PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,,由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術(shù),。在反應(yīng)體系內(nèi),,以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,,模板DNA變性,,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,,模板DNA與引物退火(復(fù)性),,模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對,。第三步,,引物的延伸,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈,。這三個步驟為一個循環(huán),2-4分鐘即可完成一個循環(huán),,2-3小時就能使極微量的DNA,、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍,,從而實現(xiàn)對靶DNA的放大,。由于擴增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性,。其實PCR在技術(shù)上仍有突破空間,,巧亦捷核酸檢測一體機已可以實現(xiàn)多重檢測。江蘇結(jié)核PCR動物疫病
巧亦捷推出的核酸檢測一體機可以實現(xiàn)多種聯(lián)檢,,比如貓的呼吸道有癥狀,,可能傳染原因包括皰疹病毒、衣原體,、支原體等,,到底是哪種情況?其實醫(yī)生很難判斷,,通過多重PCR檢測試劑,,可提高檢出率,降低操作復(fù)雜度,。不需要一個病原一個病原去測,,一個反應(yīng)就可以把3種病原同時檢測。極大減少了獸醫(yī)師的檢測時間及檢測成本,。且巧亦捷核酸一體機的設(shè)計,,可有效避免PCR擴增時可能產(chǎn)生的污染,因為其實PCR基于本身原理,,敏感性很高,,實際上大多數(shù)污染產(chǎn)生于擴增過程中,比如說,,在擴增過程中造成PCR體系泄漏,,就會比較嚴(yán)重,而通過薄膜微流控技術(shù),,全封閉的檢測試劑及檢測過程,,可比較大限度減少污染。多重PCR儀器哪家好巧亦捷薄膜微流控全自動核酸檢測平臺將成為我們保護毛孩健康的重要利器,。
巧亦捷核酸檢測一體機有以下幾點優(yōu)勢:1:全自動核酸提取:<1分鐘的手工操作時間:巧亦捷核酸一體機內(nèi)部可自動進行封閉式核酸提取,,使得整體手工操作時間小于1分鐘,,較為小化人為干預(yù)帶來的操作誤差,是市面上自動化程度比較高的多重病原體解決方案,。2,、準(zhǔn)確、靈敏的創(chuàng)新核酸檢測針對不同的樣本,,可以準(zhǔn)確地實現(xiàn)從樣本到結(jié)果的判讀,,可以處理全血、血清,、血漿,、糞便、體液,、分泌物等各種樣本,,實現(xiàn)醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的高特異性、高敏感性核酸檢測3,、一份樣本多重檢測基于實時熒光定量PCR技術(shù)的多種綜合癥檢測系統(tǒng),,一份樣本較為多可以同時檢測多種病原體,這一特性賦予該系統(tǒng)優(yōu)越多樣性的檢測和應(yīng)用,,也便于快速進行多種疾病的同時檢測和管理
在寵物醫(yī)院,,往往沒有專業(yè)的實驗環(huán)境與PCR分區(qū),樣本中病原體污染,、PCR反應(yīng)后產(chǎn)物污染都是會很影響PCR結(jié)果,,導(dǎo)致假陽性的出現(xiàn),其中PCR產(chǎn)物污染是導(dǎo)致化驗室環(huán)境污染**主要的因素(PCR反應(yīng)中DNA的復(fù)制是指數(shù)級的增長),。而選擇不善于處理低濃度樣本與復(fù)雜樣本的提取方法,,導(dǎo)致核酸提取不完全或者在**1后PCR反應(yīng)中存在抑制物,污染PCR反應(yīng),,則會導(dǎo)致漏檢,,產(chǎn)生假陰性。這些都是在核酸檢測過程中需要注意的點,。巧亦捷PCR反應(yīng)系統(tǒng)采用磁珠法核酸提取純化加熒光探針PCR方法,,整機一體化,實現(xiàn)一機提取加擴增,,減少人工操作與培訓(xùn)時間,,輕松上手。避免污染,。PCR技術(shù)又可以分為定量PCR和常規(guī)PCR,,定量PCR分為實時熒光定量PCR(RT-PCR)和數(shù)字PCR。
無論是由病毒,、細菌,,還是原蟲,、寄生蟲等引起的犬貓傳染性疾病都可利用巧亦捷核酸一體機進行診斷。即使存在于患犬或患貓體內(nèi)極少量的病原微生物,,巧亦捷核酸一體機采用的PCR技術(shù)也能對病原微生物進行上百萬倍的復(fù)制,,從而達到可以被檢出的濃度,因此巧亦捷核酸一體機能對犬貓傳染病進行準(zhǔn)確,、高效的診。例如貓鼻氣管炎是由貓皰疹病毒引起的一類貓上呼吸道疾病,,當(dāng)貓傳染皰疹病毒后,,會表現(xiàn)出一系列的上呼吸道癥狀,但臨床尚未有成熟的快速檢測方法,,用巧亦捷核酸一體機則可以快速準(zhǔn)確的得出結(jié)果,。巧亦捷能夠快速準(zhǔn)確地識別病原體,為寵物的健康問題提供關(guān)鍵信息,。薄膜微流控PCR儀器哪家好
寵物IVD檢測是寵物醫(yī)院必備手段,,其中PCR檢測目前是ZUI準(zhǔn)確的檢測方法。江蘇結(jié)核PCR動物疫病
巧亦捷核酸一體機采用的TaqMan探針法介紹:TaqMan探針法是具有高度特異性的定量PCR技術(shù),。它的工作原理是在PCR反應(yīng)體系中存在一對PCR引物和一條探針,,探針的5′端標(biāo)記有報告基團,3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團,,探針只與模板特異結(jié)合,,其結(jié)合位點在兩條引物之間。當(dāng)探針完整的時候,,報告基團的熒光能量被淬滅基團吸收,,所以儀器搜集不到信號,隨著反應(yīng)的進展,,Taq酶遇到探針,,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷,導(dǎo)致報告基團的熒光能量不能被淬滅基團吸收,,產(chǎn)生了熒光信號,,因此信號的強度就代、表了模板DNA的拷貝數(shù),。江蘇結(jié)核PCR動物疫病