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抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質(zhì),,轉(zhuǎn)染試劑、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉(zhuǎn)化,;以及提供藥物開發(fā)和探索的抗體文庫定制和商業(yè)授權(quán)靈活的CHO工程細(xì)胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn),以此希望幫助國內(nèi)科研工作者快速地接觸世界范圍內(nèi)的技術(shù),,分享研發(fā)工具進(jìn)步帶來的技術(shù)紅利,,終為細(xì)胞,、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫(yī)學(xué)行業(yè)等乃至整個生命科學(xué)行業(yè)賦能!更多Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑等相關(guān)產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢上海曼博生物,!近期還有PEI試用裝申請活動,可關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,,后臺回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”參加活動PEI轉(zhuǎn)染試劑是不含動物源成分的嗎,?速溶型PEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)化要素
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)(不建議用胰酶),。調(diào)整細(xì)胞濃度,,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%,。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序),。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,,請用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,,去除生長培養(yǎng)基,,替換成無血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。若想咨詢更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)信息,歡迎咨詢上海曼博生物,!也歡迎關(guān)注公眾號Mine-bio回復(fù)“PEI申請”申請試用裝,!線性PEI轉(zhuǎn)染試劑用途PEI轉(zhuǎn)染試劑在使用時出現(xiàn)沉淀的原因是什么?
上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務(wù),以創(chuàng)新和為價值理念,,通過自身研發(fā)團隊,,以及與國內(nèi)外專業(yè)科研團隊強強聯(lián)合,,不斷創(chuàng)新,為生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產(chǎn)品和服務(wù),。生物醫(yī)學(xué)工程是綜合應(yīng)用生命科學(xué)與工程科學(xué)的原理和方法,,從工程學(xué)角度在分子、細(xì)胞,、組織,、乃至整個人體系統(tǒng)多層次認(rèn)識人體的結(jié)構(gòu)、功能和其他生命現(xiàn)象,,研究用于防病,、治病、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料,、制品,、裝置和系統(tǒng)技術(shù)的總稱。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,!近期還有PEIfree申請活動,歡迎咨詢上海曼博生物,!歡迎關(guān)注我們的公眾號Mine-bio,,回復(fù)“PEI轉(zhuǎn)染試劑”即可領(lǐng)取,!
PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗,。當(dāng)初試驗經(jīng)費很有限,被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,,選擇PEI,,以至于相當(dāng)長的時間內(nèi),轉(zhuǎn)染試驗都不順利,。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,,順序不可錯,,輕微混勻,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,,一定要換液,!換含有FBS的完全培養(yǎng)液!因為PEI對細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,,建議把血清濃度適當(dāng)提高,。PS:事實證明,PEI是可行的,,已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了,。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio ,,私信回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請“即可申請PEI試用裝,!有哪些品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑?
注意事項質(zhì)粒質(zhì)量:請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)),。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性,。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞,。確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌、或支原體污染,。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,,請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞,。更多Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑等相關(guān)產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢上海曼博生物!近期還有PEI試用裝申請活動,,可關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,,后臺回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”參加活動PEI轉(zhuǎn)染試劑有沒有毒性?支鏈PEI轉(zhuǎn)染試劑價格
用PEI轉(zhuǎn)染試劑為什么會出現(xiàn)沉淀,?速溶型PEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)化要素
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