穩(wěn)定轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細胞濃度,,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序),。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。近期還有PEIfree申請活動,,歡迎咨詢上海曼博生物,!歡迎關注我們的公眾號Mine-bio,回復“PEI轉染試劑”即可領??!哪個品牌的PEI轉染試劑比較好?血清兼容PEI轉染試劑價格多少
抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質,,轉染試劑、病毒轉導試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務,,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化;以及提供藥物開發(fā)和探索的抗體文庫定制和商業(yè)授權靈活的CHO工程細胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn),,以此希望幫助國內(nèi)科研工作者快速地接觸世界范圍內(nèi)的技術,,分享研發(fā)工具進步帶來的技術紅利,終為細胞,、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫(yī)學行業(yè)等乃至整個生命科學行業(yè)賦能,!更多關于PEI轉染試劑相關產(chǎn)品技術問題,歡迎咨詢上海曼博生物,。PolysciencesPEI轉染試劑價格用PEI轉染時,,一般和DNA的比例會是多少?
PEIMAX粉末配置方法:1)將1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃燒杯中,;2)放入攪拌轉子,,放置于磁力攪拌器上,設置攪拌程序以形成一個較小的漩渦,;3)等待PEIMAX40K完全溶解,,通常需要5分鐘左右;4)用25mL塑料移液管加入1N氫氧化鈉滴定至pH6.9~7.1;5)如果不小心超過7.1,,則使用1N的鹽酸和新的塑料移液管將pH重新滴定至6.9~7.1,;6)將溶液轉移到1L玻璃量筒中,加入水定容至1L,;7)用無菌真空過濾膜過濾配制的轉染試劑溶液,;8)按需分裝,4°C儲存(切記不可冷凍),;注:未經(jīng)配制的粉末有效期為2年,。配置成液體后分裝在合適的瓶子中,并且保存在4℃的轉染試劑將可在6個月之內(nèi)保持性能,。如jin用于蛋白定性研究,,分裝的轉染試劑可延長有效使用期至1年。如想申請PEI試用裝,,請關注我們的公眾號:Mine-bio,,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加,!
穩(wěn)定轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細胞濃度,,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關于PEI轉染試劑相關產(chǎn)品技術問題,歡迎咨詢上海曼博生物,!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-Bio有哪些品牌的PEI轉染試劑?
上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,,依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內(nèi)客戶群體,生命科學領域一站式供應鏈體系,,以及高風險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢,,曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經(jīng)過同行驗證過的產(chǎn)品和技術,,引入中國市場,,開發(fā)、孵育和推廣,,致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術帶入中國,,集中在為細胞/基因領域、/免疫,,抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質,,轉染試劑、病毒轉導試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化,。上海曼博生物是Polysciences官方授權dujia代理商,,更多關于轉染試劑相關問題,歡迎咨詢上海曼博生物,!Polysciences是一家化學品制造公司,產(chǎn)品廣泛應用于各個科研領域,。公司成立于1961年,,起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案,幫助科學家揭示未知領域,。歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“申請PEI”,即可參加活動,!更多關于Polysciences PEI轉染試劑相關產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢上海曼博生物!有哪些不錯的PEI轉染試劑,?血清兼容PEI轉染試劑價格多少
用PEI轉染時,,一般和DNA的比例是多少?血清兼容PEI轉染試劑價格多少
細胞轉染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段,目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導入到靶細胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法:生物轉染,物理轉染和化學轉染,。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體,,以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見,,其侵染效率可以達到90%以上,,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之,。物理轉染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因,無論哪一種都需要特定的設備,,且一分錢一分貨,,性能好的價格也都相對較高。近期還有PEIfree申請活動,,歡迎咨詢上海曼博生物,!歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“申請PEI”,,即可參加活動,!更多關于Polysciences PEI轉染試劑相關產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物,!血清兼容PEI轉染試劑價格多少