PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗,。當初試驗經(jīng)費很有限,，被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000，選擇PEI,，以至于相當長的時間內(nèi),，轉(zhuǎn)染試驗都不順利,。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書，所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,，一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,，順序不可錯，輕微混勻,，靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,，一定要換液！換含有FBS的完全培養(yǎng)液,！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,，建議把血清濃度適當提高。PS：事實證明,，PEI是可行的,，已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了。近期還有PEIfree申請活動,，歡迎咨詢上海曼博生物,！歡迎關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“申請PEI”,，即可參加活動,！更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物,！誰知道Polysciences的轉(zhuǎn)染試劑怎樣,？低毒性PEI轉(zhuǎn)染試劑病毒產(chǎn)量

瞬時轉(zhuǎn)染方法：1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。4.孵育細胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達,。請自行確定適合檢測時間,。如想申請試用裝，請關(guān)注公眾號：Mine-bio,，回復(fù)“申請PEI”,，即可參加！線性PEI轉(zhuǎn)染試劑protocolPEI轉(zhuǎn)染試劑會不會有毒性,？

產(chǎn)品簡介：Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液,，由PEIMAX配置而成，采用0.1umPES無菌過濾器,，完全消除支原體污染風(fēng)險,。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞,，并且Transporter5-DNA復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,，有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,，可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO,、COS,、HELA、昆蟲（SF9,、SF21）等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒,，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染,。Transporter5可節(jié)省試劑準備時間，加快項目進度,。經(jīng)過嚴格的性能檢測,，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速,、重復(fù)性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。產(chǎn)品特點：非GMP,，研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液,；高轉(zhuǎn)染效率；無縫過渡到MAXgeneGMP,；易放大,，可預(yù)測產(chǎn)量；用于工藝開發(fā),，臨床前和早期臨床研究,。請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio

1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,。也可關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，查看更多技術(shù)文章,！想購買24765-1在哪里可以買,？

產(chǎn)品特點：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品,。相比于PEI25K,，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙酰化）,；2.鹽酸鹽形式,，具更高的水溶特性；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應(yīng)用領(lǐng)域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,，以固體粉末形式提供,，需用戶自行配置（詳情見使用方法）。也歡迎關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio,，查看更多詳情信息,！PEI轉(zhuǎn)染試劑可以轉(zhuǎn)染哪些細胞？線性PEI轉(zhuǎn)染試劑protocol

PEI轉(zhuǎn)染試劑使用的時候有什么注意事項,？低毒性PEI轉(zhuǎn)染試劑病毒產(chǎn)量

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio,，相關(guān)產(chǎn)品標簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences,，后續(xù)購買請認準備新品牌,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題，歡迎咨詢上海曼博生物!低毒性PEI轉(zhuǎn)染試劑病毒產(chǎn)量