穩(wěn)定轉染方法：

1.接種細胞：轉染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）,。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。

2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。

3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。

4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達,。

歡迎咨詢PEI產品,！ 哪個品牌的PEI轉染試劑比較好呢?不同分子量PEI轉染試劑好用么

Polysciences是一家化學品制造公司，產品廣泛應用于各個科研領域,。公司成立于1961年,，起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案，幫助科學家揭示未知領域,。隨后,，開拓了在病理（組織研究）應用產品，使組織除了石蠟包埋外,，還能夠包埋在塑料塊中,；開發(fā)染料和染色劑，以實現更好的樣品觀測方式,。與government合作,，開發(fā)了用于診斷試劑盒應的聚合物微球,。與美國國家cancer中心合作，開發(fā)天然產物分離和純化產品,，并用于紫杉醇的初步臨床試驗,。繼而開發(fā)出超順磁珠，用于DNA,、蛋白質和肽的研究,。Polysciences的高純度單體和聚合物產品在醫(yī)療器械中有許多應用，并不斷開發(fā)和增強其性能,。近期業(yè)務擴展到電子產品,，Polysciences的精密微粒子產品拓展了納米技術應用中測量精度。公司秉承為應用而研發(fā),，目前已擁有超過3000種產品,。PolysciencesInc.致力于提供先進的技術、制造能力和技術支持,，幫助客戶實現他們的目標,。上海曼博生物是Polysciences官方授權du jia代理商，更多關于轉染試劑相關問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！上海曼博生物是Polysciences官方授權du jia代理商，更多關于轉染試劑相關問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！化學合成PEI轉染試劑使用注意事項PEI轉染試劑的殘留檢測方法怎么開發(fā)呢?

線性PEI轉染試劑是一種陽離子聚合物，分子量25000,，它能與核酸形成復合物,，并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉染試劑廣適用于常見細胞系,，如HEK-293,、HEK293T、HepG2,、Hela、CHO-K1,、COS-1,、COS-7、NIH/3T3和Sf9等,。該試劑即使在有血清存在的情況下,，它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉染試劑具有如下優(yōu)點：優(yōu)越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質量控制每批次線性PEI轉染試劑均經過轉染測試,。將eGFP表達質粒（GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01）用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,，轉染16h后,，超過95%的細胞表達eGFP。更多關于PEI轉染試劑相關的產品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物,！

穩(wěn)定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）,。調整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,，歡迎咨詢上海曼博生物！也歡迎關注我們的公眾號：Mine-Bio哪個品牌的PEI轉染試劑性價比較高,？

穩(wěn)定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。Polysciences PEI轉染試劑怎么樣？不同分子量PEI轉染試劑好用么

哪個品牌的PEI轉染試劑比較好?不同分子量PEI轉染試劑好用么

材料：質粒DNA指數生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾,，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES,，調pH值到7.4,，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當的完全培養(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染,。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。不同分子量PEI轉染試劑好用么