細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中常規(guī)的研究手段,，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染,，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體,，以慢病毒,、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見，其侵染效率可以達(dá)到90%以上,，但常因安全性等問題,，很多實(shí)驗(yàn)室對(duì)其敬而遠(yuǎn)之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因,，無論哪一種都需要特定的設(shè)備，且一分錢一分貨,，性能好的價(jià)格也都很性感,。更多Polysciences PEI相關(guān)產(chǎn)品內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司！也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-Bio,。如想申請(qǐng)PEI試用裝,，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,，即可參加,！?PEI試用裝在哪里可以申請(qǐng)？天津上手簡單的PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

產(chǎn)品簡介：Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級(jí)的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液,，由PEI MAX配置而成,，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn),。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物,，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,，并且Transporter 5-DNA 復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉(zhuǎn)染效率,。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn),。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293,、CHO、COS,、HELA,、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細(xì)胞系,，可作用于大到135,000個(gè)核苷酸的質(zhì)粒,，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。 Transporter 5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時(shí)間,，加快項(xiàng)目進(jìn)度,。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測(cè)，確保品質(zhì),，在新藥研發(fā)過程中是一款快速,、重復(fù)性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,。產(chǎn)品特點(diǎn)：非GMP,，研究級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液；高轉(zhuǎn)染效率,；無縫過渡到MAXgene GMP,；易放大，可預(yù)測(cè)產(chǎn)量,；用于工藝開發(fā),，臨床前和早期臨床研究。如想申請(qǐng)PEI試用裝,，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio,，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加,！轉(zhuǎn)染試劑PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝可支持工藝開發(fā)PEI轉(zhuǎn)染試劑可以轉(zhuǎn)染哪些細(xì)胞,？

接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí)，請(qǐng)用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑,，歡迎咨詢曼博生物！想申請(qǐng)PEI試用裝,，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio,，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加,！

PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗(yàn),。當(dāng)初試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)很有限，被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,，選擇PEI,，以至于相當(dāng)長的時(shí)間內(nèi)，轉(zhuǎn)染試驗(yàn)都不順利,。下面是幾點(diǎn)關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點(diǎn)：1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,，所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時(shí)，一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,，順序不可錯(cuò),，輕微混勻，靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時(shí)，一定要換液,！換含有FBS的完全培養(yǎng)液,！因?yàn)镻EI對(duì)細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗(yàn)涉及到穩(wěn)定篩選，建議把血清濃度適當(dāng)提高,。PS：事實(shí)證明,，PEI是可行的，已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,，可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司！如想申請(qǐng)PEI試用裝,，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio,，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加,！23966-1和24765-1的PEI轉(zhuǎn)染試劑在哪里買呢,？

準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),，請(qǐng)用圓底聚丙烯管,，例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,！如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio,，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,，即可參加,！?PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種合成的聚乙烯亞胺聚合物。PEI MAXPEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝適用于CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染

哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑質(zhì)量好,？天津上手簡單的PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，總體積如表1所示，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí)，請(qǐng)用圓底聚丙烯管,，例如Falcon5mL/14mL離心管,。轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。孵育細(xì)胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè),。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定檢測(cè)時(shí)間,。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,！近期還可申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝！天津上手簡單的PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝