影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個(gè)關(guān)鍵參數(shù)是ganran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個(gè)細(xì)胞ganran的病毒粒子個(gè)數(shù),病毒粒子滴度以ganran單位(IU)/mL或TU/mL表示。慢病毒的ganran能力隨細(xì)胞類型的不同而不同,,因此每種不同的細(xì)胞類型需要不同的MOI,。MOI值越大,慢病毒ganran上的可能性也越大,,ganran效率越高,,但對細(xì)胞的毒性也越大。另外細(xì)胞需要的MOI值越大,,也說明細(xì)胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo),。SIRIONBiotech為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗(yàn)提供良好的GMP材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST目前在美國和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用,。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,歡迎咨詢官方代理商上海曼博生物,!也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio有效果比較好的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑嗎,?研究級慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)應(yīng)用
目前的基因&細(xì)胞zhi liao主要采用病毒和非病毒兩種載體形式。根據(jù)統(tǒng)計(jì),,病毒載體約占進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目 65%,;而慢病毒因無嚴(yán)重的臨床事故出現(xiàn)成為目前相對安全的病毒載體選擇之一。慢病毒載體具有能gan ran非分裂期細(xì)胞,、容納外源性目的基因片段大,、穩(wěn)定性強(qiáng)、免疫原性小等特點(diǎn),。大量研究表明,,相對其他病毒載體,慢病毒gan ran效率高,,更容易gan ran一些較難gan ran的組織和細(xì)胞,,其效率一般可以達(dá)到 30%-95% 以上。病毒顆的限制性攝取粒往往會降低基因或 shRNA 表達(dá)的成功率,,并要求應(yīng)用更高的病毒滴度,。然而,增加病毒數(shù)量以促進(jìn)表達(dá)可能會導(dǎo)致許多細(xì)胞類型的毒性副作用,,并帶來不必要的昂貴成本,。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物細(xì)胞的效率,。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,,歡迎咨詢曼博生物,!慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑盒什么試劑可以增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率呢?
基因zhi liao的臨床效果取決于細(xì)胞的高水平轉(zhuǎn)導(dǎo),雖可通過二次轉(zhuǎn)導(dǎo)或提高gan ran復(fù)數(shù)(multiplicityofinfection,MOI)增加轉(zhuǎn)導(dǎo)率,但延長體外培養(yǎng)時(shí)間可誘導(dǎo)干細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期而影響其分化增殖能力;提高gan ran復(fù)數(shù)會提高插入突變風(fēng)險(xiǎn)和增加生產(chǎn)成本,。因此,在不斷改造慢病毒以增加安全性的同時(shí),提高病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率是亟待解決的難題,。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)過程的限制因素包括病毒黏附、入胞,、細(xì)胞運(yùn)輸及固有免疫作用,。通過引入異源病毒包膜構(gòu)建新的偽型載體和/或在轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中添加病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑(transductionenhancers,TEs),可有效克服LVVs轉(zhuǎn)導(dǎo)的障礙,增加轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞比例,從而達(dá)到臨床需要的轉(zhuǎn)導(dǎo)水平。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,!
Lentiboost可增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,高達(dá)90%以上,,研究證明對于細(xì)胞增殖無不良影響,,且在T細(xì)胞中觀察到一定的促增殖效果??蓽p少M(fèi)OI,,從而降低物料成本。均勻增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的數(shù)量,,但不會過度增加單個(gè)細(xì)胞病毒載體拷貝數(shù)(VCN),,符合FDA/EMA對ATMP產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效,、無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型,、非受體依賴性的表面活性劑,,通過降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),,促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中,,并有相關(guān)藥物已上市銷售,。為提供更好的服務(wù),上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH,。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor,,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負(fù)責(zé)。什么可以增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的速度,?
產(chǎn)品簡介:LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型,、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細(xì)胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),,促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。目前LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑在美國和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中,,并有相關(guān)藥物已上市銷售。產(chǎn)品特點(diǎn):1.增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,,可高達(dá)90%—提高zhi liao蛋白表達(dá)量,,有利于取得臨床試驗(yàn)成功2.減少M(fèi)OI低至2倍,從而降低COGS(Costofgoodssold)——減少Lentivirus的用量和物料成本3.控制單個(gè)細(xì)胞中的病毒載體拷貝數(shù)(VCN,,VirusCopyNumber)——符合FDA/EMA對ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)4.易于使用——無需改變現(xiàn)有轉(zhuǎn)導(dǎo)流程,,兼容已經(jīng)開發(fā)流程5.提供研究級和GMP級——GMP級具有臨床試驗(yàn)的所有必備文件6.30多種應(yīng)用LentiBOOST的藥物已在美國和歐洲進(jìn)入臨床試驗(yàn)(PhaseIII和PhaseI/II)階段——加速了IND文件歸檔慢病毒載體是一種源于人類免疫缺陷病毒的基因載體.自動(dòng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)技巧
慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可以使用哪些試劑?研究級慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)應(yīng)用
研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,,且對細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒有劑量依賴性的不良影響,。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的組合dai biao了一種有價(jià)值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力,。細(xì)胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,,良好的生長狀態(tài)是達(dá)到高gan ran效率的保證,一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好,、輪廓清晰,、處于對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)an ran可提高gan ran效率。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)技術(shù)文章,,歡迎咨詢上海曼博生物,!也可關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio研究級慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)應(yīng)用