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人間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達,,并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望,。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,,但它未被批準用于人體,,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,可以按照現(xiàn)行的GMP標準生產(chǎn),,且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑是用來干什么的,?詳述慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)
在病毒附著到宿主細胞后,,病毒RNA滲透進宿主細胞,并以此為模板,,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過程中,,RNA的兩端都進行了復(fù)制,產(chǎn)生了長末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,,每條鏈含有U3-R-U5序列,,然后雙鏈DNA被運送到細胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,,稱為原病毒,。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率,。LentiBOOST 是一種無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,用于臨床前和臨床應(yīng)用。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio詳述慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)什么試劑可以增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率呢?
SIRION Biotech成立于2005年,,旨在領(lǐng)導(dǎo)下一代病毒載體技術(shù),,用于基因和細胞zhi liao以及疫苗開發(fā)?,F(xiàn)在,,SIRION提供了一個基于慢病毒,、腺病毒和類腺病毒的quan mian的病毒載體技術(shù)平臺,加速了基因zhi liao研究和藥物開發(fā),。SIRION正成為這一增長領(lǐng)域的優(yōu)先合作伙伴,。從早期臨床階段I/II到晚期臨床階段III的臨床試驗中使用了LentBoost并證明了在改善zhi liao載體的轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的臨床成功。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率,。LentiBOOST 是一種無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,用于臨床前和臨床應(yīng)用,。作為一種普遍作用的(受體非依賴型)佐劑,,可應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細胞類型,CD34+造血干細胞(HSCs),、原代 T 細胞和 NK 細胞等,,對難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠 T 細胞亦有效。LentiBOOST 已成為改進體外 (ex vivo) 基因zhi liao和 CAR-T 細胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的選擇,。更多關(guān)于Sirion慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio
影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個關(guān)鍵參數(shù)是gan ran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個細胞gan ran的病毒粒子個數(shù),,病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示,。慢病毒的gan ran能力隨細胞類型的不同而不同,因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI,。MOI值越大,,慢病毒gan ran上的可能性也越大,gan ran效率越高,,但對細胞的毒性也越大,。另外細胞需要的MOI值越大,也說明細胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo),。SIRION Biotech 為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。更多關(guān)于 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!慢病毒轉(zhuǎn)染可以使用哪些試劑?
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,,直徑為80-120nm,,呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)、球形,。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了han ran細胞的類型),,再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶),。慢病毒han ran的xian zhu特點是han ran個體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前,,大多經(jīng)歷長達數(shù)年的潛伏期,之后緩慢發(fā)病,,因此這些病原體被稱為慢病毒,。慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 來源的一種病毒載體,慢病毒載體包含了包裝,、轉(zhuǎn)染,、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,是慢病毒載體系統(tǒng)的主要組成部分,。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒,、細胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有han ran力的病毒顆粒,,通過han ran細胞或huo ti組織,,實現(xiàn)外源基因在細胞或huo ti組織中表達。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,歡迎咨詢上海曼博生物,!也可了解由上海曼博生物代理的SIRION LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑產(chǎn)品,更多技術(shù)文章可關(guān)注曼博生物公眾號:Mine-bio新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,,稱為原病毒,。Merck慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)方案
慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的特點有哪些?詳述慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)
LentiBOOST是德國Sirion Biotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,,通過降低細胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,促進慢病毒與細胞膜的融合,,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。SIRION Biotech 為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發(fā),以及評估研究,。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方案,,目前美國和歐洲多個 Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗正在進行。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,!更多技術(shù)文章歡迎關(guān)注曼博生物公眾號:Mine-bio詳述慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)