截至2022年6月,，烈冰生物助力發(fā)表單細(xì)胞文章近40篇,，從平臺(tái)應(yīng)用比例來看,，應(yīng)用10X Genomics和BD Rhapsody兩大平臺(tái)發(fā)文比例各占50%左右,，研究類型涵蓋疾病發(fā)展，靶點(diǎn)探索,，免疫研究,，神經(jīng)發(fā)育,，干細(xì)胞分化,，植物發(fā)育,，退行病變，糖尿病,，COVID-19等等研究,；從發(fā)表期刊水平來看，烈冰生物聯(lián)合發(fā)表的單細(xì)胞文章,，CNS一區(qū)期刊占比在30%以上,，其中包括immunity三篇，Nature子刊3篇（Nature cell biology,Nature Plants,，Nature communication）,風(fēng)濕類領(lǐng)域ARD期刊1篇,，CUT 1篇，Advanced Science多篇,，IF大于10分以上文章占比高達(dá)68.5%,，烈冰專屬單細(xì)胞測序服務(wù)團(tuán)隊(duì)，將與您攜手譜寫下一篇“高分”新文章,。十二年測序經(jīng)驗(yàn),，烈冰生物單細(xì)胞多組學(xué)領(lǐng)域的佼佼者。烈冰單細(xì)胞測序百萬通量平臺(tái)

針對單細(xì)胞測序的細(xì)胞數(shù)量判斷環(huán)節(jié)：主要是對細(xì)胞數(shù)量,、基因表達(dá)量,、測序質(zhì)量進(jìn)行整體描述。過濾標(biāo)準(zhǔn)：由于細(xì)胞破碎后游離RNA會(huì)釋放到環(huán)境或孔中,，并且測序中也會(huì)存在一些死細(xì)胞,，導(dǎo)致數(shù)據(jù)存在background值。因此,，我們需要設(shè)定一定的標(biāo)準(zhǔn)來過濾掉假細(xì)胞或死細(xì)胞,。以10×Genomics為例，細(xì)胞數(shù)量判斷主要通過分析UMICounts-Barcode曲線斜率拐點(diǎn),，當(dāng)存在多個(gè)斜率拐點(diǎn)的時(shí)候,，結(jié)合預(yù)期UMI=500時(shí)的細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行過濾。當(dāng)斜率拐點(diǎn)低于UMI=500的時(shí)候,，選擇UMI=500作為細(xì)胞的判斷的標(biāo)準(zhǔn),；否則，選擇和預(yù)期細(xì)胞數(shù)量接近的拐點(diǎn)作為細(xì)胞判斷的位置,。這樣我們能夠有效獲得真實(shí)的并且在基因數(shù)量上可以分析的數(shù)據(jù),。南昌單細(xì)胞測序數(shù)據(jù)分析可視化烈冰生物全轉(zhuǎn)錄組測序通過雙文庫構(gòu)建，實(shí)現(xiàn)多種RNA的一網(wǎng)打盡,。

單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序是在單細(xì)胞水平上高通量測序分析基因表達(dá)譜的技術(shù),，突破傳統(tǒng)高通量測序的局限性，組織解離后,，單個(gè)樣本一次上機(jī)能捕獲500-20000個(gè)細(xì)胞,，基于每個(gè)細(xì)胞分別建庫測序,，獲得單個(gè)細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)和基因表達(dá)狀態(tài)，并鑒定細(xì)胞的類型,，可以在不同樣本間從細(xì)胞類型的組成和豐度角度進(jìn)行比較,，反映細(xì)胞間的異質(zhì)性。而2021年橫空出世的10XGenomicsChromiumX平臺(tái)實(shí)現(xiàn)了單塊chip上的百萬級(jí)別通量的細(xì)胞捕獲,，系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)16個(gè)通道同時(shí)運(yùn)行,，每個(gè)通道可捕獲2000-20000個(gè)細(xì)胞（不混樣），并支持原ChromiumController體統(tǒng)外的多種細(xì)胞捕獲百萬級(jí)別通量實(shí)驗(yàn),，可準(zhǔn)確鑒別稀有細(xì)胞類型和適配大規(guī)模單細(xì)胞研究,。

關(guān)于單細(xì)胞測序?qū)嶒?yàn)樣本制備，這與流式細(xì)胞術(shù)用戶熟悉的步驟完全一致,，也就是通過酶促或機(jī)械消化,、細(xì)胞分選或其他細(xì)胞分離技術(shù)從整個(gè)樣本中制備生成活的單細(xì)胞懸液。隨后是細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量控制步驟,，以確保您的樣本有適當(dāng)濃度的活細(xì)胞,，并且不含細(xì)胞團(tuán)塊和死細(xì)胞碎片。如有必要,，您還可以使用抗體對樣本進(jìn)行染色,，標(biāo)記細(xì)胞表面蛋白或其他生物分析物，或者通過FACS來富集感興趣的細(xì)胞類型,。解離樣本時(shí)采取的具體步驟將根據(jù)您的起始材料和實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)而定,。也許需要額外的制備步驟，具體取決于組織質(zhì)量,、樣本豐度,、細(xì)胞大小，以及是否需要提取出細(xì)胞核進(jìn)行染色質(zhì)可接近性分析,。無論具體的考慮因素如何,，所有樣本類型都遵循同一個(gè)基本原則，那就是生成高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液,。單細(xì)胞科聯(lián)合空間轉(zhuǎn)錄組,，展示組織切片中不同區(qū)域的基因表達(dá)情況，揭示精細(xì)病理區(qū)域中“喚醒”的信號(hào)通路,。

細(xì)胞中基因的表達(dá)是嚴(yán)格按照時(shí)間和空間順序發(fā)生,，因此細(xì)胞類型和基因表達(dá)具有時(shí)間特異性和空間特異性。時(shí)間特異性可以通過收集不同時(shí)間點(diǎn)的樣本進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序來分析,。但是單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序（scRNA-Seq）在單細(xì)胞懸液制備的過程中破壞了細(xì)胞的空間結(jié)構(gòu),，無法給出固態(tài)異質(zhì)化組織中細(xì)胞空間排布信息。而空間轉(zhuǎn)錄組可以解決這個(gè)問題,，其以點(diǎn)陣形式記錄組織切片細(xì)胞的空間信息,，在保留組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,，獲得細(xì)胞/基因的空間表達(dá)特異性。烈冰測序服務(wù)已助力300余篇國際期刊研究文章發(fā)表,。武漢高通量測序單細(xì)胞測序百萬通量平臺(tái)

截至2021年10月，烈冰助力發(fā)表單細(xì)胞測序文章近20篇,。烈冰單細(xì)胞測序百萬通量平臺(tái)

針對單細(xì)胞測序的細(xì)胞上樣數(shù),，為什么不建議捕獲到的細(xì)胞數(shù)量越高越好？一味地追求高數(shù)量的細(xì)胞捕獲可能會(huì)存在一些問題,。例如在上機(jī)細(xì)胞懸液濃度固定時(shí),，如果目標(biāo)細(xì)胞捕獲數(shù)增加到8000甚至10000，上樣細(xì)胞懸液體積勢必增加,，在細(xì)胞懸液質(zhì)量不是很理想（細(xì)胞活性5%,、結(jié)團(tuán)率均>5%）的情況下，引入的背景信號(hào)會(huì)增加,，分析結(jié)果不理想的直接體現(xiàn)包括：cell,、non-cell無法有效區(qū)分和Fractionreadsincells偏低。當(dāng)cell和non-cell無法有效區(qū)分時(shí),，會(huì)使得數(shù)據(jù)出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,！當(dāng)目標(biāo)細(xì)胞捕獲數(shù)很大時(shí)，多細(xì)胞率會(huì)增加,，數(shù)據(jù)分析時(shí),，此部分“cell”表現(xiàn)為基因檢測數(shù)和UMI檢測數(shù)是正常cell的N倍（N是一個(gè)GEM包裹的細(xì)胞數(shù)），導(dǎo)致所有細(xì)胞的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)（單個(gè)細(xì)胞基因檢測中位數(shù),、單個(gè)細(xì)胞UMI檢測中位數(shù)）虛高,。此部分“cell”雖然可以通過設(shè)置數(shù)據(jù)分析閾值進(jìn)行過濾，但是容易會(huì)有此類數(shù)據(jù)的殘留和正常高基因檢測細(xì)胞的人為去除,！烈冰單細(xì)胞測序百萬通量平臺(tái)

上海烈冰生物醫(yī)藥科技有限公司發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大,，現(xiàn)有一支專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)，各種專業(yè)設(shè)備齊全,。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù),，以誠信、敬業(yè),、進(jìn)取為宗旨,，以建NovelBio,烈冰生物,NovelBrain,PanoCell,烈冰智造產(chǎn)品為目標(biāo)，努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè),。我公司擁有強(qiáng)大的技術(shù)實(shí)力,，多年來一直專注于生物科技、醫(yī)藥科技,、信息科技,、計(jì)算機(jī)科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā),、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,、技術(shù)咨詢,，市場營銷策劃，市場信息咨詢與調(diào)查（不得從事社會(huì)調(diào)查,、社會(huì)調(diào)研,、民意調(diào)查、民意測驗(yàn)）,，從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù),，計(jì)算機(jī)、軟件及耗材（除?？兀?，軟件開發(fā)【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目，經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動(dòng)】的發(fā)展和創(chuàng)新,，打造高指標(biāo)產(chǎn)品和服務(wù),。自公司成立以來，一直秉承“以質(zhì)量求生存,，以信譽(yù)求發(fā)展”的經(jīng)營理念,，始終堅(jiān)持以客戶的需求和滿意為重點(diǎn)，為客戶提供良好的單細(xì)胞測序,，生物大數(shù)據(jù)云分析平臺(tái),，空間轉(zhuǎn)錄組測序，單細(xì)胞多組學(xué)測序,，從而使公司不斷發(fā)展壯大,。