上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年，依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內(nèi)客戶群體,，生命科學領域一站式供應鏈體系,，以及高風險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢，曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經(jīng)過同行驗證過的產(chǎn)品和技術,，引入中國市場,，開發(fā)、孵育和推廣,，致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術帶入中國,，集中在為細胞/基因領域、/免疫,，抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,，包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質，轉染試劑,、病毒轉導試劑,、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化,。更多關于Polysciences PEI相關產(chǎn)品問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！也歡迎關注我們的公眾號：Mine-Bio.誰知道Polysciences的轉染試劑怎樣？MirusPEI轉染試劑使用說明

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。更多關于PEI轉染試劑相關產(chǎn)品技術問題,，歡迎咨詢上海曼博生物,！北京cGMP級PEI轉染試劑PEI轉染試劑可以轉染哪些細胞？

注意事項質粒質量：請務必使用高質量轉染級無內(nèi)質粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質粒提取試劑盒）,。通過260nm光吸收測定DNA濃度,，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能,，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性,。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌,、或支原體污染,。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞,。如有更多關于PolysciencesPEI轉染試劑相關問題，歡迎咨詢上海曼博生物,！

材料：質粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中,，0.2μm濾膜過濾，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,，加入20ml1M的HEPES,，調pH值到7.4，定容至1L,，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染,。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。歡迎咨詢上海曼博生物,。PEI轉染試劑的主要分子量是多少,？

穩(wěn)定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。近期還有PEIfree申請活動,，歡迎咨詢上海曼博生物！用PEI轉染試劑為什么會出現(xiàn)沉淀,？SigmaPEI轉染試劑品牌

PEI轉染試劑可以轉染哪些細胞呢,？MirusPEI轉染試劑使用說明

產(chǎn)品簡介Transporter5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉染試劑）溶液，由PEIMAX配置而成,，采用0.1umPES無菌過濾器,，完全消除支原體污染風險,。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物，這些復合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞,，并且Transporter5-DNA復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,，有效提高轉染效率。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,，可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293,、CHO,、COS、HELA,、昆蟲（SF9,、SF21）等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質粒,，所以較大的質粒也可以成功地轉染,。Transporter5可節(jié)省試劑準備時間，加快項目進度,。經(jīng)過嚴格的性能檢測,，確保品質，在新藥研發(fā)過程中是一款快速,、重復性好、可用于批量產(chǎn)的轉染試劑,。更多關于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉染試劑,，歡迎咨詢上海曼博生物！MirusPEI轉染試劑使用說明