PEIMAX粉末配置方法：1)將1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃燒杯中,；2)放入攪拌轉(zhuǎn)子,，放置于磁力攪拌器上,，設(shè)置攪拌程序以形成一個較小的漩渦；3)等待PEIMAX40K完全溶解，通常需要5分鐘左右,；4)用25mL塑料移液管加入1N氫氧化鈉滴定至pH6.9~7.1,；5)如果不小心超過7.1，則使用1N的鹽酸和新的塑料移液管將pH重新滴定至6.9~7.1,；6)將溶液轉(zhuǎn)移到1L玻璃量筒中,，加入水定容至1L；7)用無菌真空過濾膜過濾配制的轉(zhuǎn)染試劑溶液,；8)按需分裝,，4°C儲存（切記不可冷凍）；注：未經(jīng)配制的粉末有效期為2年,。配置成液體后分裝在合適的瓶子中，并且保存在4℃的轉(zhuǎn)染試劑將可在6個月之內(nèi)保持性能,。如jin用于蛋白定性研究,，分裝的轉(zhuǎn)染試劑可延長有效使用期至1年。
PEI轉(zhuǎn)染試劑如何做殘留檢測,？云南iPSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑

1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。歡迎關(guān)注公眾號：Mine-bio國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑用途無需昂貴設(shè)備,，PEI試劑實現(xiàn)經(jīng)濟高效率的基因轉(zhuǎn)染方案,。

PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗。當初試驗經(jīng)費很有限,，被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,，選擇PEI，以至于相當長的時間內(nèi)，轉(zhuǎn)染試驗都不順利,。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,，所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時，一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,，順序不可錯,，輕微混勻，靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,，一定要換液,！換含有FBS的完全培養(yǎng)液！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,，建議把血清濃度適當提高,。PS：事實證明，PEI是可行的,，已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了,。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交KyforaBio，相關(guān)產(chǎn)品標簽將變更為KyforaBiobyPolysciences,，后續(xù)購買請認準備新品牌,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息，可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司,！

細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染,。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。2,、制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應(yīng)總體積為例,。準備兩支1.5mL離心管，一管將質(zhì)粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中,，混勻,。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM，充分混合,。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,，充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養(yǎng)基中,，輕輕搖動平皿混勻,，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育。注：每次用100μM的PEI儲存液前都需要先將其充分混勻,，保證所取的濃度一致,。3,、培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預(yù)熱的含有血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng),，16h左右可以觀測到報告基因的表達,。PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種穩(wěn)定的具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子。

產(chǎn)品簡介Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液,，由PEIMAX配置而成,，采用0.1umPES無菌過濾器，完全消除支原體污染風險,。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物,，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞，并且Transporter5-DNA復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,，有效提高轉(zhuǎn)染效率,。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,，可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn),。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO,、COS、HELA,、昆蟲（SF9,、SF21）等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒,，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染,。Transporter5可節(jié)省試劑準備時間，加快項目進度,。經(jīng)過嚴格的性能檢測,，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速,、重復(fù)性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。誰知道Polysciences的轉(zhuǎn)染試劑怎樣,？即用型PEI轉(zhuǎn)染試劑授權(quán)代理商

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