如在現(xiàn)有研究方法基礎上,，進行特定亞細胞區(qū)域的蛋白質(zhì)組學,、相互作用蛋白質(zhì)組學以及某種特定翻譯后修飾類型的蛋白質(zhì)組學的研究等,。這將有助于諸多生化過程以及致病機理的全新認識與發(fā)現(xiàn),。隨著基于單細胞蛋白質(zhì)組學質(zhì)譜研究方法的不斷發(fā)展，單細胞分析方法的靈敏度、蛋白質(zhì)的覆蓋度、細胞通量、空間分辨率以及多組學的兼容能力會不斷突破我們的認知極限,。更重要的是，單細胞分析在臨床診斷,、疾病分型以及細胞發(fā)展機制這些重大生命科學領域方面的應用將會越來越大,。功能研究型單細胞多組學測序技術結(jié)合了CRISPR基因編輯技術, 深度挖掘基因表達調(diào)控與細胞功能。成都scRNA單細胞多組學商業(yè)化服務

機體為響應各種應激,，其細胞會從一種功能“狀態(tài)”轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N功能“狀態(tài)”,；當細胞在不同狀態(tài)之間轉(zhuǎn)變時，往往會經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄重組,，導致一些基因被“沉默”,，一些基因被重新“喚醒”，但純化這些瞬態(tài)細胞進行研究是很困難或不可能的,；scRNA-seq擬時序分析可以讓我們在不需要純化的情況下查看這些細胞狀態(tài),。擬時序分析，即根據(jù)不同細胞亞群基因表達量隨時間的變化情況,，構(gòu)建細胞譜系發(fā)育,，但這里的時間并不是真時間，而是一個虛擬的時間,，是指的細胞與細胞之間的轉(zhuǎn)化和演替的順序和軌跡,。即使在同一個樣本中，也會存在多種不同的細胞形態(tài),。因此,，不論測定了多少樣本，我們都可以采用擬時序分析對樣本中的細胞轉(zhuǎn)化和變化進行描述,。蘇州BD單細胞多組學單細胞多組學技術可在同一細胞中捕獲分析兩種以上的組學信息,包括轉(zhuǎn)錄組,、基因組、表觀基因組,、蛋白組等,。

空間轉(zhuǎn)錄組測序的數(shù)據(jù)分析基本分為三個階段：1.數(shù)據(jù)的預處理部分；2.Spot點陣的分群與定義,；3.Spot分群的功能與生物學價值,。每一個部分都不可或缺，其結(jié)果都對后續(xù)的分析結(jié)果有重要影響,。由于空間轉(zhuǎn)錄組的序列結(jié)構(gòu)與單細胞轉(zhuǎn)錄組測序的左端序列結(jié)構(gòu)是非常接近的，都是Cellbarcode/SpotBarcode+UMI+捕獲區(qū)域這樣的設計。右端普遍為捕獲的RNA序列,。因此采用單細胞的原始數(shù)據(jù)過濾策略即可,，左端可以考慮切下捕獲區(qū)域前的序列區(qū)域作為后續(xù)分析用的序列以減少分析負荷。隨后,，采用10X官方的Spatialranger的策略進行后續(xù)分析,，解析出位于空間位置中的有效的Spot表達矩陣。

當蜂巢孔內(nèi)同時落入細胞和磁珠后,，接下去可以往BDCartridge板中加入細胞裂解液對細胞進行裂解,，使細胞內(nèi)的RNA與磁珠上的標簽進行結(jié)合，完成每個細胞內(nèi)RNA的捕獲和標記,。這時,，再將捕獲了RNA的磁珠進行回收，待所有質(zhì)控結(jié)果確認通過后就可以進行后續(xù)的RNA反轉(zhuǎn)錄,、cDNA第二鏈合成等實驗操作,。而BDCartridge板則需要再進行一次成像，獲得磁珠收集后的掃描圖,，判斷磁珠是否已經(jīng)被有效收集,。根據(jù)每一步的質(zhì)控結(jié)果，烈冰科技（NovelBio）單細胞測序?qū)嶒瀳F隊會根據(jù)單細胞分選的實驗結(jié)果生成實驗總結(jié)報告,，判斷每一步驟是否通過質(zhì)控,，并得到捕獲的單細胞數(shù)量以及雙細胞比例，對整個實驗進行總結(jié)評估,。若所有過程通過質(zhì)控,，實驗樣本即可進行下一步實驗操作。隨著單細胞多組學的不斷進步, 研究者將有機會在單細胞分辨率下進一步理解個體發(fā)育以及疾病發(fā)展機制,。

針對單細胞測序的細胞數(shù)量判斷環(huán)節(jié)：主要是對細胞數(shù)量,、基因表達量、測序質(zhì)量進行整體描述,。過濾標準：由于細胞破碎后游離RNA會釋放到環(huán)境或孔中,，并且測序中也會存在一些死細胞，導致數(shù)據(jù)存在background值,。因此,，我們需要設定一定的標準來過濾掉假細胞或死細胞。以10×Genomics為例,，細胞數(shù)量判斷主要通過分析UMICounts-Barcode曲線斜率拐點,，當存在多個斜率拐點的時候，結(jié)合預期UMI=500時的細胞數(shù)量進行過濾,。當斜率拐點低于UMI=500的時候,，選擇UMI=500作為細胞的判斷的標準；否則，選擇和預期細胞數(shù)量非常接近的拐點作為細胞判斷的位置,。這樣我們能夠有效獲得真實的并且在基因數(shù)量上可以分析的數(shù)據(jù),。烈冰測序數(shù)據(jù)分析平臺，不依賴已有物種信息,，可研究非模式物種,，針對不同平臺的數(shù)據(jù)，制定多套流程,。廣州高通量測序單細胞多組學測序價格

單細胞技術從 2009 年發(fā)展到現(xiàn)在,，研究范圍不再局限于轉(zhuǎn)錄組，擴展到了基因組,、免疫組,、蛋白組等多組學水平。成都scRNA單細胞多組學商業(yè)化服務

轉(zhuǎn)錄組學和蛋白質(zhì)組學都是獲得基因表達情況的重要工具,，從生物學角度上看,，轉(zhuǎn)錄組表示了基因表達的中間狀態(tài)，可以反映諸如轉(zhuǎn)錄調(diào)控,、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的機理,；而蛋白質(zhì)是生物體直接的功能執(zhí)行者，因而對其表達水平的研究有著不可替代的優(yōu)勢,。要探究生物體疾病機理,、脅迫機制，精確研究重要基因的表達模式和調(diào)控機理,，只有聯(lián)合轉(zhuǎn)錄組學和蛋白組學表達量數(shù)據(jù)對生物樣本進行系統(tǒng)研究,，才能真正觀察到mRNA-蛋白質(zhì)關聯(lián)性，進而從整體上解釋生物學問題,。成都scRNA單細胞多組學商業(yè)化服務

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