PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,,由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),,三個(gè)不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù),。在反應(yīng)體系內(nèi),,以一對人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物,,第一步,,模板DNA變性,,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈,。第二步,,模板DNA與引物退火(復(fù)性),,模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,,引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對,。第三步,引物的延伸,,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈,。這三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán),2-4分鐘即可完成一個(gè)循環(huán),,2-3小時(shí)就能使極微量的DNA,、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍,,從而實(shí)現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性,。寵物醫(yī)療服務(wù)包括為寵物提供疾病診療和日常保健服務(wù),是寵物行業(yè)中*次于寵物食品的第二大細(xì)分行業(yè),。熒光PCR核酸檢測
樣本處理、核酸提取,、PCR擴(kuò)增和數(shù)據(jù)處理是PCR的四個(gè)步驟。其中核酸提取可以幫助研究人員準(zhǔn)確地快速地分離細(xì)胞或分子材料中的有效核酸,并獲得足夠的樣本為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供依據(jù),。無論是病毒、細(xì)菌還是體細(xì)胞,,遺傳物質(zhì)都不是裸露在細(xì)胞外,都是在細(xì)胞內(nèi),。需要有一個(gè)核酸提取試劑將遺傳物質(zhì)釋放到外界,,保證PCR反應(yīng)效率,。將核酸釋放出來后,提取與純化過程中同樣需要將樣本中的一些PCR抑制物去除掉,獲得純度比較高的核酸,,比較大限度的保證PCR反應(yīng)中抑制物的濃度降低,,提高核酸檢測的準(zhǔn)確性,。因此核酸提取與純化這一步,,也是保證PCR反應(yīng)結(jié)果的關(guān)鍵一步,。巧亦捷核酸檢測一體機(jī)采用磁珠法提取,效率高且可確保結(jié)果更準(zhǔn)確,。蘇州動(dòng)物源PCR儀器生產(chǎn)企業(yè)分子診斷技術(shù)大致劃分為PCR技術(shù)、分子雜交,、基因測序,、核酸質(zhì)譜,、生物芯片5大類,。
巧亦捷全自動(dòng)薄膜微流控核酸檢測儀器擁有多種重技術(shù),,保障結(jié)果準(zhǔn)確:其采用Taqman熒光探針和經(jīng)典PCR擴(kuò)增技術(shù),,能夠?qū)⑸飿?biāo)志物精確定量,,同時(shí)輸出Ct值和擴(kuò)增曲線,結(jié)果判讀簡潔明了,;質(zhì)控更全1面,,結(jié)果更可靠,,設(shè)備體積小巧,,便于搬運(yùn)和攜帶,可在多種場景下隨心使用,,且薄膜微流控芯片為封閉系統(tǒng)操作,可很大程度避免人為和環(huán)境的污染,,降低對檢測環(huán)境的要求,,以及對檢測人員的要求。更適合寵物醫(yī)院,、獸醫(yī)站,、養(yǎng)殖場等多種使用場景,。
使用平常的抗原試紙做動(dòng)物診斷常會(huì)出現(xiàn)誤診的情況,如用抗原試紙條對剛買的小狗帶到做檢測,,犬瘟試紙條檢測是陰性,但回家養(yǎng)幾天后小狗開始出現(xiàn)打噴嚏,、咳嗽等癥狀,,此時(shí)再去做檢查,,犬瘟檢測則變成陽性,,這種情況在寵物臨床上并不少見。很有可能這只小狗在第,、一次檢查的時(shí)候已經(jīng)傳染并且向外排毒了,,但是由于抗原滴度低排毒量比較小,試紙條檢測不出來,,錯(cuò)失了及早診療的機(jī)會(huì),。另一方面,抗體檢測試紙并不能及時(shí)準(zhǔn)確知道機(jī)體是否傳染這個(gè)病原,,就比如現(xiàn)在常見的貓咪弓形蟲檢測,,只有貓咪接觸病原一段時(shí)間后,才能產(chǎn)生足量的抗體,,抗體試紙才出現(xiàn)陽性結(jié)果,。當(dāng)這些情況發(fā)生,結(jié)果都是令人很難過的,。因?yàn)檫@不僅*意味著后期要花更多的Money用于診療,,還會(huì)出現(xiàn)診療困難,毛孩子們受罪,,甚至?xí)霈F(xiàn)我們都不愿意接受的死亡,。所以我們更建議使用PCR技術(shù)進(jìn)行臨床診斷。巧亦捷致力于為動(dòng)物健康保駕護(hù)航,。
核酸檢測技術(shù)(PCR),,是公共衛(wèi)生流行病學(xué)中的重要檢測手段。這是因?yàn)?,PCR在群體健康監(jiān)測中具有多重優(yōu)勢:采樣簡單,,可合并樣本,篩查范圍廣,,檢測成本低,;敏感性高,特異性強(qiáng),,可及時(shí)發(fā)現(xiàn)傳染初期的患者,,有助于防止病毒進(jìn)一步擴(kuò)散;出具結(jié)果快,,可實(shí)現(xiàn)對群體的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測等,。巧亦捷核酸檢測一體機(jī)采用國際領(lǐng)、先的薄膜微流控技術(shù),實(shí)現(xiàn)了從核酸提取,、PCR擴(kuò)增,、熒光檢測全流程自動(dòng)化芯片內(nèi)完成,樣本進(jìn),,結(jié)果出,,檢測時(shí)間短,全程無需專業(yè)技術(shù)人員參與,,可實(shí)現(xiàn)基于病癥的多項(xiàng)目聯(lián)檢,,特別適合寵物醫(yī)院、獸醫(yī)站,、養(yǎng)殖場等現(xiàn)場快檢應(yīng)用場景,。巧亦捷使用的PCR擴(kuò)增酶酶活是同類酶的3倍以上,檢測靈敏度高,。熒光PCR動(dòng)物疫病
傳染性疾病在寵物中比較常見,,由多種病原體如寄生蟲,細(xì)菌,,病毒等引起,且多具有傳染性,,死亡率也較高,。熒光PCR核酸檢測
目前,市面上的寵物用分子檢測平臺(tái)普遍存在操作復(fù)雜,,單價(jià)偏高,,靈敏度不佳等問題,巧亦捷依托于自主研發(fā)的薄膜微流控技術(shù),,經(jīng)多年沉淀,,研發(fā)出全自動(dòng)快速核酸檢測一體機(jī)及多種配套檢測試劑,儀器自動(dòng)進(jìn)行核酸提取和PCR擴(kuò)增,,讓使用者將樣本加入薄膜囊袋中就可上機(jī)進(jìn)行核酸檢測,,且支持多重聯(lián)檢功能,一次可檢測多種病原體,。多重寵物檢測試劑除了可解決操作的復(fù)雜性問題,,也由于采用常規(guī)的多重PCR策略,可大幅降低檢測試劑的費(fèi)用,。熒光PCR核酸檢測