接種細胞：轉染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關于Polysciences PEI轉染試劑,，歡迎咨詢上海曼博生物！也可關注公眾號：Mine-bio,，私信“PEI申請”,，申請PEI 試用裝！PEI轉染試劑能用于體內(nèi)轉染么,？高質量PEI轉染試劑試用裝效果怎么樣

材料：質粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,，加入20ml1M的HEPES,，調pH值到7.4，定容至1L,，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基,。歡迎關注：Mine-bio,，回復“申請PEI”即可申領試用裝！湖北慢病毒（LV）包裝PEI轉染試劑試用裝用PEI轉染試劑時出現(xiàn)沉淀什么原因?

PEI在于可以應用于體內(nèi)試驗,。當初試驗經(jīng)費很有限,，被逼無奈只能放棄脂質體2000，選擇PEI,，以至于相當長的時間內(nèi),，轉染試驗都不順利。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質體2000的說明書,，所用質粒盡量去內(nèi)2.轉染時,，一定要把PEI+DMEM加入到質粒+DMEM中，順序不可錯,，輕微混勻,，靜止20min3.轉染后4小時,，一定要換液！換含有FBS的完全培養(yǎng)液,！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,，建議把血清濃度適當提高。PS：事實證明,，PEI是可行的,，已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了。更多關于PEI轉染試劑相關的信息,，可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司,！可申請PEI試用裝，曼博生物公眾號：Mine-bio,，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加,！

PEIMAX——高產(chǎn)工業(yè)化轉染試劑-高度濃縮,，可制備大量轉染試劑Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品,，因其較高的轉染效果,，已廣泛應用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,，每相隔二個碳原子,，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體,。PEI可用作轉染試劑,，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉染試劑,。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,，大量科學家選擇PEIMAX，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑,。多年以來,，經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻表明，在HEK293,、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉染效率,，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高，可靠性強,。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續(xù)的高基因表達細胞體系,，實現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過度。而且與大多數(shù)細胞轉染方案相比,，使用PEIMAX至少可降低40%轉染成本（部分案例可降低90%轉染成本）,。歡迎關注：Mine-bio,，回復“申請PEI”，即可申領試用裝,！MAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉染試劑,。

產(chǎn)品簡介：Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品,，因其較高的轉染效果,，已廣泛應用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,，每相隔二個碳原子,，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”體(protonsponge),。PEI可用作轉染試劑,，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明,，分子量為25000的線性PEI即Polysciences23966（PEI25K）轉染效率表現(xiàn)優(yōu)良,。產(chǎn)品特點：適用于生產(chǎn)mABs、rAbs,、bsABs和病毒載體(AVV,、LV、BEV),；在HEK293,、CHO和Sf9細胞系中高度有效；適用于從研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的各個階段,；可預測,，可大規(guī)模生產(chǎn)；兩周內(nèi)即可生成大量目標蛋白或病毒,；高轉染效率,；大量已發(fā)表的文獻支持。Polysciences轉染與遞送相關產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio,，相關產(chǎn)品標簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences,，后續(xù)購買請認準備新品牌。有誰用過Polysciences的PEI轉染試劑,？低成本PEI轉染試劑試用裝歷史悠久

用PEI轉染試劑時,，一般和DNA的比例是多少？高質量PEI轉染試劑試用裝效果怎么樣

產(chǎn)品簡介：Transporter 5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉染試劑）溶液,，由PEI MAX配置而成,，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,，這些復合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞,，并且Transporter 5-DNA 復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉染效率,。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn),。Transporter 5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293,、CHO、COS,、HELA,、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細胞系,，可作用于大到135,000個核苷酸的質粒,，所以較大的質粒也可以成功地轉染,。 Transporter 5可節(jié)省試劑準備時間,，加快項目進度,。經(jīng)過嚴格的性能檢測，確保品質,，在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復性好,、可用于批量產(chǎn)的轉染試劑,。產(chǎn)品特點：非GMP，研究級PEI轉染試劑溶液,；高轉染效率,；無縫過渡到MAXgene GMP；易放大,，可預測產(chǎn)量,；用于工藝開發(fā)，臨床前和早期臨床研究,?？缮暾圥EI試用裝，曼博生物公眾號：Mine-bio,，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加！高質量PEI轉染試劑試用裝效果怎么樣