對于一些較難轉(zhuǎn)染的細胞,,如原代細胞,、干細胞、不分化的細胞等,,使用慢病毒載體,,能da da提高目的基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且目的基因整合到宿主細胞基因組的幾率da da增加,,能夠比較方便快捷地實現(xiàn)目的基因的長期,、穩(wěn)定表達。SIRION Biotech 的首席執(zhí)行官 Christian Thirion 博士說,,SIRION 的貢獻是優(yōu)化病毒載體基因的轉(zhuǎn)導(dǎo),,從而在zhi liao患者中獲得更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和長期的基因表達。此外,,通過降低生產(chǎn)細胞產(chǎn)品所需的慢病毒載體的數(shù)量,,使用諸如 LentiBOOST 之類的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑有助于降低生產(chǎn)成本。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率,。LentiBOOST 是一種無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,用于臨床前和臨床應(yīng)用,。慢病毒轉(zhuǎn)染是什么呢,?增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)protocol
人間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達,并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望,。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,,但它未被批準用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化,。因此,,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究,。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。T細胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原理慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)特點是什么呢,?
LentiBOOST可廣泛應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細胞類型,,包括CD34+造血干細胞(HSCs),間充質(zhì)干細胞(MSCs),,神經(jīng)干細胞,,原代T細胞,NK細胞和成纖維細胞等,,對于難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠T細胞亦有效,。已成為改進體外基因zhi liao和CAR-T細胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的理想選擇。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效,、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型,、非受體依賴性的表面活性劑,,通過降低細胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,,促進慢病毒與細胞膜的融合,,提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。目前LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實驗中,,并有相關(guān)藥物已上市銷售,。
影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個關(guān)鍵參數(shù)是ganran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個細胞ganran的病毒粒子個數(shù),,病毒粒子滴度以ganran單位(IU)/mL或TU/mL表示。慢病毒的ganran能力隨細胞類型的不同而不同,,因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI,。MOI值越大,慢病毒ganran上的可能性也越大,,ganran效率越高,,但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大,,也說明細胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo),。SIRIONBiotech為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的GMP材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。哪個牌子的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑比較好?
研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響,。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力,。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,,良好的生長狀態(tài)是達到高gan ran效率的保證,,一般選擇細胞形態(tài)較好、輪廓清晰,、處于對數(shù)生長期的細胞進行g(shù)an ran可提高gan ran效率,。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物,!慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成,。免疫細胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實驗技巧
慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)是什么呢?增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)protocol
SIRION Biotech成立于2005年,,旨在領(lǐng)導(dǎo)下一代病毒載體技術(shù),,用于基因和細胞zhi liao以及疫苗開發(fā)。現(xiàn)在,,SIRION提供了一個基于慢病毒,、腺病毒和類腺病毒的quan mian的病毒載體技術(shù)平臺,加速了基因zhi liao研究和藥物開發(fā),。SIRION正成為這一增長領(lǐng)域的優(yōu)先合作伙伴,。從早期臨床階段I/II到晚期臨床階段III的臨床試驗中使用了LentBoost并證明了在改善zhi liao載體的轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的臨床成功。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率,。LentiBOOST 是一種無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,用于臨床前和臨床應(yīng)用,。作為一種普遍作用的(受體非依賴型)佐劑,,可應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細胞類型,CD34+造血干細胞(HSCs),、原代 T 細胞和 NK 細胞等,,對難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠 T 細胞亦有效。LentiBOOST 已成為改進體外 (ex vivo) 基因zhi liao和 CAR-T 細胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的選擇,。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,歡迎咨詢上海曼博生物!增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)protocol