血小板裂解液解凍后請(qǐng)立即進(jìn)行培養(yǎng)基的配制,，配置好的培養(yǎng)基在2-8°C環(huán)境下保存并盡快使用，不建議超過21天,。如解凍后的原瓶無法全部使用,，建議按需分裝成合適的小瓶中進(jìn)行-20°C保存一旦產(chǎn)品瓶或袋經(jīng)過初始解凍過程，建議盡快將產(chǎn)品置于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,。盡管對(duì)于儲(chǔ)存在2-8°C的準(zhǔn)備好的含有hPL的培養(yǎng)基,，Sexton的內(nèi)部測(cè)試有效期為21天，但建議客戶進(jìn)行內(nèi)部驗(yàn)證研究,，以確定其基于血小板裂解液的完整培養(yǎng)基的有效期,，使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加劑等變量可能會(huì)縮短或延長(zhǎng)完整培養(yǎng)基產(chǎn)品的有效期。用血液里的血小板濃縮物反復(fù)冷凍,、解凍和超聲處理可制備成人血小板裂解液,。NK細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液生產(chǎn)商

目的制備高含量細(xì)胞因子的血小板裂解液(PL).方法采用反復(fù)凍融法[-80℃~37℃凍融3次(凍24h/次)]和超聲法(285W,每次超聲處理5s停止5s,共10次)處理10份單**小板制劑(30mL/份),ELISA法對(duì)細(xì)胞因子,血小板衍生長(zhǎng)因子(PDGF)-AA,PDGF-AB,PDGF-BB,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1),血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165(VEGF165)檢測(cè),同時(shí)將2種方法制備的PL按10%比例加入常規(guī)培養(yǎng)基DMEM/F12培養(yǎng)第5代人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞,觀察傳至第7代細(xì)胞增殖情況,并與FBS液培養(yǎng)(組)比較.結(jié)果血小板保存3d后制備成的PL各因子含量均升高。無沉淀血小板裂解液使用說明人源血小板裂解液適合應(yīng)用在多種來源的間充質(zhì)原代干細(xì)胞培養(yǎng)過程,。

血小板中含有很多不同的細(xì)胞生長(zhǎng)因子,，包括PDGF,VEGF，EGF等,，實(shí)踐證明,，血小板分泌的細(xì)胞生長(zhǎng)因子能夠?qū)Χ喾N細(xì)胞起到支持生長(zhǎng)的作用，可以完全替代胎牛血清（FBS）甚至于在支持一些細(xì)胞培養(yǎng)的效果上優(yōu)于FBS,。本產(chǎn)品是將多人份濃縮血小板混合后裂解而成,，產(chǎn)品均一性好，經(jīng)過了嚴(yán)格安全性有效性質(zhì)量檢控,。人血小板裂解液能夠支持包括間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化,，成脂分化，造血干細(xì)胞以及誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞的生長(zhǎng)等,。是這些細(xì)胞公認(rèn)的動(dòng)物源血清替代品,。

MSCs在添加10%血小板裂解液和不同濃度肝素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，隨后使用MTT法評(píng)估增殖,。脂肪組織源性間充質(zhì)干細(xì)胞（AT-MSC）和骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSC）培養(yǎng)的過程中,，如果使用的UFH濃度低于0.61IU/mL或者使用Enoxaparin（LMWH）濃度低于0.024mg/mL(2.4IU/mL)時(shí)培養(yǎng)液均呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)（灰色背景），而肝素濃度過高則對(duì)細(xì)胞增殖的負(fù)面影響明顯且以劑量依賴的方式提高,。備注肝素濃度單位換算：肝素濃度國際單位(IU)衡量,，1IU國際單位是指在規(guī)定的條件下,，將1ml全血延長(zhǎng)凝血3分鐘所需的量：1mg大約相當(dāng)于100IU的肝素。血小板裂解液是由富含血小板的血漿純化萃取而成,其中包含很多不同的細(xì)胞生長(zhǎng)因子,。

細(xì)胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時(shí),。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基（即MEMα、GlutaMAX補(bǔ)充劑,、無核苷）和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細(xì)胞培養(yǎng)基,。3.應(yīng)在完全細(xì)胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝,。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號(hào)PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號(hào)PL-SUP-500-XF).4.完整細(xì)胞培養(yǎng)基可在4°C下儲(chǔ)存,，并穩(wěn)定約4周儲(chǔ)存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標(biāo)簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的,。ELAREMPrime在使用前在-20°C（或在-80°C進(jìn)行長(zhǎng)期儲(chǔ)存）冷凍儲(chǔ)存時(shí)穩(wěn)定。解凍后,，建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍,。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán)，因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加,。使用時(shí),，只需預(yù)熱一份完整的細(xì)胞培養(yǎng)基，并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C,。血小板裂解液進(jìn)口是不是很難呢,？賽多利斯血小板裂解液常見問題

用血液里的血小板濃縮物反復(fù)冷凍，超聲處理可制備成人血小板裂解液,。NK細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液生產(chǎn)商

通過BODIPY染色的脂肪滴來反映的成脂分化情況,，發(fā)現(xiàn)兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時(shí)，分化成脂細(xì)胞的百分比明顯降低,。同樣的,，通過茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況，高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,，特別是在脂肪組織來源的MSCs中,，UFH肝素高濃度對(duì)成脂和成骨分化誘導(dǎo)的負(fù)面影響較為明顯?；谏鲜鼋Y(jié)果,，我們現(xiàn)在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴(kuò)增的必要性，在購買血小板裂解液后,，用戶應(yīng)結(jié)合自己的實(shí)驗(yàn)條件去合理的選擇合適的肝素濃度，而肝素濃度的選擇應(yīng)該在有效防止含血小板裂解液培養(yǎng)基凝膠形成的基礎(chǔ)上盡量降低,，以減少肝素對(duì)于MSCs的增殖能力,、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位（CFU-F）、MSCs體外分化等的影響,。NK細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液生產(chǎn)商

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