材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾,，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES,，調(diào)pH值到7.4，定容至1L,，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基,。哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑不含動物源成分,？科研級PEI轉(zhuǎn)染試劑用途

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度,，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）,。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性,。細胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細胞,。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染,。如果細胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細胞,，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。25KPEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效率哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比更高,？

瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物,！

細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學(xué)實驗室中常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染,。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體,，以慢病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見,，其侵染效率可以達到90%以上,，但常因安全性等問題，很多實驗室對其敬而遠之,。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因，無論哪一種都需要特定的設(shè)備,，且一分錢一分貨,，性能好的價格也都相對較高。哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比比較高,？

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上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務(wù),，以創(chuàng)新和為價值理念,，通過自身研發(fā)團隊，以及與國內(nèi)外專業(yè)科研團隊強強聯(lián)合,，不斷創(chuàng)新,，為生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產(chǎn)品和服務(wù)。生物醫(yī)學(xué)工程是綜合應(yīng)用生命科學(xué)與工程科學(xué)的原理和方法,，從工程學(xué)角度在分子,、細胞、組織,、乃至整個人體系統(tǒng)多層次認識人體的結(jié)構(gòu),、功能和其他生命現(xiàn)象，研究用于防病,、治病、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料,、制品,、裝置和系統(tǒng)技術(shù)的總稱。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！科研級PEI轉(zhuǎn)染試劑用途