PEI在于可以應用于體內試驗。當初試驗經(jīng)費很有限,，被逼無奈只能放棄脂質體2000,，選擇PEI，以至于相當長的時間內,，轉染試驗都不順利,。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質體2000的說明書，所用質粒盡量去內2.轉染時,，一定要把PEI+DMEM加入到質粒+DMEM中,，順序不可錯，輕微混勻,，靜止20min3.轉染后4小時,，一定要換液！換含有FBS的完全培養(yǎng)液,！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,，建議把血清濃度適當提高。PS：事實證明,，PEI是可行的,，已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了。更多關于PEI轉染試劑相關的信息,，可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司,！更多關于Kyfora Bio by Polysciences PEI轉染試劑相關產品問題，歡迎咨詢上海曼博生物,！哪個品牌的PEI轉染試劑性價比較高,？天津GMPPEI轉染試劑官方代理

瞬時轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測,。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達,。請自行確定適合檢測時間?；蛘哧P注我們的公眾號：Mine-bio天津GMPPEI轉染試劑官方代理用PEI轉染時,，一般和DNA的比例是多少?

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到宜轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉染試劑進行優(yōu)化,。更多產品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物！

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,，歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號：Mine-Bio，查看更多技術文章,！PEI轉染試劑從96孔板到1000L生物反應器規(guī)模都能提供連續(xù)性的高表達蛋白或病毒,。

細胞轉染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導入到靶細胞內,。目前主要有三種主流方法：生物轉染，物理轉染和化學轉染,。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體,，以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見,，其侵染效率可以達到90%以上,，但常因安全性等問題，很多實驗室對其敬而遠之,。物理轉染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因，無論哪一種都需要特定的設備,，且一分錢一分貨,，性能好的價格也都相對較高。如想申請試用裝,，請關注公眾號：Mine-bio,，回復“申請PEI”，即可參加,！PEI轉染試劑的工作原理是什么？天津GMPPEI轉染試劑官方代理

PEI轉染試劑，科學界的得力助手,，加速基因功能研究步伐,。天津GMPPEI轉染試劑官方代理

PEIMAX-----高產工業(yè)化轉染試劑-高度濃縮，可制備大量轉染試劑Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine,，PEI）的產品,，因其較高的轉染效果，已大量應用于工業(yè)化生產,。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,，使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體,。PEI可用作轉染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞,。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉染試劑,。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學家選擇PEIMAX,，在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑,。多年以來，經(jīng)過眾多業(yè)內人士評審的公開研究和出版文獻表明,，在HEK293,、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉染效率，在重組抗體和病毒載體生產中穩(wěn)定性高,，可靠性強,。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續(xù)的高基因表達細胞體系，實現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產的輕松過度,。而且與大多數(shù)細胞轉染方案相比,，使用PEIMAX至少可降低40%轉染成本（部分案例可降低90%轉染成本）。天津GMPPEI轉染試劑官方代理