PEI在于可以應用于體內(nèi)試驗,。當初試驗經(jīng)費很有限,,被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,,選擇PEI,,以至于相當長的時間內(nèi),轉(zhuǎn)染試驗都不順利,。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,,順序不可錯,,輕微混勻,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,,一定要換液,!換含有FBS的完全培養(yǎng)液,!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,,建議把血清濃度適當提高。PS:事實證明,,PEI是可行的,,已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,,可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司,!歡迎關(guān)注曼博生物公眾號:Mine-bio專為細胞實驗設(shè)計,PEI轉(zhuǎn)染試劑提升基因表達效率,。40KPEI轉(zhuǎn)染試劑使用比例
PEI在于可以應用于體內(nèi)試驗,。當初試驗經(jīng)費很有限,被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,,選擇PEI,,以至于相當長的時間內(nèi),轉(zhuǎn)染試驗都不順利,。下面是幾點關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時,一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,,順序不可錯,,輕微混勻,,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時,一定要換液,!換含有FBS的完全培養(yǎng)液,!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當提高,。PS:事實證明,,PEI是可行的,已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了,。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交KyforaBio,,相關(guān)產(chǎn)品標簽將變更為KyforaBiobyPolysciences,后續(xù)購買請認準備新品牌,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,,可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司!In vivoPEI轉(zhuǎn)染試劑用途PEI轉(zhuǎn)染試劑主要用于用于抗體,、蛋白和病毒載體生產(chǎn),。
材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,,定容至1L,,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆谩7椒ǎ?.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,,用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染,。轉(zhuǎn)染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基,。更多產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物,!
1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,,以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化,。歡迎關(guān)注公眾號:Mine-bio快速起效,PEI助力科研人員在短時間內(nèi)獲得轉(zhuǎn)染結(jié)果,。
細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段,,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法:生物轉(zhuǎn)染,,物理轉(zhuǎn)染和化學轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體,,以慢病毒,、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見,其侵染效率可以達到90%以上,,但常因安全性等問題,,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因,,無論哪一種都需要特定的設(shè)備,且一分錢一分貨,,性能好的價格也都相對較高,。如想申請試用裝,請關(guān)注公眾號:Mine-bio,,回復“申請PEI”,即可參加,!PEI轉(zhuǎn)染試劑,,高效助力基因轉(zhuǎn)染研究,試用裝輕松上手,。In vivoPEI轉(zhuǎn)染試劑用途
PEI轉(zhuǎn)染試劑使用的時候有什么注意事項,?40KPEI轉(zhuǎn)染試劑使用比例
產(chǎn)品特點:PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品,。相比于PEI25K,,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化);2.鹽酸鹽形式,,具更高的水溶特性,;3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應用領(lǐng)域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑,,適用于基礎(chǔ)學術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,以固體粉末形式提供,,需用戶自行配置(詳情見使用方法),。也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多詳情信息,!40KPEI轉(zhuǎn)染試劑使用比例