高,在1h內可合成近10μg的RNA產(chǎn)生,,只要在底物中加入適量的放射性或生物素標記的NTP,,則所合成的RNA可得到高效標記。該方法能有效地控制探針的長度并可提高標記物的利用率,。虹口區(qū)標準探針品牌電子束轟擊樣品表面將產(chǎn)生特征X射線,,不同的元素有不同的X射線特征波長和能量。

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值得一提的是,,通過改變外源基因的插入方向或選用不同的RNA聚合酶,,可以控制RNA的轉錄方向,即以哪條DNA鏈以模板轉錄RNA,。這種可以得到同義RNA探針(與mRNA同序列)和反義RNA探針(與mRNA互補),,反義RNA又稱cRNA,除可用于反義核酸研究外,,還可用于檢測mRNA的表達水平,。在這種情況下,因為探針和靶序列均為單鏈,,所以雜交的效率要比DNA-DNA雜交高幾個數(shù)量級,。RNA探針除可用于檢測DNA和mRNA外,還有一個重要用途,,在研究基因表達時,,常常需要觀察該基因的轉錄狀況。

②隨機引物法,。隨機引物是指含有各種可能排列順序的寡聚核苷酸片斷的混合物,,因此它可以與任意核苷酸序列雜交,起到聚合酶反應的引物作用,。將待標記的DNA探針片斷變性后與隨機引物一起雜交,,然后以此雜交的寡聚核苷酸為引物,在大腸桿菌DNA聚合酶I大斷段(KlenowFragment)催化下,,合成與探針DNA互補的DNA鏈,,當在反應體系中含有a-32P-dNTP時,即形成放射性同位素標記的DNA探針,。具有上述優(yōu)點,,可代替缺口平移法。此外大小,、單雙DNA均可標記,,標記均勻,標記率高,,但也不能標記環(huán)狀DNA,。隨機引物法標記探針一般長400~600bp。探針卡是IC制造中對制造成本影響相當大的重要制程之一,。

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探針的標記方式有放射性標記和非放射性標記,。標記物質有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(如生物素、地高辛等),。32P是**常用的核苷酸標記同位素,,被標記的dNTP本身就帶有磷酸基團,便于標記,。特點是比活性高,,可達9000Ci/mmol;發(fā)射的β射線能量高,。用它標記的探針自顯影時間短,,靈敏度高。32P的半壽期短,,雖使用不方便,,但為廢棄物的處理減輕了壓力。非放射性標記法有酶標法和化學物標記法,。酶標方法與免疫測定ELISA方法相似,,只是被標記的核酸代替了被標記的抗體,事實上被標記的抗體也稱為探針,,現(xiàn)有許多商品是生物素,、地高辛標記的,。除H、He,、Li,、Be等幾個較輕元素外,還有U元素以后的元素以外都可進行定性和定量分析,。虹口區(qū)標準探針品牌

能兼作透射電鏡,、能進行電子衍射、能作電子熒光觀察等,。寶山區(qū)挑選探針按需定制

細菌的基因組大小約5×106bp,,約含3000個基因。各種細菌之間絕大部分DNA是相同的,,要獲得某細菌特異的核酸探針,,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DNA切成小片段后分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫,。然后用多種其它菌種的DNA作探針來篩選,,產(chǎn)生雜交信號的克隆被剔除,***剩下的不與任何其它細菌雜交的克隆則可能含有該細菌特異性DNA片段,。將此重組質粒標記后作探針進一步鑒定,,亦可經(jīng)DNA序列分析鑒定其基因來源和功能。因此要得到一種特異性DNA探針,,常常是比較繁瑣的,。寶山區(qū)挑選探針按需定制

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